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| 1 | 外源DNA花粉管通道途径导入机理研究进展显示文摘花粉管通道法由中国科学家提出,将基因工程和常规育种相结合,是一种颇具特色的转基因技术。详细地回顾了在花粉管通道技术转化机理研究方面的研究进展,并对花粉管通道技术的发展前景进行了展望。 | 刘芳 袁鹰 高树仁 刘红军 李晓辉 | 2007 | 玉米科学2007，15，4： | 14 |
| 2 | 真空渗透法转化油菜及转化种子的筛选显示文摘真空渗透遗传转化法首先在拟南芥(Arabidopsis thaliana)中获得成功,是一种简便、快速且无需经过组织培养阶段即可获得大量转化植株的基因转化方法。该研究以不同遗传背景的3个甘蓝型油菜(Brassica napus)品种(系)陕3B、L45和Mg23为材料,对真空渗透遗传转化方法中真空渗透时间和Silwet L-77浓度与遗传转化效果的关系进行了比较,同时对转化种子的筛选方法进行了优化。结果表明,卡那霉素(Km)对油菜种子的萌发影响不显著,但对其生长发育有明显的抑制作用。不同油菜品种对卡那霉素的敏感性不同,各自的致死浓度也不一样。在0%-0.05%的浓度范围内,随着Silwet L-77浓度的增加,在相同的真空渗透时间内,3个油菜品种的转化率逐渐升高。当Silwet L-77浓度为0.05%时,10分钟的真空渗透时间可获得最高转化效率,此时陕3B、L45和Mg23的转化率分别达到1.97%、2.09%和2.30%。 | 王道杰 杨翠玲 陆鸣 | 2009 | 植物学报2009，44，2： | 11 |
| 3 | 花粉在植物遗传研究中的应用显示文摘高等植物的花粉是一种理想的植物遗传转化材料。将花粉作为外源DNA的受体或媒介进行转基因研究,已成为现代植物遗传转化技术中的重要部分。小孢子花粉可以在植物体内自然发育为成熟花粉然后参与受精作用,或者经过小孢子培养进行孤雌生殖从而形成单倍体植抹,还可以在离体培养条件下使未成熟花粉发育成为可育花粉。笔者分别简要介绍了以上3种途径的研究现状、花粉培养方法以及在植物遗传转化中的应用,并通过对各方法优缺点的综合评价,为科研人员和育种工作者进行花发育机制研究、功能基因表达和作物遗传改良提供了一条新的思路。 | 赵小光 张耀文 关周博 王丽萍 曹栎 赵兴忠 陈文杰 | 2017 | 中国农学通报2017，33，13： | 5 |
| 4 | 超声波处理花粉介导‘黄花’梨遗传转化体系的建立显示文摘【目的】建立超声波处理‘黄花’梨花粉介导插入外源基因的技术体系。【方法】以‘黄花’梨花粉为试材,检测不同蔗糖溶液中梨花粉破损率;通过中心组合设计方法,对超声波处理功率、处理时间、间隙时间、处理次数4个因子进行优化;利用含荧光蛋白基因的表达载体pCAMBIA 1304检测转化效率。【结果】梨花粉的适宜等渗溶液为15g.L-1蔗糖溶液。超声波处理的梨花粉受体最佳参数为:超声波处理功率160~170 W,处理时间6~7 s,间隙时间7 s,处理次数7次。采用加入含GFP(green fluorescent protein)基因的pCAMBIA 1304表达载体质粒检测优化的超声波处理组合,梨花粉外源基因的插入效率为3%。【结论】研究确定了超声波处理‘黄花’梨花粉遗传转化体系。 | 马倩倩 宋跃 孙毅 张绍铃 崔贵梅 吴俊 | 2013 | 果树学报2013，30，4： | 4 |
