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| 1 | 猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5/M蛋白可溶性表达及免疫原性分析显示文摘为表达出高可溶性的GP5/M蛋白并检测其免疫原性,本试验将高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)HN07-1毒株ORF5和ORF6基因序列上GP5和M蛋白的编码核苷酸序列进行密码子偏爱性优化设计,构建了GP5/M融合Grifin、GST、MBP、NusA、Sumo、Thioredoxin、γ-crystallin、ArsC、PpiB、CeHSP17共10种不同可溶性标签的表达重组载体。分别转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导,SDS-PAGE电泳对融合蛋白的可溶性表达进行检测,筛选出高可溶性表达的GP5/M融合蛋白。重组蛋白通过NiNTAAgarose亲和纯化,免疫家兔,对获得的免抗GP5/M血清进行间接ELISA和病毒中和试验。结果显示,成功构建10个GP5/M表达载体,10个标签中,MBP与GP5/M蛋白相融合的可溶性表达效果最好,并获得了高纯度的MBP—GP5/M重组蛋白质;通过免疫家兔,检测重组蛋白具有免疫原性并能刺激机体产生较高水平的中和抗体。结果表明,试验成功建立了稳定获得GPS/M重组蛋白质的方法,初步鉴定了重组蛋白的免疫效力,为PRRSV亚单位疫苗的后续研究及大量制备奠定基础。 | 郭玉堃 郭婉莹 明胜利 郭豫杰 杨国宇 | 2018 | 中国兽医学报2018，38，4： | 7 |
| 2 | 1株田间自然重组PRRSV类NADC30毒株的分离鉴定及序列分析显示文摘为了解田间猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRsv)的流行及变异情况,本研究将PRRSV阳性样品接种到Marc-145细胞并传代后成功分离到1株PRRSV,将其命名为HENZMD-9,并对其全基因序列进行测定和分析。结果显示,HENZMD-9为1株类美国NADC30毒株,并与国内高致病性PRRSV(HP—PRRRSV)毒株的2个片段发生重组,这2个片段分别来自HP—PRRSV JXA1株的细胞传代致弱株JXA1-P80及JXA1P45,分别位于基因组5’端及开放式阅读框lab区域,表明HENZMD-9很有可能与JXA1-R疫苗回复株发生了重组,提示不同类型毒株在田间的共存会加剧PRRSV的演变,从而增加临床防控难度。因此,持续监测PRRSV田间流行及变异动态对PRRSV的防控具有一定的,临床指导意义。 | 崔丹丹 彭志锋 王傲杰 王新港 周峰 王川庆 | 2018 | 中国兽医学报2018，38，6： | 2 |
| 3 | PRRSV YN-LQ株的全基因序列测定及遗传进化分析显示文摘从云南省某发病猪场分离到1株猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),将该毒株命名为YN—LQ株。为了研究该毒株的遗传变异及分子生物学特征,根据PRRSV标准毒株NCBI登录号KC422728设计10对引物,对YNI。Q株全基因进行扩增及测序,将测序结果依次拼接获得YN—LQ株的全基因序列,并进行序列的比对分析。结果显示:PRRsVYN—LQ株基因组全长为15320bp;将YN—LQ株与经典PRRSV病毒株Nsp2、GP5及全基因进行比对分析,发现YN—LQ株与JXAl的同源性最高。Nsp2基因序列同源性为99.0%,其氨基酸序列有15个位点发生了改变;GP5基因序列同源性为97.7%,其氨基酸序列有9个位点发生了改变;全基因的同源性为98.7%。证实该毒株为JXA1变异株,为深入研究该病毒株的遗传与变异及其与生物学特性的关系奠定了基础。 | 张涵 解长占 张世亨 李卓昕 李成辉 赵冠宇 马彬尧 尹革芬 鲁会军 金宁一 李太元 | 2018 | 中国兽医学报2018，38，7： | 2 |
| 4 | 广西PRRSV分离株Y12018全基因组扩增和遗传进化分析显示文摘为监测广西地区猪繁殖与呼吸系统综合征病毒(PRRSV)的流行和变异情况,本研究从广西某猪场采集样本成功分离获得PRRSV毒株并命名为Y12018,并参考扩增全长所需的10对特异性引物对其全基因组序列分段扩增后连接,为进一步鉴定Y12018毒株,将Nsp2与GP5等序列分别与参考毒株进行对比,分析该分离株与国内外典型毒株的遗传进化关系从而探究其基因组来源。结果显示,Y12018毒株基因组全长为15 017 bp(除去polyA尾),与NADC30毒株遗传关系最为接近,全基因组同源性为94.4%;Nsp2同源性为96.8%,与NADC30相比缺失的2个氨基酸,对应VR-2332为587~588位点;GP5同源性为93.5%,对应氨基酸序列有31个位点发生改变;其余各开放阅读框的同源性为92.9%~97.1%;遗传演化分析结果表明分离株Y12018属于类NADC30毒株。 | 王政 解长占 于成东 于桐 李亭玉 李金凤 孟媛 鲁会军 金宁一 张雪梅 | 2021 | 中国兽医学报2021，41，5： | 0 |
| 5 | 转录组测序技术在猪繁殖与呼吸综合征病毒研究中的应用显示文摘猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)能导致母猪繁殖障碍及仔猪呼吸困难等症状,严重威胁全球养猪业的健康发展。目前,PRRSV的致病机制及其与宿主的互作机理并不完全清楚。近年来,随着高通量测序技术的快速发展,转录组测序技术已被广泛应用于PRRSV的研究中,为深入解析PRRSV的致病机理及其与宿主的互作机制提供了一种全新的研究工具。作者从感染应答、蛋白功能、毒株、疫苗、抗病品种5个方面对近年来转录组测序技术在PRRSV研究中的应用进行了综述分析,对其筛选的差异表达基因(DEGs)和通路进行总结,以期为未来PRRSV转录组学研究提供参考。 | 梁婉 周丹娜 彭忠 杨克礼 段正赢 郭锐 刘威 吴斌 陈文杰 孟丽 田永祥 | 2019 | 中国畜牧兽医2019，46，1： | 0 |
| 6 | 猪繁殖和呼吸障碍综合征病毒GP5蛋白的原核表达显示文摘实验根据E. coli的密码子的偏好性,将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) ATCC VR-2332株的GP5基因序列进行优化合成。PRRSV GP5蛋白的表达为进一步研究GP5在病毒感染过程中的作用和疫苗的开发奠定了基础。 | 侯震 | 2018 | 畜禽业2018，29，10： | 0 |
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