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| 1 | 左归丸对肾虚仔鼠胸腺内CD4-CD8-T细胞分化的影响显示文摘目的:研究左归丸对肾虚仔鼠发育过程中CD4-CD8-T细胞在胸腺内分化的影响以及补肾填精法的应用价值,探索“肾为先天之本”的理论内涵。方法:采用大鼠2∶1进行雌雄配对,3种应激法复合构建肾虚模型,将孕鼠分为正常组,模型组,胸腺肽组(0.003 g·kg^-1),左归丸低、高剂量组(2,8 g·kg^-1)。正常组不造模给予生理盐水灌胃;模型组造模给予生理盐水灌胃,胸腺肽组造模给予胸腺肽胶囊溶液灌胃,左归丸低、高剂量组造模给予左归丸悬浊液灌胃,选取胚胎16,19 d及出生第1天(E16,E19,P1)3个时期,计算仔鼠胸腺指数,电镜观察仔鼠胸腺上皮细胞超微结构形态,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测仔鼠胸腺内胸腺肽β4(TMSβ4)和胸腺肽α1(Tα1)的含量,流式细胞学检测仔鼠胸腺细胞表面CD4,CD8,CD25,CD44表达以鉴定T细胞类型。结果:电镜下模型组胸腺上皮细胞形态不规则,细胞核变形,核染色质明显聚集增加,胸腺肽组和左归丸低、高剂量组胸腺上皮细胞变形不明显;ELISA法检测结果显示,与正常组比较,模型组不同时期的TMSβ4,Tα1含量明显降低(P<0.05);与模型组比较,胸腺肽组和左归丸低、高剂量组胸腺内TMSβ4和Tα1的含量明显升高(P<0.05);流式细胞检测显示,与正常组比较,模型组在E16,E19,P13个时期CD4^-CD8^-T细胞均明显增加(P<0.05),CD4^-CD8^-CD25^-CD44^-T(DN4)明显增加(P<0.05);与模型组比较,胸腺肽组和左归丸低、高剂量组在E16,E19,P1时期CD4-CD8^-T细胞均明显减少(P<0.05),同时DN4也明显减少(P<0.05)。结论:左归丸可以改善肾虚仔鼠胸腺上皮细胞的结构,并通过增加仔鼠胸腺内TMSβ4和Tα1的分泌诱导胚胎期胸腺内T细胞从DN4至DP阶段的分化,说明左归丸通过补肾填精,促进T细胞发育成熟,调节仔鼠肾虚免疫失调状态。 | 赵敏 任梅荣 周艳艳 陈龙云 曹继刚 | 2020 | 中国实验方剂学杂志2020,26,11: | 4 |
| 2 | 基于自身免疫调节因子探讨左归丸对先天肾虚仔鼠T细胞迁移的影响显示文摘目的:观察左归丸对先天肾虚仔鼠胸腺和胸腺上皮细胞(TECs)内自身免疫调节因子(AIRE)、胰岛素样生长因子2(IGF2)、套膜蛋白(Involucrin)的表达和T细胞分类的影响。方法:构建先天肾虚仔鼠模型,各组孕鼠分别给予0.9%氯化钠溶液,胸腺肽,左归丸大、小剂量混悬液灌胃,至仔鼠出生。正常仔鼠胸腺TECs做原代培养,分为空白组、左归丸组、抑制剂组和抑制剂左归丸组。流式细胞学检测仔鼠胸腺和脾脏内T细胞分型,Western blot和RT-PCR检测胸腺和TECs内AIRE、IGF2、Involucrin蛋白和基因表达。结果:与对照组比较,模型组仔鼠脾脏内CD_4^(+)/CD_(8)^(+)T细胞,胸腺内AIRE、IGF2、Involucrin蛋白和基因表达均降低(P<0.05),胸腺内SP细胞增加(P<0.05);胸腺肽组及左归丸低、高剂量组仔鼠脾脏内CD_4^(+)/CD_(8)^(+)T细胞,胸腺内AIRE、IGF2、Involucrin蛋白和基因表达升高(P<0.05),胸腺内SP细胞减少(P<0.05)。