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1PCR和核酸探针检测猪源沙门氏菌四环素耐药基因tetC的研究显示文摘对沙门氏菌的四环素耐药性进行了检测,结果表明,沙门氏菌对四环素类抗生素产生了广泛的耐药性,耐药率达100%,对其四环素耐药基因tetC进行了扩增,结果获得以质粒为模板的特异性产物,与药敏试验结果阳性符合率75%,具有较高的检出率。用光生物素对PCR产物进行标记,制备核酸探针,采用菌落原位杂交的方法对沙门氏菌进行检测,结果表明13株阳性、3株阴性,杂交结果与PCR结果阳性符合率为93.75%,具有较高的特异性。通过条件的优化,建立的四环素耐药基因tetC的PCR和核酸探针检测技术,为四环素耐药性的分子流行病学监测提供了有效的途径。代敏 王红宁 吴琦 2005畜牧兽医学报2005,36,5:15
2应用GPV VP3基因重组原核表达产物建立检测抗体的ELISA方法研究显示文摘利用鹅细小病毒(GPV)VP3基因的原核表达蛋白作为包被抗原建立了检测GPV抗体的间接ELISA及Dot-ELISA方法。经确定两种方法的抗原包被浓度为125μg/mL,其中间接-ELISA 100μL/孔、Dot-ELISA 5μL/点。间接-ELISA中HRP标记的兔抗鹅IgG的工作浓度是1:200,检测血清的最适稀释度是1:400,阳性判定标准为OD492≥0.20,且P/N≥2.0。用此方法检测弱毒疫苗免疫血清,其抗体滴度在1:400~1:51200。Dot-ELISA的结果与间接-ELISA的结果一致。布日额 李宝臣 马波 王君伟 Ulrich Neumann 2006畜牧兽医学报2006,37,2:15
3细小病毒分子生物学检测方法的研究进展显示文摘细小病毒(parvovirus)属细小病毒科(parvoviridae)、细小病毒亚科(parvovirinae)、细小病毒属(protoparvovirus),是单链线状DNA病毒,病毒颗粒无囊膜。细小病毒自然感染宿主范围广,包括脊椎动物、无脊椎动物及人类。由细小病毒引起的细小病毒病正在全球范围内流行并严重威胁着人与动物的健康。现阶段实验室应用广泛的细小病毒分子生物学检测方法主要包括:实时荧光定量PCR检测、核酸探针检测、环介导等温扩增反应(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)、重组酶聚合酶扩增反应(recombinase polymerase amplification,RPA)、DNA芯片技术等方法。本综述分别对不同细小病毒的分子生物学检测方法的研究进展进行阐述。曾倩 王海军 裴志花 孙明洁 张雪竹 王开 胡桂学 2019中国兽医学报2019,39,1:9
4检测鹅细小病毒的间接免疫酶组织化学法的建立显示文摘周春宇 程安春 汪铭书 刘菲 周毅 陈孝跃 2006中国兽医杂志2006,42,8:9
5荧光定量PCR检测雏鹅人工感染鹅细小病毒后病毒在体内分布规律显示文摘2005年从山东某鹅场16日龄商品代病死鹅中分离到1株鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV),命名为SD2005株。用建立的荧光定量PCR(FQ-PCR)检测鹅细小病毒的方法,检测SD2005株人工感染3日龄雏鹅(GPV抗体阴性)后各器官不同时间段的病毒含量,结果表明:在攻毒8h后能从消化系统及血液、心脏和肝脏中检测到病毒DNA;病毒DNA的含量在48h后达到最高峰,并一直维持到168h。随后各待检脏器中病毒DNA含量持续降低,但在720h后仍能从粪便、肝脏和脾中检测到少量的病毒DNA。本试验为阐明GPV的致病机理及防控提供了重要的试验数据和理论依据。毕建敏 田夫林 李延鹏 朱瑞良 2008中国预防兽医学报2008,30,1:6
6鹅细小病毒感染的PCR诊断显示文摘吴金花 2004黑龙江畜牧兽医2004,,12:4
