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| 1 | 玉米种子DNA快速提取及杂交种纯度的快速鉴定显示文摘本研究用玉米杂交种渝单8号及其双亲的干种子作为材料,使用NaOH溶液研磨玉米种子胚,提取基因组DNA,并利用多重PCR扩增进行玉米杂交种子的纯度鉴定。结果表明,利用玉米种子快速提取方法获得的DNA可进行正常的SSR扩增,并且从20对玉米核心引物中筛选出了8对扩增谱带呈双亲互补型的引物,将其中3对引物YISSR、phi072和phi299852组合起来扩增,扩增谱带清晰可辨,对渝单8号杂交种子的纯度进行准确鉴定。初步表明利用多重PCR技术鉴定玉米种子纯度是可行的,不仅简便快速,而且降低了检测成本。 | 谭君 杨俊品 | 2009 | 分子植物育种2009,7,4: | 20 |
| 2 | 鉴定玉米杂交种郑单958种子纯度的SSR标记筛选显示文摘利用SSR标记技术,选用50对SSR引物以玉米杂交种郑单958及其父母本DNA为材料,筛选出了4对在杂交种中呈现双亲互补带型的引物。研究表明:这4对引物均可用于玉米杂交种郑单958种子的纯度鉴定。 | 李艺 铁双贵 朱位红 齐建双 卢彩霞 孙建军 周柯 | 2008 | 玉米科学2008,16,1: | 18 |
| 3 | 玉米品种真实性和纯度鉴定的SSR标记多重PCR体系优化显示文摘为了建立稳定可靠的玉米真实性和纯度鉴定SSR标记,对DNA提取方法、SSR引物和多重PCR反应程序进行了优化。结果表明,用预热到75℃以上的研钵和95℃的1.5×CTAB提取缓冲液进行材料研磨,可得到纯度高、完整性好的DNA,并且提取成本较低。利用软件Primer Premier 5.0和Oligo 6.72对玉米指纹鉴定的SSR核心引物进行重新分析与设计,建立了21对SSR通用引物构成的8组多重PCR复合扩增体系和3步法扩增程序,均能在统一的PCR扩增条件下进行,扩增片段之间不存在交叉现象,扩增条带清晰,扩增结果稳定,这一扩增体系检测效率比单对SSR引物提高2.6倍以上。 | 常宏 王汉宁 张金文 王威 路则权 李瑛 王蒂 | 2010 | 草业学报2010,19,2: | 17 |
| 4 | 大白菜基因组DNA快速提取方法的研究显示文摘快速高效的DNA提取是作物大规模分子育种的关键一步。旨为构建一种快速提取大白菜基因组DNA的方法,以大白菜叶片为试验材料,比较了CTAB法、二步CTAB法以及4种碱裂解法提取DNA的质量,分析了不同方法提取的DNA为模板的PCR扩增效果,还对不同方法提取的基因组DNA的保存时间和保存条件进行了比较,选择最优的方法在抗根肿病基因分子标记辅助选择中进行了应用。结果表明,CTAB法和3种碱裂解法提取的基因组DNA作为模板的PCR扩增产物,都可以通过8%的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测到清晰的条带。其中碱裂解法Ⅲ,不仅提取质量好,而且提取过程简单、快速,能够满足大白菜高通量DNA提取的需要,提取的DNA在4℃和-20℃的条件下保存,将保存至30 d的基因组DNA作为模板进行PCR扩增,产物仍然可以通过聚丙烯酰胺凝胶电泳检测到清晰的条带,说明这种方法保存时间较长,经验证,该方法在抗根肿病基因分子标记辅助选择中的应用效果也较好。碱裂解法Ⅲ显著提高了大白菜分子标记辅助筛选的效率,可广泛应用于大白菜分子标记辅助选择育种。 | 王涛 王超楠 张红 温娟娟 张斌 | 2017 | 华北农学报2017,32,6: | 17 |
