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| 1 | 不同方法从大豆不同组织中提取基因组DNA效果的比较显示文摘从大豆组织中获得高质量和足够产量的基因组DNA,是进行大豆分子生物学研究的基础。为进行大豆基因组的PCR,RAPD,SSR等分子生物学研究,分别以大豆种子和其叶片为实验材料,采用改良的SDS法和CTAB法对大豆基因组DNA进行了提取。对DNA的提取效果,采用紫外分光光度检测、琼脂糖凝胶电泳分析及DNA的限制性内切酶图谱分析进行了综合比较。结果表明,在以叶片为材料时,SDS法和CTAB法的大豆基因组DNA的提取效果差别不大,SDS法稍好于CTAB法。在以大豆种子为材料时,SDS法的提取效果明显优于CTAB法,SDS法可从大豆种子中提取到能够充分满足各种分子操作的高质量和数量的大豆基因组DNA。 | 王振东 孙仓 王惠 | 2008 | 大豆科学2008，27，1： | 37 |
| 2 | 高盐低pH值法提取大豆不同组织DNA的效果显示文摘以大豆品种吉农18和吉林47的叶片、种子和鼓粒期鲜豆荚为材料,利用优化的高盐低pH值法提取大豆基因组DNA,同时采用改良的SDS法和CTAB法进行提取,并对DNA的纯度、浓度及提取质量进行比较分析。结果表明,在以大豆种子和鼓粒期鲜豆荚为材料时,高盐低pH值法提取基因组DNA的效果最佳,其纯度及浓度均高于改良的SDS法和CTAB法,且该方法具有成本低、步骤简单、时间短、不使用或少用有毒试剂等优点,是一种高效、快速、经济的大豆基因组DNA提取方法。 | 姚丹 闫伟 关淑艳 常唯一 王丕武 | 2009 | 河南农业科学2009，38，12： | 19 |
| 3 | 大豆转基因检测中DNA提取方法的比较研究显示文摘为筛选出用于大豆DNA提取的适宜方法,分别使用Bayer法、DuPont法、Monsanto法、Qiagen和Tiangen试剂盒法提取大豆子粒DNA,并通过紫外分光光度法、琼脂糖凝胶电泳法与实时荧光聚合酶链式反应分析DNA质量。结果显示:Bayer法提取的DNA含有较多杂质,抑制实时荧光聚合酶链式反应;Monsanto法提取的DNA纯度差且得率低,不符合检测要求;DuPont法、Qiagen与Tiangen试剂盒法能提取到纯度好、得率高、完整性好的DNA,符合实时荧光聚合酶链式反应的检测要求,但是Qiagen试剂盒法成本过高。因此,DuPont法与Tiangen试剂盒法适用于大豆转基因检测中的DNA提取。 | 刘欣 祝长青 王毅谦 沈赟 黄明 蒋原 周光宏 | 2013 | 食品科学2013，34，4： | 19 |
| 4 | CTAB法高效提取苹果叶片DNA的研究显示文摘为研究CTAB法在正常条件和逆境条件下,从富含多酚和多糖等多种次生代谢物质的苹果树叶片中分离出高质量的基因组DNA,以抗旱能力较强的八棱海棠(Malus micromalusRehd.)和抗旱性较弱的平邑甜茶(Malus hupehensis pampReld.)幼苗为试验材料。用20%聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG6000)模拟干旱,采取CTAB提取缓冲液,按一定比例加入PVP和β-巯基乙醇,用Tris平衡酚-氯仿-异戊醇除去蛋白质及杂质,在粗提时用异丙醇沉淀DNA,并用DNA洗液(10 mmol/L醋酸铵,75%乙醇)洗涤DNA,在纯化时用乙醇沉淀DNA,且没有加入RNase去除RNA的方法,分别提取2个品种正常和干旱胁迫的苹果属叶片总DNA,并对提取的DNA进行琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测。结果表明:此方法可有效去除次生物质对DNA的干扰,得到高质量、特征带形清晰的大量DNA。并就提取过程中遇到的问题,提出了相应的解决办法。 | 李春霞 李宏飞 | 2009 | 北方园艺2009，，2： | 17 |
