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| 1 | 转化生长因子-β1 siRNA神经干细胞后期移植对大鼠脊髓损伤修复的影响显示文摘目的:探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)siRNA鼠神经干细胞(NSCs)后期移植对大鼠脊髓损伤修复的影响。方法:TGF-β1 siRNA质粒病毒转染至NSCs,转染时分对照组、转染对照组、转染组共3组,Western blot检测NSCs被转染后TGF-β1蛋白的表达。选取成年雌性SD大鼠78只,建立大鼠急性脊髓损伤模型,随机分为对照组,NSCs移植组及TGF-β1-siRNA组。通过BBB评分、斜板试验、改良的Tarlov评分进行运动功能评定。造摸后1周通过RT-PCR、Western blot检测脊髓损伤区周围突触素及TGF-β1基因转录和蛋白的表达。造模后4周,HE染色及荧光显微镜观测CMDil标记的NSCs存活及分布情况,HRP逆行示踪评估神经纤维再生情况,透射电镜观察各组脊髓损伤区超微结构改变。结果:Western blot检测显示TGF-β1低表达可持续14 d。造模后1周起,大鼠下肢运动功能评价TGF-β1-siRNA组优于NSCs移植组,NSCs移植组优于对照组。HE染色NSCs移植组损伤区脊髓空洞较小,TGF-β1-siRNA组脊髓空洞几乎消失,对照组可见脊髓组织缺失及脊髓空洞形成。TGF-β1-siRNA组TGF-β1 mRNA表达为5.33±0.24,较对照组(10.47±0.54)和NSCs移植组(8.06±0.36)显著降低(P <0.05),突触素的表达为11.36±0.28,明显高于NSCs移植组(8.27±0.33)及对照组(5.04±0.30);移植后4周,对照组HRP阳性神经纤维数(48.66±8.94个/高倍视野)和CM-Dil阳性细胞(0±0.00个/高倍视野)最少,TGF-β1-siRNA组最多,分别为(162.46±16.65个/高倍视野)、(38.68±4.89个/高倍视野),NSCs移植组次之,分别为(85.86±11.24个/高倍视野)、(22.38±3.45个/高倍视野)。在透射电镜观察下,TGF-β1-siRNA组大鼠脊髓组织损伤区可见大量有髓神经纤维及无髓神经纤维,轴突数量较多,再生轴突髓鞘完整;NSCs移植组可见较多有髓神经纤维及无髓神经纤维;对照组损伤区可见胶质瘢痕和少量有髓神经纤维,坏死的有髓神经纤维。结论:TGF-β1siRNA神经干细胞能有效降低脊髓损伤区TGF-β1表达,促进突触素表达,可促进脊髓损伤大鼠神经突触的再生,改善大鼠肢体运动功能。 | 杨利丽 李秋菊 徐长妍 王春玲 张妍 | 2018 | 中国中西医结合外科杂志2018，24，5： | 4 |
| 2 | 内源性神经干细胞在脊髓损伤修复的研究进展显示文摘内源性神经干细胞(endogenous neural stem cells, ENSCs)在脊髓损伤(spinal cord injury, SCI)后可以分化为星形胶质细胞、神经元和少突胶质细胞等,对神经再生具有重要作用。研究诱导其分化为特定的神经细胞的方法是内源性治疗的关键。近年来,越来越多的ENSCs诱导方法被开发运用,促进了新生神经元和少突胶质细胞的生成,并减少了胶质瘢痕对修复的阻碍作用。本文就近期ENSCs在SCI修复方面的研究进展进行综述。 | 张浩 肖世宁 张钰 刘家明 | 2022 | 中国矫形外科杂志2022，30，24： | 2 |
