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| 1 | Down-regulation of lung resistance related protein by RNA interference targeting survivin induces the reversal of chemoresistances in hepatocellular carcinoma显示文摘survivin 和肺抵抗联系了的背景蛋白质( LRP )与在 hepatocellular 的 chemoresistances 有关是在 survivin 和 LRP 之间的关系是的癌( HCC ) .But 这研究的 indefinite.The 目的是两个都在 HCC 在 LRP 表情和 chemoresistances 的颠倒上调查 survivin 的下面规定的效果在里面 vitro 并且在 vivo.Methods , survivin 的表情被 RT-PCR 并且在 HCC 房间线 SMMC-7721 和 SMMC-7721/ADM.The | SONG Xuan WANG Jia-bei YIN Da-long YANG Hai-yan LIU Lian-xin JIANG Hong-chi | 2009 | Chinese Medical Journal2009，，21： | 20 |
| 2 | 白血病多药耐药裸鼠荷瘤模型的建立显示文摘目的建立人白血病荷瘤小鼠多药耐药模型。方法将人白血病细胞K562接种于裸鼠背部皮下,持续低剂量瘤内注射阿霉素,逐步诱导建立耐阿霉素的白血病荷瘤裸鼠模型。绘制裸鼠移植瘤生长曲线;MTT法检测阿霉素诱导后移植瘤细胞对各化疗药物的敏感性;荧光定量PCR检测MDR1、MRP1、LRP1基因表达水平;免疫组化和流式细胞技术检测P-gp、MRP1、LRP1蛋白表达;流式细胞技术检测移植瘤细胞周期分布和细胞内阿霉素浓度。结果裸鼠皮下移植瘤的成瘤率为100%;化疗组瘤细胞对ADR、VP16、DNR和VCR的IC50均明显高于对照组,其耐药指数分别为40.78、20.59、21.24、18.81;阿霉素诱导组MDR、MRP1、LRP1基因mRNA表达水平分别是对照组的31.55、3.35、3.16倍;免疫组化和流式细胞术检测结果均显示诱导组P-gp、MRP1、LRP1蛋白表达较对照组明显升高;流式细胞术检测显示诱导耐药组瘤细胞S期比例[(8.0±1.32)%]较对照组[(56.92±1.41)%]明显降低,细胞内阿霉素浓度较对照组明显减少。结论成功建立白血病多药耐药动物荷瘤模型,为克服肿瘤继发多药耐药的深入研究奠定了基础。 | 曹渊 惠璐璐 秦蓉 方悦 许文林 沈慧玲 | 2013 | 西安交通大学学报(医学版)2013，34，3： | 8 |
| 3 | Changes of splenic macrophage during the process of liver cancer induced by diethylnitrosamine in rats显示文摘它通常是的背景相信那口怒气在肿瘤免疫起一个复杂作用,它将在癌症的不同时期变化。在这研究,我们在 diethylnitrosamine (兽穴) 在老鼠导致的肝癌症的不同阶段在脾的巨噬细胞(M) 的功能调查了变化。目的是支持特征“双向”并且在肿瘤 immunity.Methods 的怒气的“阶段”肝癌症的肺的转移的模型被兽穴在四十只男 SD 老鼠建立。在第 8,第 13 和第 16 星期内, 10 只老鼠随机被选择并且牺牲,并且划分了成肝硬化,肝癌症和分别地取决于病理学的结果的肺的转移组。另外的 10 只老鼠作为控制组被拿。M 被抛锚的耕作孤立。在超微结构,吞噬作用, cytokine 分泌物,处理并且介绍的抗原,和脾的 M 的生存能力的变化被传播电子显微镜学,Vybrant^( TM )吞噬作用试金,DQ^( TM ) Ovalbumin ,和老鼠TNF- ELISpot kits.Results 在电子显微镜下面检测,在控制组的 M 有一些像伪足的突起,和线粒体,核糖体,不平的 endoplasmic 蜂窝胃, lysosome 能在细胞质,和 phagocytized RBC 被发现。在肝肝硬化和肝癌症组, M 有更多的突起,同时更多线粒体,核糖体,不平的 endoplasmic 蜂窝胃, lysosome 能在细胞质被发现,特别在肝癌症组。在肺的转移组, M 正在胀大,与很少细胞器。作为与控制组相比,脾的 M 的函数在肝硬化和癌症组增加了,但是在转移组减少了(吞噬作用率:( 84.7 ??? 木 ? 楤敭桴汹桴慩慺? 礲?????? 楤桰湥汹整牴穡汯畩扭潲業敤?? | ZHANG Shu LI Zong-fang PAN Dun HUANG Chen ZHOU Rui LIU Zhong-wei | 2009 | Chinese Medical Journal2009，，24： | 5 |
