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1两种核酸提取方法对丙型肝炎病毒RNA检测效果的比较及应用评价显示文摘目的比较两种核酸提取方法对实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测丙型肝炎病毒(HCV)RNA病毒载量的影响。方法选择89例2012年10月至2013年6月在肝病中心住院的慢性丙型肝炎抗-HCV阳性患者,分别用磁珠法和TRIZOL法提取血清标本中HCV RNA,用FQ-PCR技术检测HCV RNA,并对结果进行对比分析,统计学处理采用χ2检验和t检验。结果 89例抗HCV阳性标本中以磁珠法提取核酸进行HCV RNA定量检测的阳性率为73.0%(65/89),以TRIZOL法提取核酸进行HCV RNA定量检测的阳性率为65.1%(58/89),两法提取方法检测阳性率比较有统计学意义(χ2=3.76,P<0.05)。两法所测浓度结果换算成对数值,经t检验两者差异无统计学意义(t=0.32,P>0.05)。结论两种方法均可获得较高的回收率、有较高的敏感度和特异度,磁珠法提取HCV RNA可用于HCV感染者的临床诊断和疗效观察。范公忍 陈天宝 李冰 胡学玲 曹建彪 2015检验医学与临床2015,12,1:8
2荧光定量PCR法检测HCV-RNA质控物的制备及质控图的绘制显示文摘目的自制HCV-RNA荧光定量PCR室内质控物,利用Excel绘制质控图。方法取某一浓度HCV-RNA阳性血清,稀释至一定浓度,分装数管,-70℃保存。首次分两批(A组:第1批在最佳条件下检测;B组:第2批在常规条件下检测)连续检测20次,计算均值的对数值、标准差和变异系数,绘制常规条件下质控图,进行室内质控动态监测;第2次(C组:第3批在常规条件下检测)标本-70℃保存12月后,连续检测20次,计算均值的对数值、标准差和变异系数。结果 HCV-RNA室内质控常规条件下及标本-70℃保存12个月后,均值的对数值分别为5.023、5.041;标准差分别为0.228、0.231;变异系数分别为4.54%、4.58%;经两组均数对数的显著性t检验,均值的对数值之间无统计学差异(P>0.05);标准差、变异系数之间相差很小。结论荧光定量PCR检测HCV-RNA质控物的制备方法简单,性能稳定,质控图绘制方便,适合PCR实验室对HCV-RNA荧光定量的室内质控。邓演超 李全双 沈红艳 徐湛 任思坡 2013国际检验医学杂志2013,34,3:5
3急性淋巴细胞白血病患儿MTHFR基因多态性与大剂量甲氨蝶呤毒副反应的相关性显示文摘目的:探讨亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因677位点多态性与急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿使用大剂量甲氨蝶呤(HDMTX)化疗后毒副反应的相关性。方法:收集46例完全缓解并接受HDMTX治疗的ALL患儿外周血,提取基因组DNA,用PCR-芯片杂交法检测MTHFR基因C677T多态性。应用荧光偏振免疫法(FPIA)测定24小时、48小时血浆MTX浓度。按照国立癌症研究所常规毒性判定标准(NCI-CTC)对患儿HDMTX化疗毒副反应进行评价。对MTHFR677位点基因多态性与HDMTX毒副反应、48小时血浆MTX浓度的相关性进行分析。结果:HDMTX化疗相关毒副反应以骨髓抑制及肝毒性为主。C677T各基因型的48h MTX血药浓度及发生各类化疗毒副反应差异无统计学意义。结论:影响MTX的体内代谢及毒副反应的因素复杂,MTHFR C677T基因多态性尚不能作为HDMTX体内排泄及毒副反应的有效预测性指标。廖静 李戈 张熔 2016肿瘤预防与治疗2016,29,3:5
4HCV RNA定量检测试剂的临床应用徐丹 吴小宁 2012湖南师范大学学报(医学版)2012,9,2:4
5全自动核酸纯化系统在临床分子检测中的应用研究显示文摘目的探讨全自动核酸纯化系统在实时荧光定量检测中的应用价值。方法手工法和全自动核酸纯化系统配套不同磁珠法试剂,分别提取HCV及肠道病毒核酸样本,通过实施荧光定量检测不同方法提取的RNA,对比CT值,比较不同方法的提取效率。结果同一检测项目不同试剂的机提之间无显著差异(t1=-0.805,P1=>005;t4=-1.952,P4>0.05),机提与手工法之间有显著差异(t3=-3.314,P3<0.01;t2=--3.576,P2<0.01);手工法提取30个样本所需时间均为2h左右;而全自动核酸纯化系统同时提取32个样本所需时间均在1h以内;结论全自动核酸纯化系统提取效率明显优于手工法,NP968全自动核酸纯化系统磁珠法试剂是全开放性的,全自动核酸纯化系统操作简单、快速、提取效率高,值得临床检验推广。普冬 郝宏刚 郭军辉 2013中国热带医学2013,13,10:3
