HBV X区基因部分序列的亚克隆与PCR检测

查看全文 作　　者：[1]袁媛;[1]陈强;[1]杨继红;[1]熊国梅;[1]刘中来

机构地区：[1]华中师范大学生命科学学院,武汉430079

出　　处：《现代生物医学进展》索引2006年第6卷第8期,共4页

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No.40172005) 摘　　要：目的:探讨HBV X区基因用于乙型病毒性肝炎早期诊断价值和意义。方法:设计特异性引物,将pBR322-HBV质粒X区部分序列PCR产物AT亚克隆至pBS-T载体,提取和纯化质粒DNA,再对HBV X区序列进行PCR扩增。结果:获得了预期希望的质粒。PCR的最佳退火温度为51℃,灵敏度达到101拷贝/2μl,线性范围101-1010拷贝/2μl。讨论:pBR322-HBV质粒中的靶基因成功地被亚克隆至pBS-T载体。pBR322-HBV中X区目的序列扩增产物为57bp,该小片段勿需纯化就可直接AT亚克隆至新载体,有利于后续的常规PCR检测和TaqMan MGB荧光定量PCR检测。 关键词：乙型肝炎病毒 X区基因亚克隆灵敏度

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