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| 1 | 大白菜基因组DNA快速提取方法的研究显示文摘快速高效的DNA提取是作物大规模分子育种的关键一步。旨为构建一种快速提取大白菜基因组DNA的方法,以大白菜叶片为试验材料,比较了CTAB法、二步CTAB法以及4种碱裂解法提取DNA的质量,分析了不同方法提取的DNA为模板的PCR扩增效果,还对不同方法提取的基因组DNA的保存时间和保存条件进行了比较,选择最优的方法在抗根肿病基因分子标记辅助选择中进行了应用。结果表明,CTAB法和3种碱裂解法提取的基因组DNA作为模板的PCR扩增产物,都可以通过8%的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测到清晰的条带。其中碱裂解法Ⅲ,不仅提取质量好,而且提取过程简单、快速,能够满足大白菜高通量DNA提取的需要,提取的DNA在4℃和-20℃的条件下保存,将保存至30 d的基因组DNA作为模板进行PCR扩增,产物仍然可以通过聚丙烯酰胺凝胶电泳检测到清晰的条带,说明这种方法保存时间较长,经验证,该方法在抗根肿病基因分子标记辅助选择中的应用效果也较好。碱裂解法Ⅲ显著提高了大白菜分子标记辅助筛选的效率,可广泛应用于大白菜分子标记辅助选择育种。 | 王涛 王超楠 张红 温娟娟 张斌 | 2017 | 华北农学报2017，32，6： | 17 |
| 2 | 适于甜菜品种鉴定的SSR核心引物的筛选显示文摘为了筛选出适合于甜菜杂交种鉴定的核心引物,以16个在中国种植面积较大的进口甜菜品种为材料,对已公布的130对甜菜SSR引物以及70对甜菜EST-SSR引物进行筛选。结果从200对甜菜SSR引物中筛选出了24对扩增条带清晰、重复性好且多态性高的核心引物。这24对引物中有22对引物的PIC值大于0.5,其中7对引物的PIC值均大于0.8,可以作为甜菜品种鉴定的首选核心引物。利用筛选出的核心引物对16个甜菜品种进行聚类分析,结果16个品种分为3类,基本上是同一公司的品种聚在了一起。甜菜SSR核心引物的筛选将大大加速甜菜品种纯度和真实性鉴定的速度,也将更快的促进甜菜分子生物学其他领域的发展。 | 吴则东 王茂芊 马龙彪 王华忠 倪洪涛 | 2015 | 中国农学通报2015，31，15： | 10 |
| 3 | 不同方法对甜菜叶片基因组DNA提取效果比较与适用性探讨显示文摘对比了7种不同原理的提取方法对甜菜叶片基因组DNA的提取效果,从得率、纯度、耗时等多方面分析DNA提取效果,为不同研究目的确定了最适的提取方法。最终确定了SDS法是最适合自甜菜叶片中低成本大量提取DNA的方法,CTAB也基本能满足要求,吸附柱法是最适合高通量提取优质DNA的方法,碱裂解法是最适合样品迅速检测的方法,必要时可改用ROSE法。柠檬酸钠法产物质量不高且操作不够简便,尿素法产物纯度过低且耗时过长,在应用上未见优势。 | 王希 陈丽 赵春雷 李彦丽 丁广洲 贾海伦 徐杰 廖鹏 | 2015 | 中国糖料2015，37，5： | 5 |
| 4 | 适合甜菜品种鉴定的SRAP核心引物的筛选显示文摘为筛选适合甜菜品种纯度鉴定的SRAP核心引物,以12个进口国外甜菜品种为材料,对546对SRAP引物组合进行扩增,利用8%的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳进行分离,选择适合甜菜品种纯度鉴定的SRAP核心引物组合。结果从546对SRAP引物组合中筛选出扩增条带清晰、多态性丰富、重复性好的引物组合23对,这23对引物组合共扩增出177条多态性条带,引物的PIC值均大于0.6。平均每对引物扩增7.7条多态性条带,从理论上讲,这些核心引物完全可以实现对现有甜菜品种的鉴定。 | 吴则东 王凤华 喻丹丹 周利利 倪洪涛 马龙彪 | 2015 | 中国农学通报2015，31，30： | 5 |
| 5 | 样品不同处理方法提取甜菜基因组DNA的比对研究显示文摘为了提高甜菜基因组DNA的提取效率以及避免提取过程中DNA的降解,通过利用研磨机和锡箔纸两种不同的方法处理样品。结果表明,利用研磨机可以极大地提高研磨样品的效率,样品可以直接放到离心管中、加入缓冲液和钢珠后,直接利用研磨机进行打磨,一次可以处理24个样品;而利用锡箔纸进行研磨样品,既可以直接加液氮进行研磨也可以冷冻后再加液氮进行研磨,样品损失小,DNA无降解。两种方法提取的DNA含量接近,并且提取的DNA均可用于SSR引物的扩增。 | 邹奕 兴旺 朱尚明 栗媛 齐少玮 吴则东 | 2018 | 中国糖料2018，40，4： | 4 |