7用地高辛标记核酸探针检测猪细小病毒的研究显示文摘根据猪细小病毒(PPV)基因组序列,设计引物克隆了PPV YK株保守序列NS1基因,将NS1基因纯化,利用地高辛标记制备了NS1基因PCR产物探针和克隆NS1探针,两种核酸探针的标记都达到了0.1 pg/μL。特异性试验结果表明,这两种探针都能与PPV DNA发生特异的阳性杂交,而与对照的PRV、PCV、PRRSV和HCV的核酸杂交呈阴性。敏感性试验结果表明,克隆NS1探针敏感度为0.5 pg/μL,NS1基因PCR产物探针敏感度为1 pg/μL。综上所述,这两种DIG标记探针特异性强,敏感性高,可用于PPV的检测。白红光 卫广森 徐宏军 李尚波 王文成 2005动物医学进展2005,26,9:4
8小鹅瘟病毒荧光RPA恒温快速检测方法的建立与应用显示文摘为快速检测小鹅瘟病毒,以小鹅瘟病毒VP3基因保守片段为靶点,利用重组酶聚合酶扩增技术(RPA)建立了一种准确高效的小鹅瘟病毒RPA恒温快速检测方法,对检测方法的灵敏度、特异性进行评价,并与传统PCR和Real-time PCR方法进行比较。结果表明,该检测方法可检测到10 copies/μL的病毒核酸,具有较高的灵敏度;只特异性地扩增小鹅瘟病毒,而与鹅副黏病毒、鹅源鸭瘟病毒、小鹅流行性感冒病毒、鹅副伤寒病毒、大肠杆菌和曲霉菌均未发生交叉反应,特异性良好;变异系数低于6%,具有很好的重复性;临床样品检测中与Real-time PCR符合率为99%。该方法可以很好地应用于小鹅瘟的大规模临床样本检测,为小鹅瘟病毒的高通量检测和流行病学调查提供技术手段。高远 徐龙涛 冯宗玲 曲光刚 李本科 2022中国兽药杂志2022,56,3:2
9小鹅瘟的PCR检测显示文摘通辽市某养鹅户饲养的640只雏鹅从5日开始死亡,死亡率达75%.经PCR检测后确诊为鹅细小病毒感染.刘洋 麻素然 2006内蒙古民族大学学报(自然科学版)2006,21,2:1
10猪细小病毒分子生物学与核酸探针的研究进展显示文摘猪细小病毒( Porci ne parvovi rus,PPV) 是引起猪繁殖障碍的主要病原之一,近年来PPV感染呈扩大上升趋势,给养猪业造成了巨大的经济损失。各国的研究者加强了PPV基因组结构和蛋白质的研究。随着分子生物学的发展,核酸探针以其敏感性和特异性成为快速诊断PPV的一种方法。白红光 卫广森 徐宏军 宣其东 2005现代畜牧兽医2005,,7:1
11小鹅瘟病毒实验室检测方法研究进展显示文摘小鹅瘟(Gosling plague,GP)又称为鹅细小病毒病,是由细小病毒科细小病毒属的鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV)引起的一种急性或亚急性、高度接触性、败血性传染病。该病主要以严重下痢、渗出性肠炎和肠道栓塞为特征。发病雏鹅常表现为出血性、纤维素性及渗出性肠炎,最后形成肠内栓塞。该病主要发生于1月龄以内雏鹅和雏番鸭,具有传播快、庄金秋 梅建国 莫玲 姚春阳 沈志强 2014水禽世界2014,,5:1
12鹅副黏病毒核酸探针检测方法的建立与应用显示文摘根据GenBank中已发表的鹅副黏病毒F基因序列,设计合成1对引物,利用RT-PCR扩增出1条与目的片段大小一致,约856bp的基因片段,回收并纯化此PCR产物。用随机引物法合成cDNA,地高辛标记,建立了地高辛标记探针检测鹅副黏病毒的方法。该探针能与鹅副黏病毒核酸发生特异性杂交,最低检出限量为3ng/L;而与H9N2亚型禽流感病毒、鹅细小病毒、大肠杆菌等核酸杂交均为阴性。对疑似鹅副黏病毒感染病变组织检测结果表明,气管、肺脏、脾脏、肝脏均可检测出鹅副黏病毒,以气管的检出率为最高。该研究为鹅副黏病毒的诊断和流行病学调查提供了一种可靠的方法。张伟 刁有祥 杜爱庆 高晓伟 张瑞平 刘方娜 臧大鹏 刘霞 2008中国兽医学报2008,28,8:1
13猪细小病毒分子生物学、诊断及核酸探针的研究进展显示文摘白红光 卫广森 徐宏军 2005饲料工业2005,26,11:0
14鹅细小病毒病的诊断方法研究进展显示文摘鹅细小病毒病又称小鹅瘟,是雏鹅的一种急性亚急性败血症,主要感染4—30日龄雏鹅,该病病程短、传播快、死亡率高。具有一定的流行病学表现、临床症状、病理变化等,依此可对该病作出初步诊断。但对本病确诊还须采用病毒的分离与鉴定、免疫学、分子生物学等诊断技术。董新辉 杨春莲 黄宇翔 2009养殖技术顾问2009,,7:0
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