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1定向进化转录调节基因提高漆酶异源表达显示文摘为提高Tremetes viscolor漆酶Lcc的表达量,本研究主要针对漆酶转录调节区域进行定向进化。利用易错PCR,选择不同浓度的Mn2+对调节区域进行突变,并以酿酒酵母为宿主细胞进行异源表达,构建S. c/pYES2-Lcc调节子突变库。选用2,2-联氮基双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二胺盐(ABTS)为底物的96孔板测定漆酶酶活高通量筛选方法对突变库中960株突变体进行筛选,并对酶活高的突变体进行摇瓶复筛,最终获得三株遗传稳定性良好的酶活较高地突变体M1、M2、M3,其粗酶液酶活分别是野生型菌株粗酶液酶活的1. 73倍、1. 46倍、1. 37倍,突变菌株M1粗酶液酶活最高可达35. 4 U/L。李燕 杨建花 李宝库 朱蕾蕾 2020山东化工2020,49,9:1
2酿酒酵母合成木栓酮及其衍生物的研究现状及展望显示文摘木栓酮及其衍生物在植物中普遍存在且种类繁多,具有丰富的生理药理学活性。木栓酮衍生物是以木栓酮为骨架经细胞色素氧化酶P450(cytochrome P450,CYP450)及UDP葡萄糖醛酸转移酶(UDP-glucuronosyltransferase,UGT)修饰而来。植物中天然木栓酮及其衍生物的含量极低,传统的萃取分离和化学合成效率低、能耗高且污染环境,因此,利用酿酒酵母作为宿主菌生产木栓酮及其衍生物是一种高效且环保的策略。本文从增加前体含量、提高酶活性和产物合成的亚细胞定位等方面介绍并展望了木栓酮在酿酒酵母中高效生产的策略,并介绍了目前几种常见的木栓酮衍生物研究现状,从根据碳骨架相似性挖掘CYP450、蛋白质工程改造CYP450和合成代谢基因簇的挖掘等方面展望了木栓酮衍生物的合成途径解析的新思路。张凯月 邹旭 张晨烁 王洋 余源 2023微生物学通报2023,50,9:0
3工程酵母INVSC1与H1246的生长与目标化合物积累的比较显示文摘为了筛选出有价值的工程酵母菌株以应用于构建真核生物模型和研究相关目的基因的功能等,以工程酵母INVSC1与H1246为试验材料,在适宜的条件下培养并测定其菌液浓度,经尼罗红染色观察、中性油脂的检测、目标化合物的提取与分析以及薄层色谱分析一系列试验来研究正常型酵母和缺陷型酵母油脂代谢机制。结果表明,在相同的生长条件下,工程酵母INVSC1比H1246生长快,先进入对数生长期和稳定期;正常酵母INVSC1油脂代谢途径正常,可以正常合成积累三脂酰甘油(TAG),而缺陷酵母H1246丧失合成TAG的能力;INVSC1的脂肪酸含量是H1246的2倍,其脂肪酸成分有3种,而H1246有2种。研究结果可为后期油脂代谢相关基因功能验证等分子生物学试验提供可靠的研究材料。李宏 刘萌萌 唐中伟 李友莲 2020山西农业科学2020,48,9:0
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