用酵母双杂交体系筛选与FMRP相作用蛋白的cDNA

查看全文 作　　者：[1]陈雨亭;Anne [2]Sittler;[1]余珉;Barbara [2]Bardoni;[1]吴冠芸;Jean Louis [3]Mandel;[1]沈岩

机构地区：[1]中国医学科学院,中国协和医科大学,基础医学研究所,医学分子生物学国家重点实验室;[2]IGBMC CNRS-INSERM-ULP67404 Illkirch France;[3]IGBMCCNRS-INSERM-ULP67404 IllkirchFrance

出　　处：《中国医学科学院学报》索引1998年第20卷第3期,共6页

基　　金：'中法先进研究计划'(B96-17)项目;国家杰出青年科学基金(39625007);863计划(102-10-03-05);教委博士点基金(96002338) 摘　　要：目的采用酵母双杂交体系寻找与脆性X智力低下蛋白(Fragile X men-tal retadation protein,FMRP)相互作用的蛋白,探讨FMRP的生物医学功能。方法以编码FMRP_(Pro327-Thr518)肽段的cDNA序列与pBTM116质粒DNA结合结构域重组作为'钓饵',从小鼠胚胎cDNA文库中筛选与之相互作用蛋白的cDNA。结果筛选出13个与FMRP_(Pro327-Thr518)肽段特异性地相互作用的克隆,其中12个为小鼠泛素转运酶9(UBC9),1个是在GenBank中无高同源序列的未知cDNA序列。结论小鼠UBC9与人UBC9的氨基酸序列完全相同,且FMRP与UBC9蛋白表达的时空特征相似,因此认为人UBC9是与FMRP相互作用的蛋白,其相互作用的生物学意义有待进一步研究。本工作表明酵母双杂交体系是研究蛋白质相互作用的有效方法。 关键词：脆性X智力低下蛋白酵母双杂交体系 CDNA 筛选

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