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| 1 | 新疆野苹果果实总RNA提取方法的筛选显示文摘由于新疆野苹果(Malus sieversii)果实富含多糖、多酚、可溶性果胶及其他次生代谢物质,导致果实的总RNA提取相对比较困难,质量较差。因此,本试验以不同发育时期的新疆野苹果的果实为材料,采用Ta KaRa试剂盒、全氏金试剂盒、田伟等改良的CTAB法、本试验改良的CTAB法(一)和CTAB法(二)这5种方法来摸索提取野苹果果实的总RNA的有效方法。结果表明:2种试剂盒均无法从野苹果果实中提取出RNA;通过3种改良CTAB法提取的RNA,在琼脂糖凝胶上得到清晰的28S和18S条带,并且纯度均较高,OD_(260)/OD_(230)值在1. 8~2. 2之间、OD_(260)/OD_(230)值大于2. 0。但是只有本试验改良CTAB法(一)获得较高的RNA产量,从5个不同发育时期的野苹果果实中提取的RNA平均值在116. 79~474. 76μg·g^(-1)。改良CTAB法(一)通过延长Li Cl沉淀时间,将-20℃放置15 min改为4℃放置过夜(时间不超过16 h),可以有效地除去RNA中的杂质污染,使得RNA充分沉淀。这种改良方法耗时相对较长,需要2 d,但是方法易于操作且提取成本较低。因此,改良CTAB法(一)是适用于提取野苹果果实(尤其是发育晚期)总RNA的有效方法,完全可以满足后期的分子生物学试验所需。 | 夏春兰 闻志彬 张玉芳 | 2019 | 干旱区研究2019，36，2： | 5 |
| 2 | 拮抗酵母挥发性单体桂皮醛对草莓采后灰霉病的防治显示文摘为了解葡萄汁有孢汉逊酵母(Hanseniaspora uvarum)挥发性有机物防治草莓果实采后病害的可能机理,研究了拮抗酵母挥发性单体桂皮醛对草莓灰霉病的抑制作用,结果显示62.5μL/L的桂皮醛熏蒸处理3 d对草莓灰霉病防治效果最好,能显著抑制草莓果实的病斑扩展(P<0.05)。不同剂量的桂皮醛都可以有效保持草莓颜色、可溶性固形物质量分数和可滴定酸质量分数,延缓品质的下降。以62.5μL/L桂皮醛熏蒸草莓不同时间,发现与对照组相比,桂皮醛处理总体上能明显提高草莓中过氧化氢酶、多酚氧化酶、抗坏血酸过氧化物酶和β-1,3-葡聚糖酶活力和FaCAT、FaPPO、FaAPX基因相对表达量,抑制超氧化物歧化酶活力下降,62.5μL/L桂皮醛处理组草莓在熏蒸过程中苯丙氨酸解氨酶活力先升高后下降,而FaPAL基因表达水平在熏蒸过程中逐渐下降,FaGLU基因表达在后期有上升趋势。这些结果表明,与对照组相比,桂皮醛熏蒸处理能够诱导相关抗性基因表达和酶活力升高,维持草莓品质,有效抑制草莓采后灰霉病的发生。 | 郭虹娜 刘佳 奚裕婷 周姣 姜毅 汪江琦 张艳芬 肖红梅 | 2020 | 食品科学2020，41，13： | 5 |
| 3 | 利用小RNA深度测序快速鉴定草莓病毒显示文摘病毒侵染直接影响草莓的生长发育及果实品质,快速检测及鉴定病毒是病毒防治的前提。本研究以‘丰香’草莓和‘哈尼’草莓为试材,利用小RNA(sRNA)测序结合RT-PCR技术对2种栽培草莓品种中存在的病毒进行了研究。对sRNA测序结果进行组装和注释,结果表明:在混合样品中共有242个contigs比对到5种草莓病毒,分别为草莓白化病毒(strawberry pallidosis associated virus,SPaV)、草莓镶脉病毒(strawberry vein banding virus,SVBV)、草莓斑驳病毒(strawberry mottle virus,SMoV)、草莓毛形病毒3(strawberry crinivirus 3,SCrV 3)和草莓毛形病毒4(strawberry crinivirus 4,SCrV 4)。