| 5 | 花粉管通道法遗传转化核桃的研究显示文摘为了提高核桃花粉管通道法转化成功率,以‘清香’核桃(Juglans regia L.)为试材,研究了外源DNA导入受体时间、DNA浓度和导入方法对导入效率的影响。结果表明:外源DNA滴加处理的适宜时间为授粉后14~20h;外源 DNA 注射处理的适宜时间为授粉后24h。综合考虑外源DNA浓度对坐果率和GUS检测结果的影响,认为350~500μg .mL-1DNA适宜转化。采用切割柱头滴加、柱头直接滴加和子房注射等3种导入外源DNA的方法均获得了转化成功的果实,其中以切割柱头滴加法获得的转化果实率最高(36.4%),其次是柱头直接滴加法(20.7%),子房注射法因易造成机械损伤,坐果率最低(10.9%)。 | 师校欣 杜国强 王晓蔓 裴东 | 2012 | 园艺学报2012，39，7： | 4 |
| 6 | 农杆菌介导果树遗传转化之研究进展显示文摘综述了农杆菌介导法在果树育种领域研究进展:(1)农杆菌介导的遗传转化在果树抗病、抗虫、抗除草剂、抗冻、抗盐、改良生长特性、生根等方面的研究成果:(2)对农杆菌介导的遗传转化存在的高效离体再生系统的建立、提高转化后再生频率、假转化体和低转化率、过敏性反应、开发基因资源、基因工程的生物安全性、多重转化等问题进行了分析;(3)农杆菌介导叶绿体遗传转化。非组培遗传转化已成为模式植物遗传转化的主要手段,在此简单介绍了其应用情况和技术原理。这些方法在其它植物中也有广阔的应用前景。 | 赵玉辉 李作轩 | 2005 | 中国农学通报2005，21，11： | 3 |
| 7 | 外源基因转化棉花育种研究的进展与应用显示文摘棉花作为重要的经济作物,新品种的选育和应用对于促进棉花生产至关重要。通过转基因技术将外源基因转化棉花,是棉花育种的新手段。尤其是抗逆、抗除草剂、抗虫、抗病和提高棉花品质的转基因技术研究,有助于加速棉花新品种的培育。棉花的转基因技术主要包括农杆菌介导法、基因枪轰击法和花粉管通道法。利用不同的转基因技术在棉花外源基因遗传转化的育种研究中取得了明显成效,探讨外源基因转化棉花育种研究的进展与应用,为新疆陆地棉的转基因育种研究提供重要参考。 | 王志才 张富春 | 2011 | 生物技术通报2011，27，2： | 3 |
| 8 | 一种水稻真空渗透转化装置及方法的研究显示文摘探究适用于水稻的真空渗透转化装置及方法,旨在解决目前水稻转基因效率低、转化体变异多、周期长等问题。以抽穗期的‘云资粳41号’幼穗作为受体,应用自制的水稻真空渗透装置对其短暂抽真空渗透浸染导入外源基因。本试验共计转化水稻30株,收获19860粒T0代种子。研究发现不同浓度除草剂对T0代种子的萌发影响不显著,但对T1代材料的生长发育却具有明显抑制作用,因此选择苗期喷施法进行抗性转化子筛选,最佳筛选浓度为20 mg/L。经除草剂抗性筛选,获得抗性苗135株。经PCR分子检测,最终获得阳性苗114株,表明外源DNA已成功导入到受体水稻基因组中。本研究首次应用真空渗透法快速实现了水稻外源基因的转化,为水稻及其他作物的基因转化提供了一种快速、有效的新装置和新途径。 | 钟巧芳 李维蛟 殷富有 张敦宇 陈玲 陈越 曾民 程在全 | 2019 | 中国农学通报2019，0，27： | 2 |
| 9 | 应用真空渗透法将SFL基因转入水稻的研究显示文摘【目的】真空渗透法无需组培过程,可明显缩短转化周期,提高转化效率。文章建立了水稻的真空渗透转化体系。【方法】应用自主研制的真空渗透转化装置,对开花前的活体水稻进行短暂抽真空条件下的农杆菌侵染,快速将苦参凝集素蛋白基因(SFL)成功转入水稻。【结果】对大量T0代转化种子进行除草剂抗性筛选、氯酚红和PCR检测,获得一批转基因阳性苗,证明外源基因已整合到水稻基因组中;经苗期喷雾接种和田间人工诱发鉴定,与非转基因对照相比,最终筛选出抗性明显增强的转SFL基因水稻材料,证明SFL基因在水稻中得到表达。【结论】本研究为水稻及其它作物的基因转化提供了一条快速、有效的新途径,同时也为SFL基因的功能研究及抗稻瘟病水稻新品种的培育奠定了基础。 | 钟巧芳 李定琴 李维蛟 陈越 柯学 陈玲 肖素勤 王波 杨久 程在全 | 2018 | 西南农业学报2018，31，12： | 1 |