| 5 | 适于SSR分析的大豆干种子中DNA快速提取显示文摘为了探寻大豆干种子中的DNA快速提取方法,以2个大豆品种的干种子为材料,在SDS提取液中加入蛋白酶K、NP-40、Tween-20情况下,并减少氯仿/异戊醇的抽提次数,研究对提取DNA质量的影响。结果表明,SDS提取液中加入3种试剂后,即使使用氯仿/异戊醇抽提1次,其DNA的0D260/0D280值也在1.8—2.0之间,能够满足SSR扩增模板的需求。说明此方法既可获得较高纯度的DNA,又可大大缩短大豆干种子中的DNA提取时间。 | 张伟 谢甫绨 宋显军 曹萍 郭玉华 | 2007 | 华北农学报2007，22，2： | 16 |
| 6 | 大豆种子DNA快速提取方法的改良及应用显示文摘高质量的DNA是进行基因克隆等分子生物学试验的前提条件。因大豆种子中蛋白质和油脂含量丰富,利用传统方法提取DNA质量很难达到试验要求。研究在SDS提取液的基础上,通过添加表面活性剂NP-40和Tween-20,优化出一种适合于大豆种子DNA快速提取的方法。优化后的SDS方法提取的DNA质量较高,OD260/OD280在1.809~1.916之间,无蛋白质和RNA污染。对该方法提取的DNA进行了基因克隆和分子标记的试验验证,结果表明,它们能够用于大豆基因克隆、分子标记。 | 朱振雷 束永俊 李勇 柏锡 才华 纪巍 朱延明 | 2009 | 东北农业大学学报2009，40，10： | 14 |
| 7 | 多环境条件下大豆倒伏性相关形态性状的QTL分析显示文摘【目的】定位大豆倒伏性相关形态性状的QTL为培育抗倒伏性高的品种提供依据。【方法】以美国大豆品种Charleston为母本,东北农业大学大豆品系东农594为父本及其F2:16—F2:18的重组自交系的147个株系为试验材料,164个SSR引物经亲本筛选后用于群体扩增,并构建遗传图谱。在三年两个地点对大豆的主茎节数、茎粗和茎秆重性状进行调查及QTL分析。【结果】共检测到16个主茎节数QTL,分别位于A1、B1、C2、D1a、D2、F、G、H和N连锁群上;检测到10个茎粗QTL,分别位于A1、B1、C2、D1a、E和G连锁群上;检测到15个茎秆重QTL,分别位于A1、A2、C2、D1a、D1b和G连锁群上。在得到的这些QTL中,2种算法都能检测到5个主茎节数QTL,解释表型变异范围为8.6%—27.0%;1个茎粗QTL,解释表型变异范围为9.0%—11.0%;6个茎秆重QTL,解释表型变异范围为6.0%—39.0%。在2年以上能被检测到3个主茎节数QTL,解释表型变异范围为8.0%—60.2%;2个茎秆重QTL,解释表型变异范围为10.0%—23.0%;2年以上未重复检测到茎粗QTL。【结论】通过比较定位的主茎节数、茎粗和茎秆重QTL,发现这些性状之间存在较大的遗传相关性。 | 范冬梅 杨振 马占洲 曾庆力 杜翔宇 蒋洪蔚 刘春燕 韩冬伟 栾怀海 裴宇峰 陈庆山 胡国华 | 2012 | 中国农业科学2012，45，15： | 12 |