| 5 | 玉米基因组DNA的提取及SSR分析显示文摘采用改良的CTAB法,以玉米的黄化苗叶片为材料提取玉米基因组DNA,提取的DNA经0.8%的琼脂糖凝胶电泳检测。结果表明:此法具有快速、高效、DNA质量好和纯度高等优点。对所构建的选育高直链淀粉玉米群体的双亲进行了SSR-PCR检测,得到了清晰的多态性SSR标记,为玉米分子标记辅助育种打下了基础。 | 王芳 王化俊 王汉宁 | 2006 | 玉米科学2006,14,2: | 15 |
| 6 | 快速CTAB法提取玉米种子胚基因组DNA显示文摘提出了一种从玉米种子胚中快速提取基因组DNA的新方法。经过紫外分光光度计、琼脂糖凝胶电泳及聚丙烯酰胺凝胶电泳检测表明,该方法所提DNA纯度高,完整性好,完全可以满足SSR-PCR分析的需要。该方法具有安全、经济、快速、方便的特点,有较强的实用性。 | 李艺 铁双贵 朱卫红 齐建双 卢彩霞 孙建军 周柯 | 2008 | 河南农业科学2008,37,2: | 15 |
| 7 | DNA指纹图谱在玉米杂交种真伪及纯度鉴定中的应用显示文摘讨论了玉米DNA指纹图谱的不一致性和外部性状表现之间的对等性或等价性,并对DNA分子标记技术信息的稳定性与真实性进行了分析。认为大多数玉米SSR标记并非基因内标记,同时玉米的基因组序列极其庞大,因此,个别SSR引物多态性并不能辨别被测自交系或单交种;目前,生产上改良品种较多,改良品种与被改良品种之间极为相近,这就难以利用SSR标记将其区分。提出在构建玉米杂交种与亲本的DNA指纹图谱、筛选SSR引物时,尽量选择重要农艺性状的基因内标记或与其紧密连锁的标记,从而增加杂交种纯度及真伪辨别的准确性和有效性,经多次反复摸索建立了最佳技术体系。 | 朱卫红 齐建双 铁双贵 卢彩霞 孙建军 李艺 周柯 | 2007 | 河南农业科学2007,36,10: | 12 |
| 8 | SDS法和CTAB法提取西藏黄籽油菜干种子DNA用于SSR分析显示文摘选用8个西藏黄籽油菜干种子作材料,分别采用SDS和CTAB的微量法提取基因组DNA,取适量的该DNA进行琼脂糖凝胶电泳,并利用uv1100型紫外分光光度计测定所提取的DNA在260nm、280nm的光密度值及比值,并进行SSR标记。结果表明,2种方法均能从西藏黄籽油菜干种子中提取出一定量的比较完整且纯度较高的DNA,用琼脂糖凝胶检测时,表现带型清亮,每个样品带型较一致,利用SDS法CTAB法提取西藏黄籽油菜干种子DNA,均适用于SSR分析。但用CTAB法提取的干种子DNA的纯度更高、量多、质量更好,更适于制备SSR分子标记的模板DNA。 | 旦巴 何燕 卓嘎 孟霞 王建林 | 2011 | 西藏科技2011,,8: | 11 |
| 9 | PCR鉴定时的微量DNA快速制备显示文摘用基因组微量DNA快速提取方法,从胡萝卜转化再生株样品中快速提取了基因组DNA,并以此为模板进行胡萝卜转化再生株的PCR快速检测的结果表明,这是转基因时PCR检测的一种快速、简便、有效方法。 | 陈书霞 姚莲芳 房玉林 | 2006 | 植物生理学通讯2006,42,2: | 11 |
| 10 | 玉米基因组DNA快速提取方法显示文摘探讨了用NaOH裂解法从玉米单子粒胚乳中和用十二烷基肌氨酸钠法从玉米叶片中快速提取基因组DNA的方法,分析了2种方法提取的基因组DNA的效果及应用价值.结果表明,虽然得到的DNA质量基本一致,都可用于玉米品种纯度检验和分子标记辅助选择,但优化的、从叶片中快速提取的基因组DNA可长期保存,并用于多种后续序列分析工作. | 吴向远 丁冬 宋桂良 付志远 | 2012 | 河南农业大学学报2012,46,1: | 11 |