与空白组比较,抑制剂组TECs内AIRE、IGF2、Involucrin蛋白和基因表达减少(P<0.05);与抑制剂组比较,左归丸组和抑制剂左归丸组TECs内AIRE、IGF2、Involucrin蛋白和基因的表达上升(P<0.05)。结论:先天肾虚仔鼠脾脏内CD_4^(+)/CD_(8)^(+)失衡,左归丸可以通过提高胸腺内AIRE、IGF2、Involucrin的表达,促进T细胞在胸腺正常成熟和外迁,纠正外周免疫器官脾脏的失衡状态。 | 任梅荣 曹继刚 桑红灵 徐安莉 萧闵 陈会敏 赵敏 | 2021 | 中华中医药杂志2021,36,4: | 3 |
| 3 | 基于细胞自噬探讨左归丸对肾虚仔鼠皮肤发育的影响显示文摘目的:研究左归丸对先天肾虚仔鼠发育过程中皮肤内细胞自噬的影响及其机制,探索补肾填精法在生长发育异常中的应用价值。方法:36只雌雄比例为2∶1的大鼠进行配对,复合应激法刺激孕鼠构建先天肾虚仔鼠模型,根据将孕鼠处理方式不同,分为正常组,肾虚组,左归丸低、高剂量组(2,8 g·kg^(-1))。正常组不造模给予生理盐水灌胃,肾虚组造模给予生理盐水灌胃,左归丸低、高剂量组造模给予左归丸悬浊液灌胃。切取出生后21 d仔鼠的背部皮肤,苏木素-伊红(HE)染色观察仔鼠皮肤显微结构形态,测量真皮层和表皮层厚度,蛋白免疫印迹法(Western blot)和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)分别检测仔鼠皮肤分泌型糖蛋白3a(Wnt3a)和β-连环蛋白(β-catenin)mRNA和蛋白表达量,免疫双荧光检测皮肤内自噬指标微管相关蛋白轻链3(LC3)和人死骨片1-泛素结合蛋白p62(SQSTM1-p62)的表达。结果:正常组仔鼠皮肤层次清楚,结构正常,肾虚组真皮层胶原排列疏松,左归丸低、高剂量组皮肤组成基本正常;与正常组比较,肾虚组仔鼠在皮肤的表皮层增厚,真皮层变薄(P<0.05);与肾虚组比较,左归丸低、高剂量组皮肤的表皮层和真皮层厚度的改变明显恢复(P<0.05)。与正常组比较,肾虚组仔鼠Wnt3a和β-catenin蛋白和mRNA表达明显下降(P<0.05);与肾虚组比较,左归丸低、高剂量组Wnt3a和β-catenin蛋白和mRNA表达升高(P<0.05)。同时免疫荧光法检测发现与正常组比较,肾虚组的LC3的表达上调,SQSTM1-p62表达下调;与肾虚组比较,左归丸可以逆转SQSTM1-p62和LC3的异常表达(P<0.05)。结论:左归丸可以通过增加仔鼠皮肤内Wnt3a和β-catenin蛋白和mRNA的表达,下调皮肤细胞自噬水平,改善先天肾虚仔鼠皮肤异常发育。 | 曹继刚 刘颖 桑红灵 赵敏 | 2021 | 中国实验方剂学杂志2021,27,8: | 2 |
| 4 | 左归丸及其组方治疗绝经后骨质疏松症的基础研究进展显示文摘骨质疏松症(osteoporosis, OP)是一种发病率高、骨折风险高、治疗率低的骨代谢疾病。传统中药复方在预防和治疗绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis, PMOP)方面有着悠久的历史与渊源,抗骨质疏松中药复方与单一药物相比具有明显的优势。左归丸作为传统补益肾阴方剂,临床运用广泛,现代药理研究发现左归丸有效抗炎、抗氧化、抗骨质疏松等作用。通过检索近年来关于左归丸治疗PMOP文献,从左归丸对骨髓间充质干细胞、成骨细胞的作用及干预骨质疏松症相关信号通路的进展,探讨左归丸对PMOP的潜在治疗机制。 | 胡阳 宋敏 李凯 刘路 李金益 王凯 | 2023 | 中华中医药学刊2023,41,12: | 1 |