| 8 | 水稻玉米基因组DNA提取方法的改进显示文摘以水稻、玉米为材料 ,对其基因组DNA的提取方法进行改进 ,通过减少饱和酚和氯仿等有机试剂处理次数 ,适当延长有机试剂的抽提时间 ,提高提取DNA的得率和纯度 ,并且能更有效地避免干扰物质的污染 ,得到均一的大片段的DNA。检测结果表明 ,该方法普遍适合玉米、水稻作物材料的DNA提取 。 | 陶刚 刘作易 朱英 宋吉轩 陈泽辉 阮仁超 | 2004 | 贵州农业科学2004，32，6： | 11 |
| 9 | 几个杏李品种成熟叶片基因组DNA的提取显示文摘用改良的CTAB法提取几个杏李品种成熟叶片的基因组DNA,裂解细胞核前先用洗液排除细胞质中的部分多糖、多酚、丹宁和果胶等物质的干扰;裂解细胞核时,在提取液中加入乙醇进一步去除多糖,结果表明,提取的基因组总DNA的纯度和完整性都较好,OD260/OD280值在1.70-1.93之间,DNA无降解现象,没有多糖污染,可被限制性内切酶消化,所提取的基因组DNA的SRAP扩增条带清晰,多态性好。说明用此方法提取到了质量合格的杏李基因组DNA,可以用于PCR和限制性内切酶分析。 | 张慧蓉 乔玉山 曹尚银 张传来 扈惠灵 薛华柏 | 2008 | 江西农业学报2008，20，10： | 11 |
| 10 | 大豆不同组织材料的DNA提取显示文摘以大豆叶片、愈伤组织和干种子为材料进行大豆基因组DNA提取的比较试验.结果表明:从以上3种组织材料中均能提取到较高质量的DNA,利用愈伤组织为材料提取的DNA质量比叶片和种子略好,从愈伤组织中可以提取到质量较高的模板DNA. | 周德银 周以飞 潘大仁 | 2005 | 福建农林大学学报(自然科学版)2005，34，4： | 11 |
| 11 | 白僵菌的分离鉴定及ITS序列分析显示文摘从我国13个省市43个地区采集263份土壤样品及感染白僵菌的昆虫样品58份,采用稀释平板法和组织分离法进行白僵菌的分离及形态学鉴定,分离出白僵菌菌株154株,鉴定为白僵菌属2个种,分别是球孢白僵菌和布氏白僵菌,对其中的疑问菌株进行了核糖体DNA-ITS测序分析,所测菌株均为球孢白僵菌。 | 陈立杰 刘彬 郑莹 段玉玺 陈井生 | 2008 | 湖北农业科学2008，47，12： | 10 |
| 12 | 单粒干燥大豆种子基因组DNA提取的有效方法显示文摘大豆基因组DNA的提取是进行大豆分子生物学研究的基础。以大豆干燥的种子为材料,将SDS法和CTAB法结合在一起并进行了一定的改进,有效的提取了基因组DNA。通过电泳、紫外分光光度计检测和ISSR标记分析验证这种方法是提取大豆干种子基因组DNA的有效方法。 | 田苗苗 周延清 牛敬媛 贾敬芬 郝建国 | 2005 | 生物学通报2005，40，10： | 9 |
| 13 | 用于PCR的大豆DNA快速提取改良方法显示文摘大豆DNA的提取是进行大豆分子生物学研究的基础。为了探索方便快捷的适合大豆分子生物学研究的DNA提取方法,在Aljanabi和Martinez 1997年提出的通用DNA快速盐提法的基础上,调整缓冲液中NaCl、Tris-HC1、EDTA浓度,提出一种适合大豆叶片DNA提取的改良盐提方法。该方法具有快速、简易和环境友好的特点。试验表明,该改良方法所提DNA凝胶条带清晰,无拖尾,浓度在1.5397~2.1039μg/L之间,0D260/OD280检测值在1.6913~1.8025之间,所提DNA适用于PCR,PCR结果理想。 | 王家保 吴跃进 余增亮 | 2006 | 河南农业科学2006，35，5： | 9 |