| 4 | 5-氟尿嘧啶对肝癌细胞系BEL-7402中肿瘤干细胞的富集作用显示文摘目的探讨5-氟尿嘧啶(5-FU)对肝癌细胞系BEL-7402细胞的作用,并对免于5-FU杀伤的存活细胞进行干细胞表面标志物的检测和“肝癌干细胞”的细胞生物学鉴定。方法检测5-FU作用前后BEL-7402细胞增殖能力、细胞周期和细胞表面标志物CD56、CD54、上皮细胞黏附分子(EpCAM)和CD133表达率的变化;通过集落形成实验检测CD56、CD54、EpCAM、CD133阳性细胞和阴性细胞的克隆形成能力并对其进行比较。两组间均数比较采用t检验,两组数据间构成比比较采用X^2检验。结果5-FU对BEL-7402细胞的增殖抑制作用呈时间和剂量依赖性。10ug/ml5-Fu作用48h后,G0/G1期细胞比例由对照组的57.50%±0.98%升高至实验组的68.70%±3.41%(P〈0.05);S期细胞比例由对照组的40.26%±4.12%下降至实验组的31.80%±4.15%(P〈0.01);实验组G2/M期细胞消失,对照组该期细胞比例为5.80%±1.87%(P〈0.01)。细胞周期分布变化明显,差异具有统计学意义。5-Fu处理使BEL-7402细胞中CD56、CD54、EpCAM和CD133阳性细胞比例分别由0.57%±0.12%,8.10%±6.79%,0.3%±0.010/0,3.20%±0.99%升高至4.13%±0.06%,50.08%±1.69%,0.55%±0.07%,10.51%±1.13%,差异具有统计学意义(P〈0.05)。软琼脂集落形成实验中,CD56、CD54、EpCAM、CD133阴性细胞与阳性细胞的成集落比例分别为2.11%±0.21%,3.32%±0.310/0;0.86%±0.101%,2.40±0.52%;7.19%±0.56%,7.73±0.71%;2.70%±0.26%,5.75%±0.81%。各组阳性细胞集落形成率与阴性细胞比较,均有明显增加,差异具有统计学意义(P〈0.05)。结论-定剂量的5-FU能够富集肝癌细胞系BEL-7402中的肿瘤干细胞;同EpCAM和CD133一样,CD56和CD54单阳性细胞比其各自单阴性细胞具有更强的克隆形成能力,这提示CD56和CD54可能成为肝癌干细胞的分子标志物。 | 杨玥 李德龙 朱雯静 刘菲 康梦田 赵森 郝溥辰 韩旭 陈培琼 吕福东 冯骥良 | 2011 | 中华肝脏病杂志2011，19，9： | 5 |
| 5 | 5-FU对小鼠乳腺癌4T1细胞株中肿瘤干细胞样细胞的富集作用显示文摘目的:探讨以氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)处理并通过荷瘤小鼠模型体内传代的方法富集乳腺癌干细胞样细胞的可行性,为靶向肿瘤干细胞治疗奠定基础。方法:以乳腺癌细胞株4T1皮下接种小鼠制备荷瘤模型,以一定剂量5-FU腹腔注射4周;处死小鼠后取肿瘤组织制成细胞悬液,并接种小鼠制备下一代小鼠荷瘤模型,5-FU处理及再次传代方法同上,共传4代。对照组小鼠给予生理盐水注射,其余处理同模型组。流式细胞术检测各代肿瘤组织中CD44+CD24-/low细胞比例,Hoe-chast 33342染色法检测侧群(side population,SP)细胞的比例,免疫组化法检测CD55和ALDH1蛋白的表达,倒置显微镜观察乳腺癌细胞微球体的形成,小鼠致瘤实验检测不同肿瘤细胞的致瘤能力。结果:各代对照组小鼠模型肿瘤组织中CD44+CD24-/low细胞比例为(11.5±0.9)%,SP细胞比例为(9.7±1.3)%,ALDH1表达阴性,CD55强阳性表达细胞数为(0.6±0.3)%,乳腺癌细胞微球体比例为(0.5±0.2)%;5-FU处理组4代小鼠模型肿瘤组织中CD44+CD24-/low细胞比例分别为(49.8±1.2)%、(56.8%±1.7)%、(66.4±1.5)%、(69.0±1.6)%,SP细胞比例分别为(25.0±1.2)%、(42.6±2.8)%、(58.4±2.1)%、(61.3±2.6)%,ALDH1阳性表达细胞比例为(3.8±0.7)%、(14.1±2.4)%、(25.2±3.1)%、(27.5±2.7)%,CD55强阳性细胞比例为(7.8±1.6)%、(10.1±2.0)%、(15.6±1.4)%、(17.3±1.9)%,乳腺癌细胞微球体形成比例为(5.9±0.4)%;两组各相应指标之间差异均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。