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| 1 | 甜高粱ISSR-PCR反应体系的建立与优化显示文摘采用单因素试验设计,以甜高粱基因组DNA为模板,对ISSR反应中的4个主要影响因素:引物浓度、dNTP浓度、Taq DNA聚合酶和Mg^2+浓度的用量进行梯度设计优化分析,并对单因素试验结果进行了正交试验设计.研究结果表明,25μL最佳反应体系为:1.0 mmol·L^-1MgCl2,1.0 mmol·L^-1的dNTP,0.5μmol·L-1的引物,0.5 U的Taq DNA聚合酶.结果显示扩增产物条带清晰明亮、多态性丰富,且特异性强、重复性好,表明本研究所确定的反应体系适用于甜高粱的ISSR分子标记. | 周亚星 周伟 徐寿军 王振国 李岩 符雨姿 王亚士 | 2019 | 内蒙古民族大学学报(自然科学版)2019，34，2： | 3 |
| 2 | 极小种群喙核桃ISSR-PCR反应条件的建立与优化显示文摘本文采用正交和单因素相结合的方法研究dNTPs、Mg2+、引物、Taq DNA聚合酶、模板DNA、循环次数及退火温度对喙核桃ISSR-PCR扩增效果的影响,以期为喙核桃遗传多样性评价、亲缘关系分析等研究奠定基础。结果表明:喙核桃最佳ISSR-PCR扩增体系及程序为20μL的反应体系含dNTPs 0.5 mmol/L、Mg2+ 3.0 mmol/L、引物0.8μmol/L、Taq DNA聚合酶2.5 U、模板DNA 45 ng、10×PCR Buffer 2.0μL。退火温度为54.4℃,循环次数为40。本研究建立的喙核桃ISSR-PCR反应体系稳定、可靠,可用于该物种遗传多样性分析。 | 史艳财 邹蓉 朱成豪 熊忠臣 蒋运生 | 2020 | 广西科学院学报2020，36，1： | 3 |
| 3 | 花生MITE反应体系优化及其遗传多样性分析显示文摘为了建立适宜不同来源花生种质遗传差异分析的MITE反应体系,本研究从反应体系总量、Taq PCRMix用量、引物浓度、模板DNA浓度及退火温度、循环次数方面对反应体系进行优化,得到的最佳反应体系为:反应总体积10μL,模板DNA20ng,引物(15μmol/L)2μL,TaqPCRMix5μL。反应程序为95℃预变性3min;95℃变性30s,58℃退火40s,72℃延伸30s,循环32次;72℃延伸10min;4℃保存。利用优化的反应体系从50对AhMITE引物中筛选出11对多态性高的引物,并用于对22份不同来源的花生种质进行遗传多样性分析。结果表明,共扩增出23条带,其中,多态性带21条,多态性比例为91.3%,每个引物平均扩增的多态性带为1.91条。种质间遗传相似系数在0.222~0.957之间,平均值为0.644;通过NTSYS-pcVersion 2.1软件基于UPGMA法进行聚类图绘制,在遗传相似系数为0.62时可将22份花生种质分为3大类。表明经过优化的AhMITE反应体系可以有效地用于不同来源花生种质的遗传多样性分析,表现出良好的多态性,可为进一步使用AhMITE标记对花生品种鉴定和遗传图谱构建奠定基础。 | 徐彪 王佰众 李玉发 杨翔宇 王伟 牛海龙 李伟堂 刘红欣 吴松权 何中国 | 2022 | 山东农业科学2022，54，1： | 0 |
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