| 14 | 作物分子身份证构建软件ID analysis的编制显示文摘【目的】以作物品种或资源的SSR分子标记为基础数据,应用Visual Basic6.0开发作物分子身份证构建配套软件ID analysis,快速准确地筛选引物组合并高效鉴定品种。【方法】作物分子身份证理论由陈庆山提出,其原理是利用SSR标记在材料中的多态性特点,将多个标记进行排列组合,快速有效地区分品种资源的算法——逐步扩增法。通过对40份黑龙江省大豆品种的40对引物数据进行分子身份证构建,阐述该软件的详细操作过程。【结果】利用Visual Basic6.0编程软件设计人机交互界面,通过编程实现核心算法,开发ID analysis软件,软件集成全库构建、部分构建、ID判定、数据合并等功能。其中,全库构建是软件的核心功能,通过全库构建可以快速分析区分材料的最少标记;部分构建可以选择部分目标材料进行区分;ID判定可以在分子身份证数据库构建完成的前提下,对未知材料进行SSR分析,根据获得的分子身份证数据来确定材料是哪个品种或近似品种;数据合并功能可以将多次试验数据整合成一个数据集。利用软件全库构建功能对范例数据进行分析得到以下结果:1在40对引物对40个大豆品种的分子身份证构建中,共有13个引物由于缺失过多,不符合标准被剔除,剔除引物为:Sat_111、Sat_218、Satt231、Satt685、Satt514、Satt551、Satt077、Satt358、Satt424、Satt100、Satt838、Satt893和Satt891。2共有6个引物由于与其他引物相似系数过高,不符合标准被剔除,剔除引物为:Satt253、Satt192、Satt417、Sat_229、Satt127和Satt496。3在分析的40个品种中,共有5个品种具有7个特异等位基因,分别为引物Satt516在材料东农36中显示特异条带3;引物Satt253在材料东农36中显示特异条带1;引物Sat_229在材料嫩丰17中显示特异条带1;引物Satt192在材料东农42中显示特异条带3;引物Satt206在材料北丰19中显示特异条带1;引物Satt244在材料北丰19中显示特异条带4;引物Satt363在材料黑河14中显示特异条带1,因此,可以通过这些特异等位基因直接确定需要鉴定的品种。4仅需7对引物便可将40份大豆品种完全区分开,引物组合为:Satt398、Satt380、Satt453、Satt288、Satt244、Sat_092和Satt206。【结论】编制了用于作物分子身份证构建的软件ID analysis,软件界面友好、使用简便、高效、灵活。实现单个软件完成作物分子身份证的构建,达到了对资源品种鉴定的目的。随着技术的发展和毛细管电泳的应用,开发全自动分子身份证分析系统甚至开发基于分子身份证理论的快速资源鉴定仪将成为可能。 | 胡振帮 高运来 齐照明 蒋洪蔚 刘春燕 辛大伟 胡国华 潘校成 陈庆山 | 2016 | 中国农业科学2016，49，12： | 8 |
| 15 | 小麦白粉病菌基因组DNA的微量提取及ISSR-PCR反应体系的优化显示文摘为了寻找适合小麦白粉菌基因组DNA微量提取的方法,本试验利用改进的CTAB法、电钻微量研磨一管法、FastPrep DNA试剂盒法和Chelex-100法分别提取小麦白粉菌基因组DNA。比较得出,在微量提取时,CTAB法的提取率较高;在分生孢子量较多时,FastPrep DNA试剂盒方法提取的DNA质量较高,这两种方法提取的DNA均适用于ISSR-PCR。采用正交设计L16(45)法优化了适合于小麦白粉病菌群体的ISSR体系,确定了25μL时优化的反应体系:1×buffer、模板DNA0.5ng、dNTP0.14mmol/L、TaqDNA聚合酶1U、引物1.4μmol/L、Mg2+1.8mmol/L。利用该体系筛选出了一批多态性较好的ISSR引物,为小麦白粉病菌遗传多样性研究奠定了基础。 | 朱海荣 段霞瑜 周益林 邱永春 | 2010 | 植物保护2010，36，3： | 7 |