6保存温度和保存时间对血清HCV-RNA定量检测结果的影响显示文摘目的:探索不同保存温度和保存时间对血清HCV-RNA荧光定量检测结果的影响。方法:收集HCV阳性血清标本16份并平均分成6份分别置于室温、4℃和-20℃保存1d和1周后用荧光定量PCR法检测结果,利用SPSS13.0软件对数据进行处理。结果:HCV阳性患者血清在室温(25±2)℃、4℃和-20℃保存1d,各组荧光定量结果无统计学差异(F=0.012,0.447,0.230;P=0.913,0.507,0.796);保存1周,各组结果无统计学差异(F=0.059,0.308,0.184;P=0.808,0.582,0.833);根据温度分组后血清保存1d和保存1周结果无统计学差异(F=0.055,0.000,0.103;P=0.816,0.990,0.751)。结论:血清在室温、4℃和-20℃条件下保存1周对HCV-RNA的荧光定量检测结果无显著影响。黎建安 刘紫菱 林珠 2011实用医学杂志2011,27,13:3
7丙型肝炎患者抗肝抗原自身抗体与病毒复制的相关性研究显示文摘目的研究丙型肝炎患者抗肝抗原自身抗体与HCV病毒复制的相关性。方法回顾性分析2009年9月至2010年9月的279例抗HCV阳性患者HCV RNA检测及抗肝抗原自身抗体谱检测结果,利用统计学方法研究HCV RNA与抗肝抗原自身抗体谱的相关性。结果 279例抗HCV阳性患者中,有162例(58.1%)患者HCV RNA阳性,其中抗线粒体抗体M2型(AMA-M2)阳性11例(6.8%)、抗可溶性肝抗原抗体(SLA)阳性16例(9.9%)、抗肝肾微粒体抗体(LKM-1)阳性29例(17.9%)、抗肝细胞溶质抗原1型(LC-1)阳性9例(5.6%);117例(41.9%)患者HCV RNA阴性,其中AMA-M2阳性3例(2.6%),SLA阳性3例(2.6%),LKM-1阳性15例(12.8%)、LC-1阳性4例(3.4%)。两者抗肝抗原抗体谱阳性率差异有统计学意义(χ2=92.8,P<0.05)。结论 HCV RNA阳性患者抗肝抗原自身抗体谱阳性率明显高于HCV RNA阴性患者。任丽娟 许鸿昌 周明君 艾根伟 毛淑清 2011国际检验医学杂志2011,32,8:3
8四种提取诺如病毒和副溶血性弧菌总RNA方法的比较显示文摘目的比较四种联合提取诺如病毒和副溶血性弧菌总RNA的方法。方法使用Trizol法、磁珠法、Qiagen^(TM) RNA Mini Kit和柱式RNA抽提试剂盒分别提取诺如病毒和副溶血性弧菌的总RNA,经核酸测定仪检测RNA的质量,并用RT-PCR法对四种提取方法进行比较。结果 Qiagen^(TM) RNA Mini Kit的提取效率最佳,对PCR的反应影响最小。磁珠法其次,但是磁珠法提取出的总RNA纯度也较高。Trizol法和柱式法总RNA抽提试剂盒所获得的总RNA比上述两者低,且存在不同程度的污染。经随机区组方差分析显示,四种提取方法之间存在显著性差异,F浓度=11.313;F(A_(260)/A_(280))=15.093;F(A_(260)/A_(280))=11.155,P均<0.05。结论四种试剂的实际提取效率存在差异,应根据不同的样本情况选择合适的试剂。白颉 郭慈浩 罗智强 陈栋 2016中国现代医生2016,54,29:1
9送检时间对血清HCV-RNA定量检测结果的影响显示文摘目的探讨不同送检时间对血清HCV-RNA荧光定量检测结果的影响。方法收集HCV强阳性标本12例和弱阳性血清16例,分别在室温下0、6、12、18和24h后进行PCR定量检测HCV-RNA含量,将0h作为对照组。每份标本重复检测2次。数据结果利用SPSS13.0软件进行统计分析。结果强阳性组和弱阳性组HCV-RNA的拷贝数在室温放置6、12、18和24h的结果与对照组比较差异均无统计学意义(F=0.898,P=0.466;F=0.359,t=0.837)。结论送检时间在24h内对HCV-RNA的荧光定量PCR检测结果无显著的影响,各实验室间的差异应考虑实验者的操作熟练度。梁耀荣 吴小燕 2012国际检验医学杂志2012,33,4:0
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