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| 1 | RAPD标记鉴定南瓜种子纯度的研究显示文摘采用RAPD技术,对南瓜新品种锦栗、红栗的杂交种纯度开展了分子鉴定研究。采用优化的RAPD反应程序筛选出2条随机引物,结果表明,N481在锦栗南瓜亲本及杂交种间扩增出品种特异性条带,N31在红栗南瓜亲本及杂交种间扩增出品种特异性条带,且F1带型呈双亲互补,非常适合在室内快速准确地进行锦栗、红栗南瓜杂交种的纯度鉴定,RAPD鉴定结果与大田鉴定结果吻合率高。 | 罗伏青 孙小武 董亚静 刘泽发 杨红波 | 2008 | 华北农学报2008,23,3: | 17 |
| 2 | 白菜抗霜霉病基因的RAPD标记显示文摘研究了与抗霜霉病基因紧密连锁的RAPD分子标记,利用白菜抗病品种014和感病品种010杂交的F2群体144个单株为材料,通过人工接种鉴定,采用高抗单株和高感单株分别构建抗、感病池,利用BSA法筛选了560条RAPD引物,其中引物AY12在抗感病池中扩增出多态性片段AY121238,通过F2单株验证后证明AY121238与抗霜霉病基因紧密连锁,其遗传距离为6·7cM。 | 冷月强 侯喜林 史公军 | 2007 | 园艺学报2007,34,3: | 14 |
| 3 | 洋葱细胞质雄性不育基因RAPD及SCAR分子标记研究显示文摘对洋葱雄性不育系101A及其保持系101B基因组DNA进行RAPD分析,共使用了200条随机引物,其中有188条引物在两系之间都得到了扩增产物,68条引物扩增结果在两系之间表现出了遗传多态性。在其不育系中获得了1条稳定扩增的片段AK151400,序列测定结果表明,AK151400序列全长为1 360 bp,其编码的氨基酸序列与水稻(O ryza sativaL.)的GA3(AP005256.3,G I:50508703)序列有59%的同源性和75%的相似性。根据序列测定结果设计了1对特异引物,将AK151400转化为更稳定的SCAR标记。 | 陈沁滨 侯喜林 陈晓峰 张静宜 薛萍 | 2007 | 南京农业大学学报2007,30,4: | 13 |
| 4 | 不结球白菜Pol胞质雄性不育系和其保持系的RAPD分析及分子标记的筛选显示文摘对不结球白菜Pol胞质雄性不育系(CMS)及其保持系基因组DNA进行RAPD分析,共使用了386条随机引物,其中有346条引物在两系之间都得到了扩增产物,64条引物扩增结果在两系之间表现出了遗传多态性。在其不育系中获得了1条稳定扩增的片段OPAY1000,序列测定结果表明,OPAY序列全长为1 053 bp,在GenBank中的登录号为DQ320101。根据序列测定结果设计了1对特异引物,将OPAY1000转化为更稳定的SCAR标记。 | 邓晓辉 张蜀宁 侯喜林 陈沁滨 | 2007 | 南京农业大学学报2007,30,1: | 8 |
| 5 | 大白菜EST-SSR反应体系优化及引物筛选显示文摘探讨了大白菜EST-SSR反应体系的优化,利用优化的体系筛选部分引物。采用L16(44)正交设计,研究各主要参数的适宜浓度,建立适合大白菜EST-SSR反应的最佳体系。结果表明,各因素不同水平浓度对扩增结果均有一定影响,其中以引物浓度影响最大,其次是dNTP和Taq DNA聚合酶,最小是模板DNA用量。优化后的最佳体系(20μL)为:引物浓度1.0μmol/L,dNTPs0.25mmol/L,Taq酶0.5U,模板DNA70ng。利用优化的体系,根据大白菜EST序列设计引物126对,分别以2对抗、感病毒病的大白菜材料的基因组DNA为模板进行扩增,筛选出至少在一份材料中扩出多态性的引物19对。该优化体系可用于大白菜EST-SSR扩增,初步筛选的引物可用于大白菜病毒病分子标记的进一步研究。 | 佟海申 宋琳 张志刚 赵智中 宋希云 李巧云 | 2010 | 科技导报2010,28,3: | 8 |