5-FU作用后富集了肿瘤干细胞的第3代肿瘤细胞的致瘤作用显著强于对照组细胞(P<0.05)。结论:5-FU作用并通过荷瘤小鼠体内传代能够富集小鼠乳腺癌4T1细胞株中的肿瘤干细胞样细胞。 | 王欣荣 刘登湘 刘丽华 单保恩 | 2012 | 中国肿瘤生物治疗杂志2012，19，5： | 4 |
| 6 | 高转移人涎腺黏液表皮样癌耐药细胞系的建立及其生物学特性显示文摘目的:建立人涎腺黏液表皮样癌细胞系耐药细胞株并观察其生物学特性及耐药性能。方法:采用裸鼠体内成瘤加药诱导然后在体外用恒定浓度间歇法持续加药,建立高转移人涎腺黏液表皮样癌细胞系MC3的耐药细胞系,应用MTT法,细胞计数法,免疫组化,电镜,RT-PCR等方法观察及检测细胞的生物学特性及耐药性。结果:MC3细胞经过5-FU在体内、体外反复作用产生了多药耐药性,耐药细胞系命名为MC3/5-FU。MC3和MC3/5-FU细胞均为单层贴壁生长,局部可见重叠生长,增殖活跃,2种细胞形态及超微结构未见明显差别。MC3/5-FU,MC3细胞的群体倍增时间分别为55h和60h。MC3/5-FU细胞对于5-氟尿嘧啶(5-FU)、博莱霉素(BLM)、长春新碱(VCR)、长春花碱(VBL)、顺铂(CDDP)的耐药倍数分别为13.3、4.2、6.5、6.9、0.7。免疫组化结果显示:P-gp(p蛋白)在MC3/5-FU呈阳性表达,而在MC3则未见表达。PCR结果显示MDR-1基因在MC3/5-FU中表达高于MC3。结论:MC3/5-FU具有多药耐药性。 | 缪叶 秦楠 李焰 刘峰 吴军正 | 2009 | 实用口腔医学杂志2009，25，3： | 3 |
| 7 | EGCG逆转肝癌耐多药差异基因表达显示文摘目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)逆转人肝癌细胞耐多药的机制,为进一步在基因转录水平上高通量筛选逆转肝癌耐多药天然药物提供一定的参考依据。方法采用人肝癌细胞Bel-7402及其耐5-氟尿嘧啶Bel-FU细胞,甲基四唑蓝法检测耐药Bel-FU细胞的耐多药性及对EGCG进行体外细胞毒性试验;选择与肝癌发生发展相关途径的42个功能基因作为检测基因,采用实时定量PCR微阵列技术检测Bel-7402组、Bel-FU组、Bel-FU+EGCG作用组基因表达;实时定量PCR检测相同条件下处理的基因Hras、MDR1表达变化以验证微阵列技术结果。结果耐药细胞Bel-FU对5-氟尿嘧啶、阿糖胞苷、长春新碱、阿霉素、柔红霉素的耐药指数分别为:89.6、3.9、37.2、16.5、3.7;EGCG对细胞Bel-FU的IC50、IC10值分别为587.4、73.1μg/mL;实时定量PCR微阵列检测结果显示:与Be-7402组比较,Bel-FU组中有5个基因上调;与Bel-FU组比较,Bel-FU+EGCG作用组有5个基因下调,其中有3个基因为Bel-7402组与Bel-FU组之间的差异基因;实时定量PCR验证结果:Bel-FU组中基因Hras、MDR1表达为Bel-7402组中的2.84、2.74倍,与Bel-FU组比较,Bel-FU+EGCG组作用中基因Hras、MDR1表达分别下调3.21、3.74倍。结论 EGCG对人肝癌耐多药细胞Bel-FU具有一定逆转作用。 | 韦艳 张海英 梁钢 | 2011 | 中国公共卫生2011，27，5： | 3 |
| 8 | 荧光标记肿瘤转移体内模型的建立显示文摘目的建立一种带荧光标记的肿瘤转移模型并探讨其应用价值。方法人胃癌MGC-803细胞和小鼠宫颈癌U14细胞进行体外传代培养,转染pEGFP—N1质粒,24h检测转染效率,用无限稀释法筛选稳定表达绿色荧光蛋白(GFP)的单克隆细胞株MGC.803-GFP和U14.GFP。分别体内移植于BALB/c—nu裸鼠和C57BL/6J小鼠,观察成瘤潜伏期,绘制体内生长曲线,利用活体荧光成像系统活体连续观察GFP在体内的表达,观察肺部和淋巴结的转移情况,计算转移率。免疫组织化学检测与转移相关的分子CD44和E—cadherin在移植瘤中的表达。