| 11 | 利用SSR标记鉴定玉米杂交种黔单16号纯度的研究显示文摘玉米杂交种纯度鉴定对玉米种子质量管理具有重要意义;本实验利用SSR标记技术,以玉米杂交种黔单16号及其亲本DNA为供试材料,从30对SSR引物中筛选出3对在杂交种黔单16号中呈现双亲带型的引物;研究表明,这3对引物均可用于玉米杂交种黔单16号种子纯度鉴定。 | 郭向阳 陈泽辉 祝云芳 王安贵 邬成 李娟 | 2011 | 种子2011,30,4: | 11 |
| 12 | 利用SSR分子标记鉴定玉米杂交种‘吉祥1号’纯度显示文摘纯度是种子质量的重要指标。‘吉祥1号’玉米杂交种是在甘肃省选育并大面积栽培的主推玉米品种。为鉴定该品种的纯度,本研究开展了‘吉祥1号’纯度鉴定SSR标记方法研究。通过比较快速提取法和改良CTAB法2种DNA提取方法在SSR分子标记纯度鉴定中的应用,结果表明:2种方法提取的DNA均适用于SSR分子标记纯度检测,但快速提取法具有简单、快速的特点,更适用于分子标记纯度鉴定。从20对SSR引物中筛选出2个标记bnlg2291k4和bnlg2305k4,用于‘吉祥1号’品种的纯度鉴定,2个标记均能明显的区分亲本和杂交种。在‘吉祥1号’杂交种中人为混入双亲,采用本研究确定的方法可准确鉴定出混入的自交系。 | 车卓 常宏 张伟 | 2016 | 中国农学通报2016,32,18: | 10 |
| 13 | 玉米干种子基因组DNA提取方法的改进显示文摘为了实现玉米干种子基因组DNA快速提取,针对玉米干种子淀粉含量高的特点,对传统核酸CTAB提取方法进行了优化与改良,将提取的DNA进行分光光度计及琼脂糖凝胶电泳检测。结果显示,DNA的OD_(260)/OD280值为1.79~1.95,OD_(260)/OD230值为1.90~2.15;琼脂糖凝胶电泳图谱清晰,条带无拖尾现象,说明采用改良方法提取的DNA质量高、无降解。以改良方法提取的DNA样品作为模板进行分子标记检测试验,结果清晰稳定,进一步证明采用改良CTAB法直接从玉米干种子中提取的DNA可以满足SSR和SNP等分子试验的要求。 | 董永军 王陆军 郝建平 王艳梅 李培良 王创云 邓艳芳 周琼 李志敏 庞冰 张婷婷 | 2017 | 山西农业科学2017,45,12: | 10 |
| 14 | 郑58和掖478玉米自交系基因组差异性分析显示文摘采用SSR标记对我国核心种质郑58和掖478进行基因组差异性分析。结果表明:200对引物中有57对引物具有多态性,多态性标记比率达到28.5%,遗传相似度为71.5%。200对引物共计扩增出424个SSR等位性片段,其中有113个多态性等位片段,遗传杂合度为26.7%,遗传相似度为74.3%。SSR多态性标记在不同染色体上呈现不均匀性分布,在同一染色体上不同区域分布密度不同,具有多态性标记集中区域,基因组差异可能与自交系配合力变化有关。 | 王彦玲 卫文星 铁双贵 王延召 朱卫红 岳润清 齐建双 | 2010 | 玉米科学2010,18,3: | 9 |
| 15 | 不同碱裂解法快速提取甜菜大群体DNA的研究显示文摘尝试使用一种新的方法提取甜菜干种子DNA,该方法不需要使用CTAB、SDS及其它提取DNA中需要使用的常规药剂,该方法仅需要使用NaOH一种试剂,提取几十份DNA只需要10几分钟的时间,并且提取的DNA完整性很好,完全可以满足甜菜SSR扩增的需要,为将来快速鉴定甜菜品种纯度和真伪性等工作奠定了坚实的基础。 | 吴则东 王华忠 倪洪涛 | 2013 | 中国糖料2013,35,3: | 9 |