| 6 | 不结球白菜分子遗传图谱的构建及分析显示文摘以不结球白菜常州乌塌菜和二青杂交产生的181株F2代分离材料为作图群体,利用ISSR、RAPD、SSR、SRAP等分子标记来构建不结球白菜分子遗传连锁图谱.结果表明,构建的连锁图谱包含11个连锁群,由139个标记组成,其中包括4个ISSR标记、19个RAPD标记、22个SSR标记和94个SRAP标记.其中偏分离标记37个,占26.6%;每条连锁群上的标记数在4~33个之间,连锁群长度在61~164cM的范围,覆盖基因组950cM,总平均图距6.8cM. | 单晓政 李英 高素燕 马成英 刘同坤 朱玉英 侯喜林 | 2009 | 西北植物学报2009,29,6: | 7 |
| 7 | 洋葱(Alliumcepa L.)RAPD-PCR反应体系及扩增程序的优化显示文摘为建立多态性高、稳定性好的洋葱RAPD-PCR反应体系,采用正交设计,研究了Taq酶、Mg2+、引物和dNTP 4种RAPD-PCR反应组分浓度变化对扩增结果的影响,在此基础上对模板DNA用量、扩增程序中退火温度和反应循环次数进行了筛选。试验结果表明,洋葱20μl RAPD-PCR优化反应体系为1×Buffer、2.0 mmo1/L Mg2+、1.0 UTaqDNA聚合酶、200μmo1/L dNTP、0.6μmo1/L引物、2%甘油和15 ng DNA模板;PCR扩增程序为94℃预变性4 m in;94℃变性30 s,35℃退火40 s,72℃延长1.5 m in,45个循环;72℃保温延伸7 m in。 | 陈沁滨 侯喜林 王建军 冷月强 蒋芳玲 薛萍 | 2006 | 江苏农业学报2006,22,4: | 7 |
| 8 | 结球甘蓝RAPD反应条件的优化显示文摘以甘蓝(Brassicaoleraceavar.capitata)基因组DNA为模板,比较筛选RAPD扩增体系的各影响因素,优化了甘蓝的RAPD反应体系,调整了扩增程序。该体系反应总体积为20μL,其中25mmol/LMgCl22.0μL,10×PCRBuffer2.0μL,10mmol/LdNTP0.5μL,5U/μLTaqE0.5μL,20ng/μLPrimer1.5μL,10ng/μL模板DNA3μL,灭菌双蒸水10.5μL。适宜的扩增程序为:94℃预变性5min;94℃变性1min,37℃复性1min,72℃延伸1.5min,40个循环;72℃延伸10min后15℃保存。 | 刘冲 薄天岳 葛才林 任云英 陈锦秀 杨晓锋 | 2005 | 上海农业学报2005,21,3: | 5 |
| 9 | 白菜叶绿体DNA快速提取及分析显示文摘采用SDS-蛋白酶法提取了白菜的叶绿体DNA.琼脂糖电泳及紫外分光光度分析表明,所提取的叶绿体DNA质量高,除cpDNA主环外,在胞质雄性不育新种质及原不育系中还存在约1375bp和831bp的两条质粒分子.用所提取的叶绿体DNA作为模板进行RAPD扩增,获得了清晰的扩增图谱.该方法与传统的提取方法相比省时、高效、无污染. | 史公军 侯喜林 王彦华 | 2005 | 应用与环境生物学报2005,11,3: | 5 |
| 10 | 胞质雄性不育相关基因的克隆及其表达分析显示文摘根据GenBank中orf224和atp6基因的保守序列设计特异引物,对不结球白菜Pol胞质雄性不育系的基因组DNA进行特异扩增,获得了Pol胞质雄性不育的特异基因orf224和atp6的DNA序列.用Blastn在GenBank中进行同源性比对分析,发现不结球白菜orf224c和atp6c基因与已报道的orf224和atp6基因的同源性高达100%,在GenBank中的登录号依次为DQ400846、DQ412559.运用半定量RT-PCR对orf224c基因在不同器官中的表达水平进行分析,结果表明:不育系花期叶片中该基因的表达量比长度小于0.5 mm蕾和雄蕊中的明显低,在后2个器官中的表达量无明显差异;而在保持系的上述3个器官中的表达量无明显差异.该结果显示orf224基因表达上调与孢原细胞分化受阻相关. | 邓晓辉 张蜀宁 侯喜林 韩建明 | 2006 | 西北植物学报2006,26,9: | 4 |