| 10 | 木薯根组织特异性启动子的克隆及鉴定显示文摘【目的】克隆鉴定木薯根组织特异性启动子,为深入解析和鉴定木薯块根发育及淀粉合成调控机制中关键基因的功能提供理论参考。【方法】根据木薯不同组织部位转录组数据,并结合实时荧光定量PCR检测结果,鉴定出木薯块根和初生根中特异高表达基因,使用PLACE在线网站分析该基因上游1464 bp启动子序列,依据其根特异顺式作用元件ROOTMOTIFTAPOX1(RMT1)的分布情况,对该序列进行截短分析,并设计其特异性引物,PCR扩增获得长度为1464、705和319 bp的启动子序列,与β-葡萄糖苷酶(GUS)基因融合并通过农杆菌介导转入拟南芥,对转基因植株进行GUS染色和GUS活力测定,从而鉴定启动子的组织特异性及启动活性。【结果】根据木薯不同组织的转录组数据,筛选出3个在初生根、块根和根尖分生组织中特异高表达的候选基因MeHPS(Phytozome13登录号Manes.01G078200)、MeSR2(Phytozome13登录号Manes.04G017600)和MeSR3(Phytozome13登录号Manes.14G006300)。结合实时荧光定量PCR检测结果,鉴定出木薯块根和初生根中特异高表达基因MeHPS。通过对MeHPS基因启动子分析发现,1464 bp启动子序列含有5个顺式作用元件RMT1。转基因植株的GUS染色结果显示,p1464启动子具有明显的根特异性,p705启动子具有输导组织和根部特异性,而p319启动子基本丧失组织特异性。根系的GUS活力测定结果显示,p1464、p705和p319驱动的GUS活力分别为8.33、7.87和10.52 U/g,均显著高于35S启动子驱动的GUS活力6.69 U/g(P<0.05)。【结论】MeHPS基因在根中特异高表达,其p1464启动子具有根特异表达活性,可用于在根中特异驱动目的基因高水平转录,p705具有较强的输导组织特异性,可用于驱动具有转运功能蛋白类基因的转录,而p319可视为组成型启动子,能部分替代35S启动子的应用。 | 李远超 李可 王连南 陈新 李有志 王文泉 | 2023 | 南方农业学报2023，54，7： | 0 |
| 11 | 农杆菌浸种对甘蓝种子萌发及幼苗生长的影响显示文摘采用不同D600 nm值的农杆菌菌液浸泡甘蓝种子,研究农杆菌浸种对甘蓝种子萌发及幼苗生长发育的影响,并检测其转化效果。结果发现,农杆菌浸种对甘蓝种子的发芽率、发芽指数、活力指数均有抑制作用,且D600 nm值越高,抑制作用越明显。此外,农杆菌浸种对甘蓝幼苗的株高、叶面积、根茎比、鲜质量均有显著抑制作用。叶绿素含量随D600 nm值增大,呈先增加后降低的趋势,D600 nm为0.8时,叶绿素含量最高,为7.86 mg/g,D600 nm为1.6时,叶绿素含量最低,为5.64 mg/g。农杆菌浸种不影响SOD活性,但POD、CAT活性均随着D600 nm值的升高而升高。农杆菌浸种能获得一定的PPT抗性苗,其中D600 nm为0.8时获得的抗性苗最多,达到10.32%。PCR结果显示农杆菌浸种能实现基因的转化,其中D600 nm为1.6时转化率最高,达到2.33%。 | 李光远 王凤华 蒋燕 | 2015 | 江苏农业科学2015，43，3： | 0 |
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