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1玉米叶片基因组快速提取方法研究显示文摘SSR(Simple Sequence Repeat)分子标记技术已经成为玉米常规育种某些性状辅助选择的重要手段,需要对大量个体样本进行标记分析。高效、快速提取植物组织基因组DNA是关键的技术环节。本研究以高油玉米回交世代群体25~30d单株幼叶为材料,建立以EDTA、CTAB、KCl为主要试剂,结合组织研磨棒液氮研磨为主要步骤的基因组DNA快速提取方法,并探讨了将提取的DNA应用于SSR分子标记辅助选择的可行性。穆春华 张发军 李文才 孙琦 丁照华 王磊 孟昭东 2010玉米科学2010,18,3:19
2蓖麻种质资源遗传多样性的ISSR分析显示文摘应用ISSR标记,对国内外17个蓖麻材料的亲缘关系进行了分析,从60条引物中筛选出11条能扩增出清晰条带并具有多态性的引物,且这些引物共计扩增出90条DNA条带,平均每个引物扩增的DNA条带数为8.18条,其中,多态性DNA条带57条,占63.33%。根据ISSR扩增结果,利用NTSYS-ps软件进行聚类分析,结果表明:17份蓖麻材料的遗传相似系数在0.52~0.97间,且明显分为2个大类群。以相似系数0.79为准线,又可将第二大类群分为2个亚类群与2份单一材料。9份国内材料与2份法国材料同属一个亚类群,遗传相似性相对较高。黄文霞 何觉民 朱宏波 2008西北农业学报2008,17,1:18
3大蒜种质遗传多样性的SSR分析显示文摘为了探索中国大蒜种质个体的SSR位点的分布情况,为品种鉴定、保存及遗传改良提供分子生物学依据,利用6对SSR引物对40个大蒜(Allium sativumL.)品种进行聚类分析、主成分分析及遗传多样性评价。共检测到21个多态性位点,平均每对引物可扩增出约3.5条多态性片段,多态性百分率为56.76%;SSR引物组合平均有效等位基因数、Nei基因多样度和Shannon信息指数分别为1.5551、0.3414和0.5188。聚类分析显示,6对SSR引物可把40份大蒜种质资源从0.59相似系数水平上3个类群。第一类群包含28份种质,在相似系数为0.73的水平上进一步又被分成了3个亚类;第二亚类仅包含2份种质;第三亚类包含10份种质,在0.68的相似系数水平上分成了2个亚类。主成分分析和UPGMA的结果基本一致。不同地理来源的大蒜种质的Shannon-Weaver多样性指数的变幅为0.0576~0.4179,说明大蒜种质遗传多样性丰富。本研究利用SSR分子标记技术较准确地解析大蒜不同材料间的亲缘关系及遗传多样性,为中国大蒜SSR分子标记提供基础资料。陈书霞 常燕霞 周静 杜俊娜 程智慧 孟焕文 2012农业生物技术学报2012,20,4:11
4新疆8个棉花品种(系)的指纹图谱分析显示文摘利用ISSR对8个新疆品种(系)进行指纹图谱构建。通过基因组多态性分析,从60条引物中筛选到11条扩增效果好的引物,用其中2条引物UBC809,UBC841建立8个品种的指纹图谱,统计品种鉴定的置信概率达到1/8388608。结果显示,ISSR分子标记技术对棉花品种的指纹图谱构建具有高效性和准确性。姜伟 李雪源 何觉民 陆建农 2007华北农学报2007,22,B10:8
5一种基于PCR的简易快速提取植物叶片DNA的方法显示文摘传统植物全基因组DNA提取常采用SDS和CTAB法,随着分子生物学技术的快速发展,样品的DNA提取速度已很难满足样品高通量检测的需要。因此,建立基于PCR分析的简便、高效、低成本的DNA提取方法有助于分子生物学试验的开展。本试验改进了传统的DNA提取方法,操作过程中仅需要几种常见的国产分析纯试剂,简单快速、安全无毒,且不污染环境,并选用了27对玉米SSR引物进行了DNA的扩增验证。结果显示,该方法提取的幼苗叶片DNA能够满足基于PCR的玉米自交系的种质类群划分的要求,表明该方法是一种基于PCR的简易、快速提取植物叶片DNA的有效方法。李海超 秦保平 王健 蔡瑞国 周印富 刘春晓 刘强 刘铁山 杨晴 韩金玲 杨敏 2019种子2019,38,11:6