| 16 | 杂交玉米种子纯度SSR技术鉴定结果的分析显示文摘根据SSR位点共显性的特点筛选双亲互补的多态性引物,进而利用多态性引物对24份玉米杂交种样品进行纯度鉴定。同时对这些样品进行田间纯度种植鉴定,分析两种方法鉴定结果的一致性。结果显示,SSR分子标记鉴定的结果与田间种植鉴定结果差异不显著,可以替代田间种植鉴定进行玉米杂交种纯度鉴定。 | 吴明生 贾希海 律宝春 田雷 | 2006 | 种子科技2006,24,6: | 9 |
| 17 | 利用SSR标记技术鉴定玉米品种真实性的研究显示文摘从20对SSR基本引物中筛选出核心引物,并对辽宁省主推玉米品种进行真实性研究。利用SSR标记技术,选取均匀覆盖玉米染色体组的20对SSR引物对玉米品种进行PCR扩增分析。依据带型清晰与否、稳定性等筛选出14对核心引物用于辽宁省主推玉米品种的真实性鉴定,其中以引物bnlg161k8的多态性最好,且仅采用bnlg161k8、bnlg2305k4及umc1705w1三对引物即可对实验中所选玉米品种进行真实性鉴定。bnlg161k8、bnlg2305k4及umc1705w1这3对引物可作为玉米品种真实性鉴定的首选引物,既节约成本,又提高效率。 | 岳静 朱志成 申雅娟 张卉 王汝宝 | 2011 | 中国农学通报2011,27,12: | 9 |
| 18 | 玉米真实性SSR鉴定标准的研制及应用显示文摘全面总结真实性鉴定的类型及与其他鉴定项目的区别,系统分析我国玉米真实性SSR鉴定标准的研制过程中的关键问题,比较不同作物品种真实性鉴定标准研制的异同,为其他作物类型及其他分子标记类型的真实性鉴定标准研制提供借鉴。玉米真实性鉴定标准在我国已得到快速推广和应用,为种子市场的繁荣和稳定提供了有力的技术支撑。 | 王凤格 易红梅 赵久然 田红丽 任洁 葛建镕 王璐 | 2016 | 玉米科学2016,24,4: | 7 |
| 19 | 不同取样方式对DNA快速提取效果的影响显示文摘利用快提法对不同取样部位及不同取样时期的样品提取DNA并进行PCR检测,结果表明:PCR扩增效果较好的样品包括种子胚、胚乳、未发芽时的水培初生根和次生根的根尖、发芽1d的胚芽(幼叶)、发芽1—3d的胚芽鞘、以及发芽3.5d的中胚轴;而发芽后的水培根尖、发芽3d的幼叶、发芽5d的胚芽鞘、发芽10d的中胚轴提取的DNA扩增效果较差或没有扩增产物。 | 易红梅 张芳 王凤格 赵久然 陈景堂 郭景伦 王璐 | 2007 | 华北农学报2007,22,5: | 7 |
| 20 | 一种快速提取棉花干种子基因组DNA的新方法显示文摘摘要:利用SSR(Simple sequence repeats)分子标记技术,能够快速有效地进行杂交棉纯度鉴定。为了攻克SSR分子标记技术中存在的技术难关,本文专门对棉花干种子胚的基因组DNA提取方法进行了研究。利用该方法,只需要2次加液、1次离心,从基因组DNA提取到SSR—PCR扩增,最后电泳,进行谱带分析,整个过程仅需4.5~5h。本方法成本低、速度快、操作简单,适用于批量化DNA的提取,且整个提取过程无毒、无污染,是一种资源节约型和环境友好型的高效提取方法,适用于大批量样本的SSR分子标记鉴定工作。 | 郎需勇 刘伟霞 杨亮 周文华 吴建功 别传述 | 2014 | 棉花学报2014,26,1: | 7 |