| 16 | 不同方法提取大豆基因组DNA的效果比较显示文摘[目的]采用不同方法对大豆基因组DNA进行提取,为大豆基因组DNA的提取提供参考。[方法]采用CTAB法、SDS法和高盐低pH值法对大豆基因组DNA进行提取,对提取的DNA进行光密度、紫外光谱、琼脂糖凝胶电泳和DNA限制性内切酶图谱等的检测。[结果]光密度和光谱检测结果表明,SDS法的提取量和纯度均优于CTAB法和高盐低pH值法;琼脂糖凝胶电泳检测结果表明,SDS法提取的基因组DNA谱带较CTAB法和高盐低pH值法提取的基因DNA谱带粗、亮、重复性好;限制性内切酶检测结果表明,3种方法所得基因组DNA均能被HindⅢ和EcoRⅠ酶切,但SDS法所得基因组DNA的酶切效果最好。[结论]SDS法的提取效果明显优于CTAB法和高盐低pH值法。 | 王桂华 余丽芸 刘术闫 曹宁 | 2009 | 安徽农业科学2009，37，26： | 6 |
| 17 | 适于AFLP分析的蚕豆DNA提取显示文摘描述了一种可从蚕豆嫩叶中快速提取DNA的方法。经AFLP分析实验证实,该方法提取的DNA质量好,AFLP分析条带清晰稳定,完全适合于蚕豆分子标记鉴定所需。 | 任俊云 刘秀菊 关键平 马晓岗 宗绪晓 迟德钊 | 2007 | 青海大学学报(自然科学版)2007，25，2： | 6 |
| 18 | PCR检测转基因大豆显示文摘[目的]定性检测转基因大豆。[方法]以非转基因大豆和CP4-EPSPS转基因大豆为材料,以大豆内源基因Lectin和外源基因5-莽草酸-3-磷酸合成酶基因(CP4-EPSPS)为检测的目的片段,建立PCR反应体系。采用改进CTAB法提取大豆基因组DNA,并对所提DNA进行PCR扩增和电泳检测,确定转基因大豆的PCR检测限。[结果]改进CTAB法提取的大豆基因组DNA电泳条带清晰完整,转基因大豆和非转基因大豆基因组DNA均可扩增出约409 bp的条带即Lectin基因,而只在转基因大豆中检测出CP4-EPSPS特异性片段;当转基因大豆的含量为100%~0.2%时,均可扩增出特异性条带。[结论]该研究建立了转基因大豆的PCR检测方法。 | 钱翔宇 柳毅 顾守进 苏旭东 马晓燕 张伟 | 2009 | 安徽农业科学2009，37，29： | 4 |
| 19 | 玉米基因组DNA不同提取方法及提取部位的比较研究显示文摘分别探讨CTAB法和SDS法对玉米不同部位基因组DNA的提取效果。综合比较了2种方法提取的DNA浓度、纯度及完整性,结果表明SDS法是比较适合玉米基因组DNA提取的方法;同时比较了以玉米叶片、幼根和成熟胚为材料提取的DNA质量,发现以新鲜叶片为材料提取的DNA浓度和纯度较高,更适合用于玉米基因组DNA的提取。 | 楚海娇 | 2016 | 农业与技术2016，36，23： | 4 |
| 20 | 如何做好大豆粉转基因成分检测能力验证显示文摘目的能力验证是利用实验室间比对来确定实验室检测或校准能力的活动,是提高检验机构内部质量控制最有效的手段之一。方法通过参加2012'CNAS T0659大豆粉中转基因成分定性检测'能力验证获得满意结果,对实验室参加能力验证过程中应注意的问题做简要分析。结果与结论标准方法的选择,DNA提取效率,以及实验过程的质量控制等都是影响能力验证结果的重要因素。 | 尤波 吴永生 周雅男 王秋菊 | 2013 | 食品安全质量检测学报2013，4，5： | 4 |
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