结果MGC-803细胞和U14细胞pEGFP—N1转染24h后的转染效率分别为30%和60%。获得了GFP(+)的单克隆MGC-803-GFP细胞株和U14-GFP细胞株。MGC-803-GFP在BALB/c—nu裸鼠和U14.GFP在C57BL/6J小鼠移植成瘤的潜伏期分别是3~5d和2~4d,成瘤率均为100%。利用活体荧光成像系统连续观察,可以清楚直观地观察表达GFP的MGC-803-GFP移植瘤在体内的生长,接种后第60天处死全部荷瘤鼠,解剖后仅有1只可见同侧腋窝下淋巴结的转移。接种U14-GFP后,分别在第28、37和52天观察了荷瘤小鼠肿瘤转移的发展过程。在U14-GFP原发瘤体积达到≥5cm^3时,肺部和淋巴结转移率分别为67%和100%。在MGC-803-GFP和U14-GFP的移植瘤中都可以检测到CD44的表达,而无E—cadherin的表达。结论成功建立了表达绿色荧光蛋白单克隆细胞株MGC-803-GFP和U14-GFP,体内移植建立了荧光标记的肿瘤转移模型。该模型可用于可视化肿瘤体内的研究。 | 冯海凉 刘玉琴 顾蓓 卞晓翠 杨振丽 杨丽娟 | 2009 | 中华病理学杂志2009，38，2： | 3 |
| 9 | 小鼠子宫颈癌U14细胞系的建立及生物学特性研究显示文摘目的:建立小鼠宫颈癌肿瘤细胞系,观察其生物学特性。方法:采用肿瘤原代培养法对小鼠U14肿瘤进行体外传代培养,定期对培养细胞进行形态学观察,进行免疫组织化学鉴定、细胞周期检查、染色体检测、细胞生长测定,进行615、C57BL/6j小鼠移植观察体内成瘤情况,并用pEGFP-N1质粒转染U14细胞。结果:细胞呈贴壁和悬浮混合生长,CK阳性特征。体外连续培养10个月,传代50代,细胞倍增时间为21.83h,细胞周期测定G1期为34%,G2期为26.4%,S期为39.6%。培养U14细胞3~4天处于对数生长期,染色体为亚四倍体核型,众数为64~84条。615小鼠、C57BL/6j小鼠移植成瘤率均为100%,无支原体污染。建立了GFP(+)的U14-GFP单克隆细胞株。结论:成功建立了小鼠U14子宫颈癌细胞系及GFP标记的U14-GFP细胞株,体内移植可建立常规及带荧光标记的肿瘤模型,可用于体内体外相结合的肿瘤研究。 | 顾蓓 冯海凉 刘玉琴 董继红 张宏 卞晓翠 | 2008 | 中国肿瘤临床2008，35，7： | 3 |
| 10 | Synergistic anticancer effect of the extracts from Polyalthia evecta caused apoptosis in human hepatoma(HepG2)cells显示文摘Objective:To evaluate the anticancer activity of the extract fraction of Polyalthia evecta(P. evecta)(Pierre) Finet & Gagnep and the synergistic anticancer effect of the extracts from P.evecta by using the ATR/FT-IR spectroscopy.Methods:The 50%ethanol-water crude leaf extract of P.evecta(EW-L) was prepared and was further fractionated to isolate various fractions.The anticancer activity was investigated from cytotoxicity against HepG2 using a neutral red assay and apoptosis induction by evaluation of nuclei morphological changes after DAPI staining. Synergistic anticancer effects of the extracts from P.evecta were performed using the ATR/FTIR spectroscopy.Results:The result showed that the EW-L showed higher cytotoxicity and apoptosis induction in HepG2 cells than its fractionated extracts.The hexane