利用RT-PCR技术对sRNA测序结果进行验证,结果表明:SMoV、SVBV和SCrV 3在‘丰香’草莓和‘哈尼’草莓中均检测到,而SPaV和SCrV 4只在‘哈尼’草莓样品中检测到。本研究利用sRNA测序技术鉴定了2个草莓品种中存在的病毒,首次在我国生产的同一个草莓品种中检测到5种病毒,为草莓病毒的检测和防控提供了新的思路。 | 何成勇 高德航 范灵姣 邢飞 李世访 王红清 | 2021 | 中国农业大学学报2021，26，8： | 5 |
| 4 | 草莓FaMYB5基因原核表达的响应面优化显示文摘利用中心组合设计(CCD)探究p ET-32a(+)-Fa MYB5融合蛋白原核表达的最优条件。以不同的诱导温度、诱导时间、菌液初始浓度和异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)终浓度为4个考察因素,以可溶性蛋白含量为考察指标,在大肠杆菌中表达p ET-32a(+)-Fa MYB5融合蛋白,采用玻璃珠法破菌,提取蛋白质后通过SDS-PAGE凝胶电泳鉴定表达产物。经响应面优化后,在37℃培养工程菌至菌液OD600=0.74后,加入异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)至终浓度为0.40 mmol/L,在25.51℃条件下诱导培养8 h,可获得最高产量的可溶性目的蛋白,为128μg/m L。最优表达条件的获得,为后期纯化该可溶性蛋白和鉴定Fa MYB5蛋白与顺势作用元件的作用情况提供了一定的理论依据。 | 何佳鲜 江雷雨 洪敏 冯琛 刘勋菊 陈清 张勇 罗娅 王小蓉 汤浩茹 | 2017 | 基因组学与应用生物学2017，36，1： | 5 |
| 5 | β-巯基乙醇对不同时期芒果剪口芽总RNA质量的影响显示文摘芒果剪口芽中富含多酚,由于多酚易被氧化,且难以与核酸分离,导致总RNA提取困难。为提取适于芒果实时荧光定量PCR分析的高质量RNA,通过在华越洋超快新型植物RNA提取试剂盒的细胞裂解液中加入适量的β-巯基乙醇,研究β-巯基乙醇对芒果剪口芽总RNA提取质量的影响。试验结果表明,在细胞裂解液中加入300μLβ-巯基乙醇,可以排除多酚、色素等杂质的干扰,获得条带完整、质量较好的总RNA样品。RT-PCR实验结果进一步表明,此方法提取的RNA完全适于后续分子生物学试验研究。 | 殷德松 宋静武 齐贝贝 陈莹莹 周玲 赵凯 彭磊 | 2017 | 中国农学通报2017，33，10： | 1 |
| 6 | 质体3-磷酸甘油醛脱氢酶基因GAPCp1过表达对草莓果实成熟与代谢产物的影响显示文摘【目的】分析探讨质体3-磷酸甘油醛脱氢酶基因(plastid glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPCp1)对草莓果实成熟及其代谢产物的影响。【方法】以‘红颜’草莓果实为材料,通过分子克隆获得FaGAPCp1基因全长序列,随后进行过表达载体构建、瞬时侵染草莓果实,并对其进行代谢组学分析。【结果】与对照组相比,过表达FaGAPCp1抑制草莓果实成熟的同时显著下调了部分氨基酸及其衍生物、花青素、有机酸及其衍生物、黄酮类物质的含量,同时显著上调了原花青素与维生素中核黄素的含量。【结论】GAPCp1通过影响草莓果实的代谢进程抑制草莓果实的成熟。 | 张昕 杨敏 龙宇 葛聪 侯国艳 罗娅 | 2020 | 果树学报2020，37，10： | 0 |
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