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| 1 | A Robust CRISPR/Cas9 System for Convenient, High-Efficiency Multiplex Genome Editing in Monocot and Dicot Plants显示文摘CRISPR/Cas9 染色体指向系统被用于许多种类。然而,为植物报导的 mostCRISPR/Cas9 系统能仅仅修改一个或一些指向地点。这里,我们报导一个柔韧的 CRISPR/Cas9 向量系统,利用植物 codon 优化了 Cas9 基因,为方便、高效率的复合染色体在 monocot 和 dicot 植物编辑。我们设计了基于 PCR 的过程很快产生多重 sgRNA 表达式盒子,它能在一个轮由金门结扎或吉布森汇编克隆被装配进二进制 CRISPR/Cas9 向量。与这个系统,我们与 85.4% 变化评估的一般水准在米饭编辑了 46 个目标地点,主要在 biallelic 和同型结合的地位。我们推想在米饭的大约 16% 同型结合的变化通过相应基于再结合的修理跟随的非相应的加入结束的机制被产生。我们也获得了一致 biallelic,在 Arabidopsis T 1 植物的异质接合、同型结合、妄想的变化。在米饭和 Arabidopsis 的指向的变化是可继承的。我们在 T 0 米饭和 T 1 由同时的指向的 Arabidopsis 植物多重(多达八) 一个基因家庭,在一条 biosynthetic 小径的多重基因,或在单个基因的多重地点的成员。这个系统为为基本研究和基因改进在植物学习多重基因和基因家庭的功能提供了一个万用的工具箱。 | Xingliang Ma Qunyu Zhang Qinlong Zhu Wei Liu Yan Chen Rong Qiu Bin Wang Zhongfang Yang Heying Li Yuru Lin Yongyao Xie Rongxin Shen Shuifu Chen Zhi Wang Yuanling Chen Jingxin Guo Letian Chen Xiucai Zhao Zhicheng Dong Yao-Guang Liu | 2015 | Molecular Plant2015，8，8： | 272 |
| 2 | 基因编辑作物的发展及检测监管现状显示文摘随着以ZFN、TALEN和CRISPR/Cas9技术为代表的基因编辑技术的不断发展,越来越多的基因编辑作物不断问世,围绕着基因编辑作物的监管态度和检测技术将成为新的问题。笔者简要介绍了目前运用基因编辑技术培育的基因修饰作物的现状,并以ZFN技术为代表,分析了世界上有关国家对基因编辑作物的监管态度,并针对基因编辑作物检测可能存在的问题进行了分析。旨在为我国未来可能出现的基因编辑作物进出口的监管和检测工作提供参考。 | 付伟 魏霜 王晨光 杜智欣 朱鹏宇 刘中勇 吴希阳 朱水芳 | 2016 | 植物检疫2016，30，3： | 7 |
| 3 | 作物遗传育种研究进展Ⅲ.作物基因工程与基因组编辑显示文摘从育种应用角度对利用基因工程和基因组编辑技术拓宽作物遗传变异的意义、特点、原理和基本方法进行了评述,着重介绍了近10年来内源转基因和同源转基因、新靶标基因、多基因工程、叶绿体基因工程和基因组编辑技术的研究新进展,同时比较了它们的优缺点,以期为合理选择利用这些新技术创制新种质提供基础。 | 刘忠松 | 2014 | 作物研究2014，28，3： | 4 |
| 4 | 利用CRISPR/Cas9技术将LoxP序列靶向引入小鼠Alk1基因显示文摘目的将LoxP序列靶向引入小鼠4腩1基因,拟通过Cre/LoxP系统条件性敲除4腩1基因建立脑动静脉畸形小鼠模型。方法利用CRISPR/Cas9技术编辑小鼠Alkl基因:①设计和选择两个单导向RNA(sgRNA)分别识别外显子3—4和8~9的非编码区位点;②设计带有2个LoxP序列且与靶基因同源的供体载体;⑧将体外合成的sgRNA,Cas9mRNA~I]供体载体注射到小鼠受精卵;④受精卵经假孕小鼠代孕出生后,经PcR和测序筛选目标小鼠。结果小鼠Alkl等位基因的特定位点插入了LoxP序列。结论CRISPR/Cas9技术能成功将LoxP序列靶向引入小鼠Alkl基因,为建立脑动静脉畸形小鼠模型创造条件。 | 徐铭 徐宏治 陈峻叡 秦智勇 陈衔城 | 2015 | 中国临床神经科学2015，23，6： | 2 |
| 5 | Bioinformatic prediction and functional characterization of human KIAA0100 gene显示文摘Our previous study demonstrated that human KIAA0100 gene is a novel acute monocytic leukemia-associated antigen(MLAA) gene. But the functional characterization of human KIAA0100 gene has remained unknown to date. Here, firstly, bioinformatic prediction of human KIAA0100 gene was carried out using online software;Secondly, human KIAA0100 gene expression was downregulated by the clustered regularly interspaced short palindromic repeats(CRISPR)/CRISPR-associated(Cas) 9 system in U937 cells. Cell proliferation and apoptosis were next evaluated in KIAA0100-knockdown U937 cells. The bioinformatic prediction showed that human KIAA0100 gene was located on 17q11.2, and human KIAA0100 protein was located in the secretory pathway. Besides, human KIAA0100 protein contained a signal peptide, a transmembrane region, three types of secondary structures(alpha helix, extended strand, and random coil), and four domains from mitochondrial protein 27(FMP27). The observation on functional characterization of human KIAA0100 gene revealed that its downregulation inhibited cell proliferation, and promoted cell apoptosis in U937 cells. To summarize, these results suggest human KIAA0100 gene possibly comes within mitochondrial genome; moreover, it is a novel anti-apoptotic factor related to carcinogenesis or progression in acute monocytic leukemia, and may be a potential target for immunotherapy against acute monocytic leukemia. | He Cui Xi Lan Shemin Lu Fujun Zhang Wanggang Zhang | 2017 | Journal of Pharmaceutical Analysis2017，7，1： | 1 |
| 6 | 基于Cas9技术的无标记定点整合LacS基因的载体系统构建显示文摘为了获得奶牛Cas9特异识别位点载体,同时构建无标记Lac S基因载体,并对Cas9载体进行活性验证,以达到建立Lac S基因阳性细胞系的目的,试验基于奶牛β-casein第2内含子区域序列设计Cas9靶位点作为潜在Lac S基因插入位点、构建Cas9/gRNA载体,利用T7E1酶进行活性验证,构建包含针对靶位点微同源序列的Lac S基因载体。结果表明:经过PCR和测序比对,发现构建的Cas9/gRNA载体具有活性,而且Lac S基因载体可用于整合。同时构建的包含有微同源序列和Cas9靶位点的Lac S基因克隆载体,可用于后续研究。 | 刘晓 苏小虎 马云龙 郭梓茹 张焱茹 周欢敏 张立 | 2018 | 黑龙江畜牧兽医2018，0，7： | 0 |
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