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| 1 | 短期香烟烟雾及脂多糖气道刺激对小鼠气道免疫细胞的影响显示文摘目的:探讨香烟烟雾及脂多糖(LPS)短期刺激对小鼠气道免疫细胞的影响。方法:LPS组小鼠气管内(一次性)滴注10μg LPS,熏烟组小鼠每天熏9支香烟持续熏4 d,观测不同干预措施对小鼠体重的影响;检测支气管肺泡灌洗液(BALF)总细胞数及细胞分类计数,观察细胞形态,并利用PDB(2-丁酸佛波醇酯)诱导BALF中的细胞检测ROS产出率;荧光定量PCR法检测肺组织中GM-CSF和CXCL15 m RNA表达。结果:与实验前相比,对照组及LPS组小鼠体重未见明显变化(P>0. 05),熏烟组小鼠体重减少了18. 9%,其变化差异明显高于对照组和LPS组(P<0. 01)。与对照组相比,熏烟组小鼠气道灌洗液细胞总数和各类细胞总数均无明显变化(P>0. 05); LPS组小鼠气道灌洗液细胞总数、巨噬细胞计数和中性粒细胞计数均高于对照组和熏烟组(P<0. 01),且LPS组灌洗液巨噬细胞体积较大,形态不规则,中性粒细胞胞核分叶较对照组多。LPS组小鼠气道灌洗液细胞在PDB的诱导下及没有PDB的诱导下均比对照组和熏烟组具有更高ROS产出率(P<0. 01)。与对照组相比,LPS组小鼠肺组织中GM-CSF表达显著增高(P<0. 01),但CXCL-15和熏烟组小鼠肺组织中GM-CSF及CXCL-15的表达并未发生改变(P>0. 05)。结论:短期香烟烟雾刺激明显引起小鼠体重下降,但未能诱发明显气道炎症反应; 10μg LPS气道滴注可通过增加肺组织GM-CSF的表达,增加中性粒细胞的成熟和募集,增加中性粒细胞内氧化应激反应及产生ROS的能力,诱发明显气道炎症反应。 | 陈瑞凤 梁紫尧 于旭华 尹硕淼 范龙 林琳 许银姬 陈云波 王奇 | 2018 | 中国免疫学杂志2018，34，11： | 3 |
| 2 | miR-7敲减CD4+T细胞过继转输对小鼠急性肝损伤模型的影响显示文摘目的:观察过继转输微小RNA-7(microRNA-7,miR-7)敲减(knockdown,KD)CD4^+ T细胞对小鼠急性肝损伤模型的影响,并探讨其意义。方法:利用磁珠分选技术分别获得正常野生型(WT)小鼠和miR-7KD小鼠脾脏中CD4^+ CD62L^+ T细胞;CFSE染色标记后,按每只小鼠2×10~6个细胞,经尾部静脉注射给同系WT小鼠,并利用伴刀豆球蛋白A建立急性肝损伤模型;观察过继转输后2组小鼠肝脏的形态、重量及其重量指数的变化;HE染色观察小鼠肝脏组织的病理学变化;real-time PCR检测小鼠肝脏组织中凋亡相关分子Bax和P53的表达;流式细胞术检测小鼠肝脏组织中CFSE标记的CD4^+ T细胞活化相关膜分子CD62L表达水平以及细胞因子白细胞介素4(IL-4)和干扰素γ(IFN-γ)的表达变化。结果:与对照组相比,过继转输miR-7KD小鼠CD4^+ CD62L^+ T细胞组(miR-7KD转输组)小鼠的肝脏重量明显减轻(P<0.01),但重量指数显著增加(P<0.05);HE染色显示miR-7KD转输组的肝脏细胞损伤增加;real-time PCR结果显示miR-7KD转输组肝脏组织中凋亡相关细胞分子Bax和P53的相对表达水平均明显升高(P<0.05);流式细胞术检测结果进一步显示肝脏组织中的CFSE^+细胞活化相关分子CD62L的表达水平明显降低(P<0.01),细胞因子IFN-γ的表达水平明显增加(P<0.05),而IL-4的表达水平显著降低(P<0.01)。结论:过继转输miR-7敲减CD4^+ T细胞可显著加重急性肝损伤模型小鼠的肝组织损伤。这为后续深入探讨急性肝损伤的发生机制提供了重要的实验基础。 | 岳东旭 赵娟娟 陈慧子 丁涛 胡琳 潘飞飞 郭萌萌 陈超 徐林 | 2018 | 中国病理生理杂志2018，34，9： | 2 |