| 11 | 苏丹草RAPD反应条件的优化与应用显示文摘为研究不同因素对苏丹草随机扩增多态性DNA(RAPD)反应体系的影响,建立并优化反应体系;再利用优化体系绘制了DNA指纹图谱以区分两个高丹草品种。提取苏丹草的基因组DNA,分别设置Mg2+浓度为1.0mmol/L、1.5mmol/L、2.0mmol/L、2.5mmol/L、3.0mmol/L;退火温度为34℃、35℃、36℃、37℃、38℃;Taq酶含量为0.6U、0.8U、1.0U、1.2U、1.4U进行PCR扩增。结果表明:Mg2+2.0mmol/L,退火温度36度,Tap酶活性值1.2U是进行苏丹草RAPD分析的最优反应条件。利用最优反应条件绘制了皖草2号和皖草3号的DNA指纹图谱,在该图谱中有A、B两条特征带,可以区分皖草2号和皖草3号。 | 李杰勤 王丽华 詹秋文 李云飞 | 2006 | 中国农学通报2006,22,12: | 2 |
| 12 | 羽衣甘蓝SSR反应体系的优化显示文摘为优化羽衣甘蓝(Brassica oleracea var.acephala)SSR反应体系,并利用优化的体系进行引物的筛选。采用单因素完全随机试验筛选各反应因素的最佳水平,并采用L16(45)正交设计进行试验优化,建立了羽衣甘蓝SSR-PCR最佳反应体系。结果表明,各因素不同水平浓度对扩增结果均有一定影响,羽衣甘蓝基因组DNA的最佳SSR反应体系为DNA模板量(50 ng/μL)1.0μL,10×PCR Buffer 1.0μL,引物量(2.0μmol/L)上下游各3.0μL,dNTPs(2.5 mmol/L)0.8μL,Taq聚合酶(5 U/μL)0.2μL,ddH2O 1.0μL,总体积10μL。检测了优化体系的稳定性,利用优化的反应体系对芸薹属植物20对SSR引物进行扩增并用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,在所选用的20对引物中,18对扩增出了清晰的条带,11对具有特异扩增条带,多态性引物比率为61%,验证了该体系可用于羽衣甘蓝SSR-PCR扩增和SSR引物的筛选。 | 刘畅 祝朋芳 房霞 康耀海 赵颖 | 2014 | 湖北农业科学2014,53,9: | 1 |
| 13 | 不结球白菜新种质P70-203雄性不育细胞质类型的鉴定显示文摘本研究根据OguraCMS、PolimaCMS的不育性状相关的线粒体基因序列设计特异引物,对不结球白菜雄性不育系新种质P70-203及其保持系P60-27-1进行PCR分析。研究结果表明,Polima引物P3/P4,P5/P6在不育系与可育系中均无扩增条带;Ogura引物P1/P2在不育系中扩增出750bp的特异片段,但可育系中无扩增条带。将扩增的特异条带回收并测序,将得到的测序结果在NCBI中进行Blastn同源性比较,结果与青花菜Ogura(登录号:EU604643)和萝卜Ogura(登录号:AB055438)细胞质雄性不育同源性均达到99%。从分子角度初步推测:该雄性不育系新种质P70-203具有Ogura细胞质。 | 成素云 侯瑞贤 朱玉英 李晓锋 朱红芳 侯喜林 岳翔 杜正香 | 2009 | 基因组学与应用生物学2009,28,5: | 1 |
| 14 | 大白菜种质资源遗传多样性及纯度检测的研究显示文摘本试验应用RAPD方法对60份大白菜品种资源进行了遗传多样性的研究,采用NTSYS软件按UPGMA方法进行聚类分析,试验结果为以后的亲本选配提供了理论的依据;同时对同一自交系不同单株间进行了纯度检测,表明所选用的纯度已经基本趋于稳定的状态。 | 张勇 张耀伟 崔崇士 | 2006 | 北方园艺2006,,6: | 0 |