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| 1 | 茄子基因组DNA提取及ISSR-PCR反应体系优化显示文摘在易金鑫等(2004)的研究基础上,对常规CTAB提取方法进行改良.不同植物类群ISSR的最佳反应条件有所差别,如模板DNA浓度、Mg2+用量、dNTP浓度、退火温度等.对于ISSR反应体系的一些影响因子已有初步的研究(唐利华等,2005;张志红等,2004),但在茄子中尚未见报道. | 杜黎明 毛伟海 包崇来 胡天华 朱琴妹 胡海娇 | 2007 | 农业生物技术学报2007，15，4： | 12 |
| 2 | 山生柳SSR-PCR反应体系优化显示文摘本研究以祁连山4个海拔梯度的山生柳(Salix oritrepha)为材料,采用L9(34)正交试验设计和单因子试验,分析山生柳SSR技术中PCR体系的主要成分对扩增结果的影响,并对引物SHUK123的适宜退火温度进行优化。结果表明,PCR反应体系的最佳条件:20μL体系中2.0mmol·L-1 Mg2+1μL,0.10mmol·L-1 dNTPs1.5μL,0.5UTaq酶用量为1μL,20ng·μL-1 DNA模板1μL,0.5μmol·L-1的上下游引物各2μL,10×TaqBuffer 2μL,ddH2O加至20μL。扩增反应程序:94℃高温预变性时间3min,94℃变性45s,Tm(不同退火温度)退火时间45s,72℃延伸30s,循环数30个,最后72℃后延伸时间5min,4℃保温。适宜退火温度为56℃。以上结果表明,此反应体系在山生柳PCR扩增中的稳定性和可重复性较好。 | 郭敏 李毅 马彦军 | 2012 | 草业科学2012，29，5： | 9 |
| 3 | 马铃薯再生体系的建立及其遗传分析显示文摘以马铃薯品种中薯2号为试材,筛选不同的培养条件建立了较高效的马铃薯再生体系,并对其再生过程进行了蛋白质检测和RAPD分析。愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA2.25mg.mL-1+NAA0.1￣0.2mg.mL-1,愈伤组织的诱导率达到73.17%~76.01%。自然生长、初代培养和继代培养的马铃薯再生体的水溶性蛋白之间存在着一些差异。利用RAPD标记技术,通过对54个引物的严格筛选,获得了3个扩增产物略有差异的引物。 | 秦敏 郜刚 | 2005 | 中国马铃薯2005，19，5： | 7 |
| 4 | 正交设计优化茄子SSR反应体系显示文摘以茄子基因组 DNA 为模板,利用正交设计方法对茄子 SSR 反应体系中的 Mg^(2+)、模板 DNA、Taq 聚合酶、dNTP、引物5个因素进行了优化,同时对反应程序中的退火温度及循环次数进行筛选。结果确定了茄子10 μL体积 SSR 反应体系的最优条件为:Buffer 为1 μL,Mg^(2+)为2.25 mmol·L^(-1),dNTP 为400 μmol·L^(-1),上下游引物各为39.60 ng,Taq 聚合酶为0.75 U,DNA 约为100ng。PCR 程序为94 ℃预变性2 min;然后进行35个循环的94℃变性30 s,52℃复性30 s,72℃延伸45 s;72℃延伸8 min 后4℃保存。 | 韩洪强 李怀志 刘杨 陈火英 | 2008 | 上海交通大学学报(农业科学版)2008，26，4： | 6 |
| 5 | 金花梨变异单系对梨黑星病的抗性及其RAPD分析显示文摘以金花梨及其12个变异系为材料,进行了梨黑星病抗性的田间调查。再以金花梨及其18个变异系为试材,采用改进的CTAB法提取基因组DNA进行RAPD分析。结果表明,金花梨各变异单系的梨黑星病抗性发生了一定程度的变异,其中J4抗梨黑星病能力最强,其次为J10、J14、J5、J15;经RAPD分析,发现所用40个引物中有5个引物扩增出多态性,证明金花梨各变异单系在基因上发生了变化,为其抗病性发生变异的真实性提供了证据。 | 刘遵春 廖明安 | 2006 | 江苏农业科学2006，34，2： | 2 |
| 6 | 茄子RAPD分子标记体系的建立与优化显示文摘采用改良的CTAB法提取茄子基因组DNA,并通过单因素多水平梯度试验,比较筛选RAPD扩增体系的各影响因素,建立了茄子RAPD-PCR的最佳反应体系:20μL反应体系其中含25 mmol/L MgCl2 2.0μL1、0×PCR Buffer 2.0μL、10mmol/L dNTP 0.5μL5、U/μL Taq E 0.2μL0、.1μmol/L Primer 3μL1、0 ng/L模板DNA 3μL、灭菌双蒸水9.3μL。扩增程序为:94℃预变性5 min;94℃变性1 min,37℃退火1 min7,2℃延伸1.5 min4,5个循环;72℃延伸10 min后4℃保存。 | 吴雪霞 查丁石 朱宗文 金海军 李贤 | 2011 | 江西农业学报2011，23，6： | 2 |
| 7 | 石鲽基因组DNA的提取及其RAPD体系的优化显示文摘[目的]研究石鲽基因组DNA的提取及其RAPD体系的建立和优化。[方法]以石鲽为试材,按常规酚/氯仿抽提法提取其基因组的DNA,对影响RAPD反应的各因素进行优化,建立了石鲽的最佳RAPD反应体系和程序。[结果]采用常规酚/氯仿抽提法获得的DNA完全能够满足RAPD分析的要求。通过优化建立一套适合石鲽的稳定的RAPD反应体系:反应体系总体积为25μl,包括10×buff-er2.5μl,MgCl22 mmol/L,dNTPs 0.15 mmol/L,引物0.2μmol/L,模板30 ng,Taq酶1 U。扩增程序为:94℃预变性5 min,45次PCR循环(94℃变性45 s,36℃退火45 s,72℃延伸2 min和72℃延伸10 min。利用该体系对OPK和OPV系列共40条引物进行扩增,发现其中部分引物能产生稳定、清晰的条带。[结论]该体系为石鲽遗传多样性以及相关分子标记的研究奠定了基础。 | 徐建鹏 赵彦宏 赵建萍 刘林德 孙振兴 万军利 王爱云 常林瑞 李清 | 2008 | 安徽农业科学2008，36，35： | 0 |
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