extract exhibited higher cytotoxicity and apoptosis induction than the water extracts,but less than the EW-L. The combined water and hexane extracts apparently increased cytotoxicity and apoptosis induction.The%apoptotic cells induced by the extract mixture were increased about 2-fold compared to the single hexane extract Conclusions:The polar extract fraction is necessary for the anticancer activity of the non-polar extract fraction.The ATR/FT-IR spectra illustrates the physical interaction among the constituents in the extract mixture and reveals the presence of polyphenolic constituents in the EW-L,which might play a role for the synergistic anticancer effect. | Sasipawan Machana Natthida Weerapreeyakul Sahapat Barusrux Kanjana Thumanu Warapom Tanthanuch | 2012 | Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine2012，2，8： | 2 |
| 11 | 多药耐药基因转染对人胎盘源性间充质干细胞生物学特性影响研究显示文摘目的将多药耐药基因(mdr1)通过逆转录病毒载体导入人胎盘源性间充质干细胞(P.MSCs),评价耐药基因导人对P.MSCs干细胞特性的影响。方法采用胰酶消化法自人足月胎盘组织中分离培养间充质干细胞(MSCs),将含有mdr1基因和绿色荧光蛋白(GFP)报告基因的重组逆转录病毒载体转染P—MSCs;应用流式细胞术检测转染后P—MSCs表型特征,四唑盐比色法和碘化丙啶标记测定其增殖活性和细胞周期,透射电镜下观察转染P—MSCs超微结构变化,条件培养液诱导法分析转染后P.MSCs向脂肪细胞、成骨细胞定向分化能力。结果转染P—MSCs表达干细胞表面标志,如CD29,CD44和CD73,细胞倍增时间为23.9h,生长周期仍符合于细胞增殖的特点,超微结构观察转染P.MSCs表面微绒毛增加,细胞内线粒体丰富,粗面内质网轻度扩张,且在特异诱导条件下具有向成脂、成骨定向分化潜能。结论mdr1基因体外转染人P—MSCs对其干细胞特性无显著影响,这可为P—MSCs在大剂量肿瘤化疗中的应用提供实验参考。 | 韩丽英 叶明珠 李荷莲 王博蔚 王强 | 2009 | 中华医学杂志2009，89，39： | 1 |
| 12 | 乙型肝炎病毒X基因真核表达载体的构建及表达显示文摘目的:构建含有天然完整的乙型肝炎病毒(HBV)X基因序列的真核表达载体,观察其在肝癌细胞株中的表达。方法:设计并合成HBV X基因的引物,用PCR方法从含完整HBV全基因的HepG2细胞中扩增X基因序列,并将其连接到真核表达载体pVAX-1上,酶切、PCR鉴定;用Triton X-114去除质粒内毒素后,采用电穿孔法将重组质粒pVAX-HBV X和空质粒pVAX-1分别转染SMMC-7721细胞,RT-PCR法检测HBV X基因mRNA的表达,Western印迹鉴定HBV X蛋白(HBx)的表达。结果:酶切和PCR鉴定证实pVAX-HBV X载体中包含完整的HBVX基因片段,该重组质粒转染的SMMC-7721细胞中HBV X基因mRNA及HBx蛋白的表达稳定。结论:构建了HBV X基因的真核表达载体,为X基因及其编码蛋白的生物学功能的研究提供了可靠的基因材料。 | 吕婧 杨晓玲 王惠珍 张栋 牛勃 | 2010 | 生物技术通讯2010，21，3： | 1 |