6微量提取小麦叶片中条锈菌DNA的方法初探显示文摘小麦条锈菌DNA的提取对于研究条锈菌遗传群体结构,条锈菌遗传多样性以及揭示条锈菌群体类型和预测优势小种的流行,具有重要的意义。但是常规的病原菌DNA提取首先需要获得大量的病原物纯化体,再对病原物进行DNA提取,费时费力。本文直接对含有条锈菌的小麦叶片标样进行DNA提取,从中获得条锈菌的DNA,用于后续研究。既节省了大量的人力、物力和财力,又为快速检测和获得所需的DNA提供了参考方法,为快速了解病原菌的群体遗传结构变化和毒性演化的规律创造了可行性,为深入研究小麦条锈菌群体生物学和流行学奠定了基础。张庆 李枝桦 李进斌 李成云 曾莉 2010西南农业学报2010,23,6:4
7富贵竹种质资源遗传多样性的ISSR分析显示文摘利用ISSR分子标记技术对10份富贵竹(Dracaena sanderiana)材料进行了遗传多样性研究。从36个引物中筛选出8个有效引物,共扩增出125条带,其中多态性条带为69条,多态性比率为55.2%,遗传相似性系数范围在0.64~0.95之间。根据ISSR标记的结果,采用UPGMA聚类分析方法,可将供试材料分为3大类群。研究结果表明,供试富贵竹材料的遗传多样性相对较低,迫切需要拓宽富贵竹的遗传基础。林巧玲 吴秋明 2009中国农学通报2009,25,10:3
8黄瓜遗传转化体系优化及表皮毛基因Gl的转化显示文摘选用黄瓜无毛突变体gl的子叶节为材料,对芽诱导阶段及根诱导阶段潮霉素的浓度进行筛选,分别确定2和3mg/L为其最适浓度;以pCAMBIA2301-gusA为载体,农杆菌GV3101介导,筛选出Silwet L-77(表面活性剂)的最佳体积分数为0.04%,侵染液浓度以原菌液(OD600=0.6)等倍稀释最佳;另外,对快速提取黄瓜DNA方法进行了优化。结果表明,添加500μL 0.5mol/L NaOH与200μL 100mmol/L Tris-HCl的组合最好。用优化的体系对表皮毛基因Gl进行遗传转化,获得7株阳性苗,为研究Gl基因的调控机制奠定了基础。李月 赵俊龙 杨绪勤 杨俊俊 潘俊松 何欢乐 蔡润 2014上海交通大学学报(农业科学版)2014,32,6:2
9裂叶牵牛突变体的研究显示文摘[目的]研究裂叶牵牛花色、叶色等变化机理。[方法]通过田间调查,利用PCR技术从裂叶牵牛蓝白相间突变株幼叶组织中扩增出目的片段,构建重组质粒pMD18-T/Tpn。[结果]田间调查结果发现,变异株的F3代发生分离,叶色突变并不影响花色的变化;PCR扩增结果表明,以蓝白、纯蓝、大花基因组DNA在330 bp处各有1条特异带,而春光、白雪、平安红、垂蔓都没有特异带出现。[结论]变异株重组质粒序列为裂叶牵牛的转座子序列片段。刘晓红 李叶峰 彭丽媛 陆小平 2011安徽农业科学2011,39,28:1
10转基因杨树外源基因PCR检测模板DNA的快速制备显示文摘用带盖离心管定量取转基因毛白杨组培苗及其室外8 a生植株叶片,加入DNA提取缓冲液研磨,离心后取上清液稀释5倍。取1μL作为PCR模板DNA检测杨树外源Bt和Npt II基因。PCR产物经琼脂糖凝胶电泳检测,目的条带清晰,可重复性强。王晓锋 潘建芝 李燕玲 杜克久 2009河北林果研究2009,24,4:0
11裂叶牵牛突变体的研究(英文)显示文摘[目的]了解裂叶牵牛花色、叶色等变化机理。[方法]通过田间调查,利用PCR技术从裂叶牵牛蓝白相间突变株幼叶组织中扩增出目的片段,构建重组质粒pMD18-T/Tpn。[结果]田间调查结果发现,变异株的F3代发生分离,叶色突变并不影响花色的变化;PCR扩增结果表明,以蓝白、纯蓝、大花基因组DNA在330bp处各有1条特异带,而春光、白雪、平安红、垂蔓都没有特异带出现。[结论]变异株重组质粒序列为裂叶牵牛的转座子序列片段。刘晓红 李叶峰 彭丽媛 陆小平 2011Agricultural Science & Technology2011,12,8:0
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