| 3 | 舒芬太尼对神经干细胞移植治疗脊髓损伤的影响显示文摘背景:有研究显示舒芬太尼联合神经干细胞移植联合治疗可以提高新生的神经纤维数量。目的:观察舒芬太尼干预对神经干细胞移植治疗脊髓损伤大鼠后肢功能恢复的影响。方法:(1)将100只成年雌性SD大鼠随机分为5组:正常对照组、模型组、舒芬太尼组、神经干细胞移植组和舒芬太尼+神经干细胞移植联合治疗组,每组20只。正常对照组大鼠不实施任何干预,其他4组参照改良的Allen’s重物打击法建立大鼠脊髓损伤模型;(2)造模6 h后,联合治疗组大鼠蛛网膜下腔注射10μL细胞浓度为1×10^(10) L^(-1)的神经干细胞悬液,腹腔注射100μL舒芬太尼(150μg/kg);神经干细胞移植组大鼠蛛网膜下腔注射10μL细胞浓度为1×10^(10) L^(-1)的神经干细胞悬液,腹腔注射100μL生理盐水;舒芬太尼组蛛网膜下腔注射10μL的神经干细胞培养液,腹腔注射100μL舒芬太尼(150μg/kg);模型组大鼠蛛网膜下腔和腹腔各注射10μL神经干细胞培养液和100μL生理盐水;(3)造模后72 h,RT-PCR检测脊髓损伤区周围AQP4、MMP9 mRNA的表达,TUNEL法检测细胞凋亡情况;(4)造模后第1,3天和第1,2,3,4周通过BBB评分、斜板实验进行运动功能评定;(5)造模后4周取材行苏木精-伊红染色,荧光显微镜观测CM-Dil标记的神经干细胞存活情况,荧光金逆行追踪观察脊髓神经纤维的再生与分布情况。结果与结论:(1)造模后72 h,与模型组、舒芬太尼组、神经干细胞移植组比较,联合治疗组脊髓损伤区AQP4、MMP9 mRNA表达和细胞凋亡率显著降低(P<0.05);(2)造模2周后,联合治疗组运动功能评分优于舒芬太尼组和神经干细胞移植组(P<0.05),舒芬太尼组和神经干细胞移植组优于模型组(P<0.05);(3)造模后4周,模型组可见脊髓空洞形成,舒芬太尼组和神经干细胞移植组损伤区脊髓空洞较小,联合治疗组脊髓空洞几乎消失;(4)联合治疗组CM-Dil阳性细胞最多,神经干细胞移植组较多,舒芬太尼组和模型组未见阳性细胞;(5)联合治疗组荧光金阳性神经纤维数最多,舒芬太尼组和神经干细胞移植组次之,模型组最少;(6)结果表明,舒芬太尼通过促进移植神经干细胞的增殖,减少大鼠脊髓损伤区AQP4、MMP9表达和局部神经细胞凋亡,进而改善后肢运动功能。 | 燕厚永 宋冷梅 刘越 姚光 张如意 | 2017 | 中国组织工程研究2017，21，25： | 1 |
| 4 | 成年大鼠脑膜组织中具有干细胞特性的细胞亚群体外可向神经元诱导分化显示文摘背景:神经干细胞具有多向分化潜能,可以分化为神经元和神经胶质细胞等,替代受损伤的脑细胞,达到修复神经损伤的目的。目的:观察成年大鼠脑膜组织中具有干细胞特性细胞亚群的成神经诱导分化能力。方法:取成年SD大鼠,麻醉后获取脑膜组织制备成细胞悬液,接种在培养皿中进行传代培养,进行Nestin免疫荧光染色。取第3代细胞,用含曲古抑菌素A的完全培养基进行成神经诱导培养,诱导7 d之后采用Westen blotting检测神经细胞相关标志性蛋白NF-200和BM88蛋白的表达。结果与结论:培养24 h,脑膜细胞中有部分球形细胞发生悬浮,部分细胞出现贴壁生长现象。另外,还可以观察到部分散在球形细胞逐渐形成克隆球,随着体积的不断增大,生长速度呈现下降趋势。免疫细胞化学染色分析干细胞标记物Nestin呈强阳性表达,细胞核使用Hoechst染色之后,荧光显微镜可检测到呈蓝色的细胞核。成神经诱导7 d时相关标志性蛋白NF-200和BM88蛋白均呈明显表达。结果表明,成年SD大鼠脑膜组织中具有干细胞特性的细胞亚群在体外诱导后能够向神经元方向发生分化。 | 刘德 李向明 谷席娟 | 2015 | 中国组织工程研究2015，19，50： | 0 |
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