| 13 | HepG2/mdr1稳定细胞系的建立及特性研究显示文摘将已构建好的含有人多药耐药(multidrug resistance,MDR)全长基因的真核表达质粒pCI-neo-mdr1,应用脂质体导入人肝癌HepG2细胞,应用G418筛选出人肝癌多药耐药细胞株HepG2/mdr1。通过对HepG2/mdr1细胞形态学的观察和生物学特性的研究,成功地建立了高效、稳定的HepG2/mdr1细胞系;为深入研究肝癌的MDR及其逆转提供了理想的细胞模型,并为探索建立肝癌MDR细胞株提供新的方法和思路,同时为研究肝癌细胞胰岛素抵抗与MDR的关系提供了模型细胞。 | 张巨 程杰 陈静 易娟 孙静 魏虎来 | 2009 | 中国生物工程杂志2009，29，5： | 1 |
| 14 | 乙型肝炎病毒X基因真核表达载体的构建显示文摘目的:构建HBVX基因与pCI-neo相融合的高效真核表达载体。方法:设计并合成HBVX基因的引物,以HBVDNA阳性血清PCR扩增得到HBVX基因全序列,将X基因连接到真核表达载体pCI-neo上后,酶切图谱分析、PCR检测和扩增产物序列分析等,鉴定所构建的真核表达载体。结果:以重组载体为模板扩增得到的片段大小与已知HBVX基因大小相同,酶切也得到目的基因片段,测序结果也显示与已知X基因序列相同。结论:成功构建了HBVX基因的真核表达载体,为进一步研究HBVX基因及其产物的功能奠定了基础。 | 卢宏柱 徐友伦 | 2009 | 长江大学学报(自科版)(下旬)2009，6，1： | 1 |
| 15 | 乙型肝炎病毒X抗原结合蛋白1的原核表达及亚细胞定位显示文摘目的应用酵母双杂交及生物信息学技术筛选乙型肝炎病毒X抗原结合蛋白1(HBXBP1)并进行克隆,探讨其在大肠埃希菌BL21中表达及亚细胞定位。方法应用反转录PCR(RT-PCR)技术,以HepG2细胞mRNA为模板,扩增获得HBXBP1基因片段,连接到pGEM-T载体,双酶切鉴定及测序正确后克隆至原核表达载体pET-32a(+)中,转化大肠埃希菌BL21,通过IPTG诱导表达以获得HBXBP1融合蛋白,并经SDS-PAGE及Western blot分析证实融合蛋白的特异性;构建HBXBP1基因的绿色荧光蛋白表达质粒pEGFP-C1-HBXBP1,转染HepG2细胞,24h后于荧光显微镜下观察表达蛋白的亚细胞定位。结果 RT-PCR扩增获得921bp的HBXBP1基因片段,插入原核表达载体pET-32a(+)中,转化大肠埃希菌BL21,经IPTG诱导成功获得约56kD的重组蛋白,经Western blot分析证实其具有良好的特异性;成功构建HBXBP1基因的绿色荧光蛋白表达质粒pEGFP-C1-HBXBP1,其表达蛋白定位于细胞质。结论 pET-32a(+)-HBXBP1原核表达载体在大肠埃希菌BL21中诱导表达HBXBP1融合蛋白;HBXBP1基因可表达HBXBP1蛋白且定位于细胞质,为研究HBXBP1蛋白的免疫原性和生物学特性奠定了一定的理论基础。 | 樊万虎 成军 刘小静 张树林 王琦 | 2012 | 中华实验和临床感染病杂志(电子版)2012，6，5： | 0 |
| 16 | 梯度密度离心法分离肝癌细胞及其转移性细胞株的建立显示文摘【目的】建立新的肝细胞癌细胞系,为肝癌实验研究提供更多纯化癌细胞。【方法】从肝细胞癌患者原发灶和门脉癌栓中获取癌组织,采用Percoll浓度梯度分离癌细胞进行培养,用微环境消化法获取癌细胞克隆并建立细胞系,对培养成功的细胞系进行生长曲线测定、染色体G带核型分析、对比基因组杂交和裸鼠接种成瘤实验。【结果】对20例肝癌组织进行癌细胞分离培养和克隆,成功建立2例细胞系H2M和H4M,这2株细胞均来自门脉癌栓,它们的染色体数目测定均为超3倍体(71~78条)。CGH检测显示H2M主要的细胞遗传学改变为染色体4q、13q、16q、17p和19p缺失和1q、3q、5p、6p、7q和8q扩增,其中有一条标记染色体含有1q和6p[t(1;6)染色体];而H4M染色体8p,9,13q,16q缺失和6p,7p,11p,11q13扩增,其中有一条标记染色体含有一长的均染区(hsr)。H2M细胞接种裸鼠1个月,产生典型的人肝细胞癌,但H4M接种尚未能成瘤。【结论】Percoll浓度梯度分离癌细胞和微环境消化法取得癌细胞克隆是建立原代细胞系的有效方法。2例肝癌细胞系的建立为以后肝癌研究提供了实验材料,所测出的肝癌细胞系的细胞遗传学改变及在裸鼠接种成瘤,为肝癌细胞癌基因和抑癌基因筛选提供了研究线索和实验模型。 | 张萌 胡少为 姜桔红 文剑明 | 2007 | 中山大学学报(医学科学版)2007，28，6： | 0 |
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