| 3 | 尾静脉注射miR-214抑制剂对小鼠急性肺损伤的预防作用显示文摘目的观察尾静脉注射微小RNA(miR)-214抑制剂对小鼠急性肺损伤(ALI)的预防作用,并探讨其可能作用机制。方法健康雄性C57BL/6小鼠30只随机分为3组对照组、模型组、干预组,每组10只。模型组、干预组小鼠通过气道向其肺内注入脂多糖建立ALI小鼠模型,对照组小鼠切开颈部皮肤分离暴露气管后,行气管穿刺向支气管内缓慢滴注等量生理盐水。干预组小鼠制备ALI模型前3 d开始予尾静脉注射miR-214抑制剂antagomiR-214(80 mg/kg),1次/d,连续注射3 d;模型组和对照组予尾静脉注射等量生理盐水。培养24 h处死三组小鼠,留取肺组织和支气管肺泡灌洗液(BALF),二喹啉甲酸(BCA)蛋白测定法和细胞计数器板分别统计BALF中蛋白含量和细胞总数;利用肺湿质量/干质量(W/D)比值和苏木精-伊红染色评价肺组织损伤的程度;ELISA检测BALF和肺组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β和IL-6的含量;实时荧光定量PCR法检测肺组织miR-214;Western blotting测定肺组织10号染色体上缺失的磷酸酶与张力蛋白同源物(PTEN)蛋白。结果与对照组比较,模型组BALF蛋白含量和细胞总数、肺损伤病理评分、W/D比值、肺组织miR-214相对表达量、肺组织和BALF中的TNF-α、IL-1β和IL-6含量均升高,肺组织PTEN蛋白相对表达量降低(P均<0.05)。与模型组比较,干预组BALF蛋白含量和细胞总数、肺损伤病理评分、W/D比值、肺组织miR-214相对表达量、肺组织和BALF中的TNF-α、IL-1β和IL-6含量均降低,肺组织PTEN蛋白相对表达量升高(P均<0.05)。结论下调miR-214表达可预防小鼠ALI,其机制可能与其促进PTEN蛋白的相对表达量有关。 | 李立 郭星云 石秀霞 | 2018 | 山东医药2018，58，31： | 1 |
| 4 | 微小RNA-7敲减对ConA诱导的小鼠急性肝损伤的影响显示文摘目的:研究微小RNA-7(miR-7)敲减(KD)对急性肝损伤(ALI)模型小鼠的影响。方法:野生型(WT)小鼠和miR-7KD小鼠腹腔注射30 mg/kg刀豆蛋白(ConA)建立急性肝损伤模型;48 h后,观察小鼠肝脏的形态、重量及其脏器指数变化;HE染色观察小鼠肝脏组织病理学变化;血清学方法检查血清中谷丙转氨酶(ALT)的水平;ELISA法检测血清中细胞因子IL-4和IFN-γ的水平;流式细胞术检测肝脏组织中CD4^+T细胞的比例及其相关的细胞因子IL-4和IFN-γ的表达变化。结果:与对照组相比,miR-7敲减后急性肝损伤小鼠的肝脏组织颜色变浅,重量减轻,重量指数明显增加(P<0.05);HE染色显示miR-7KD小鼠血清炎症细胞浸润显著增多;血清学方法检测发现急性肝损伤小鼠血清ALT的水平明显上升(P<0.05);ELISA法检测显示miR-7KD小鼠血清中IFN-γ水平明显升高(P<0.01),而IL-4的表达水平则明显降低(P<0.01);流式细胞术检测结果显示,miR-7KD小鼠肝脏中CD4+T细胞比例显著升高(P<0.01),其相关的细胞因子IFN-γ的表达水平也显著上调(P<0.01),而IL-4的水平没有发生明显变化。结论:敲减miR-7基因可明显促进ConA诱导的小鼠急性肝损伤。 | 岳东旭 赵娟娟 张忆雄 丁涛 陈慧子 徐林 | 2017 | 中国病理生理杂志2017，33，9： | 1 |
| 5 | 反义寡核苷酸下调miRNA-21表达对人结肠癌模型体内生长的作用显示文摘目的探讨反义寡核苷酸(ASOs)下调微小RNA-21(miR-21)表达的效果及其对人结肠癌细胞系HCT116裸鼠皮下种植瘤生长的影响。方法常规建立人HCT116结肠癌裸鼠肿瘤模型,肿瘤局部分别注射p-miR-21-ASOs质粒和p-Cont质粒(100微克/只),并观察肿瘤生长变化。HE染色法观察肿瘤组织形态学变化;免疫组织荧光法检测Ki-67蛋白的表达;实时荧光定量PCR法检测miR-21成熟体及周期蛋白依赖性激酶(CDK)2、CDK3、CDK4及CDK6的表达;Westernblot法检测总Akt、ERK1/2、p-Akt、p-ERK1/2蛋白的表达水平。结果与p-Cont组相比,p-miR-21-ASOs组肿瘤生长显著受到抑制(P<0.05);肿瘤细胞大面积坏死、Ki-67表达显著减少(P=0.0074);miR-21和CDK2、CDK3、CDK4及CDK6的表达均显著下调(均P<0.05);肿瘤组织中p-Akt和p-ERK1/2蛋白表达下调(P<0.05)。结论ASOs下调miR-21表达可以显著抑制人结肠癌细胞的体内生长。 | 刘士明 崔盼盼 丁涛 陈超 郭萌萌 徐林 | 2019 | 肿瘤防治研究2019，46，6： | 1 |
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