| 6 | DNA提取方法对实时荧光定量PCR检测花生过敏原Ara h 2基因的比较研究显示文摘食物过敏是一个世界性的公共卫生问题,其中花生过敏最为严重。基于DNA的分子生物学检测方法目前已广泛应用于花生过敏原检测,样品DNA的提取质量会显著影响检测的灵敏度及准确率。本研究比较了5种DNA提取方法,包括十六烷基三甲基溴化铵(cetyl trimethyl ammonium bromide,CTAB)法、柱式法及3种基于磁珠纯化技术的DNA快速提取法,对生花生、煮花生、炸花生、烤花生、花生酥和花生酱6种不同加工方式的花生基质样品进行DNA提取,考察了不同方法获得的DNA浓度、纯度指标,并采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)对花生过敏原Ara h 2基因进行了检测分析。结果表明,月桂酰肌氨酸钠(Sodium Lauroyl Sarcosine)磁珠法的适用性广、提取率高,对于6种花生基质提取的DNA均能高效检出花生过敏原Ara h 2基因;对于花生质量分数为0.05%~1.00%的小麦粉二元混合物,SLS磁珠法的DNA提取率总体优于CTAB法,并且能有效提取出与花生共用1条生产线的燕麦片中污染的花生DNA,证实SLS磁珠法提取的实际样品DNA能够满足花生过敏原检测目的。本研究为花生及其制品DNA提取方法提供了参考,特别是磁珠类方法,高效快速,提取质量能够保障后续基于DNA的花生过敏原分子生物学方法检测结果的准确性。 | 李慧敏 汪洋 王楠希 赵冬蕾 黄凯 崔华 郭宝元 王松雪 管骁 | 2023 | 中国粮油学报2023，38，7： | 2 |
| 7 | 一种简便高效的大豆基因组DNA快速提取方法显示文摘CTAB或者预混试剂盒是当前提取植物基因组DNA的常用方法,提取步骤比较繁琐,提取时间较长且在提取过程中会用到易制毒试剂,具有一定风险性。探索一种适用于植物基因组DNA的绿色不易制毒、操作简单、效率高和耗时短的提取技术,不仅可以节省时间,还能提高效率,避免易制毒试剂对人身和环境的危害。基于上述目的,本研究借鉴其他作物快速高效提取基因组DNA的方法,基于NaOH裂解法建立了一个简便快速提取大豆基因组DNA的技术方法。该技术方法能满足常规分子辅助育种的高通量样品基因组PCR检测,具有一定的利用价值和应用前景。 | 杜艳伟 张煦 李佳男 姜振峰 | 2022 | 黑龙江农业科学2022，，12： | 2 |
| 8 | 花生DNA快速提取方法及应用显示文摘为了能够高效快速提取群体花生DNA,本研究在碱裂解法的基础上进一步简化步骤,以不同浓度NaOH溶液为提取液,采用直接吸取上清进行PCR和吸取部分上清中和后进行PCR,分析了两种方法的提取效果。结果表明,用1.000 mol/L NaOH溶液裂解后,吸取部分上清中和后的DNA扩增效果更好,与用SLS常规法提取的DNA质量效果相同。该方法简便快捷,在很短的时间内能够提取大量花生群体材料的DNA,并具有较高的稳定性,可在花生分子标记辅助选择育种中广泛应用,为不同基因型花生的高通量快速筛选奠定了基础。 | 李柯 赵昆昆 宁龙龙 马倩 李忠峰 马兴立 张幸果 殷冬梅 | 2019 | 山东农业科学2019，51，9： | 1 |
| 9 | 基于碱裂解法川贝母的鉴别显示文摘利用碱裂解法提取川贝母DNA,考察不同裂解液配比对川贝母DNA质量与电泳成功率的影响,并与现行方法相比较。结果表明,含有200 mmol/L NaCl溶液,5 mmol/L Mg 2 Cl溶液,1%Triton X-100,1%PVP,1%SDS,2 mmol/L EDTA,0.1 mol/L Tris-HCl配比液的碱裂解液具有最佳的DNA提取效果,此碱裂解液提取的DNA电泳条带与现行方法一致,可节省15~20 min,单个样品检验成本可降至0.01元。采用该方法对25个市售贝母样本进行鉴定,可快速鉴别出川贝母的真伪。 | 陈玉秀 彭必武 李雨嫣 | 2019 | 食品与机械2019，0，9： | 1 |
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