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| 1 | 表达丙型肝炎病毒多个融合抗原的复制型DNA 疫苗在小鼠体内免疫原性的研究显示文摘目的:探索新型的基于丙型肝炎病毒( HCV)多个靶抗原的复制型DNA疫苗的免疫效果。方法本研究构建了两种表达基于HCV中国1b代表株(河北株)多个靶抗原的复制型DNA疫苗:pSCK-CE1E2Y(核心蛋白Core、包膜蛋白E1、E2抗原)和pSCK-H155(Core、E1、E2、非结构蛋白NS3融合抗原),蛋白印迹试验分析靶抗原表达,皮内电转法免疫BALB/c小鼠后评价其免疫应答,采用表达异型( JFH1,2 a型) HCV多聚蛋白的重组痘苗病毒接种的小鼠攻击替代模型进行保护效果分析。结果蛋白印迹试验表明DNA疫苗中靶抗原体外可有效表达;两种DNA疫苗均可诱导多抗原特异的抗体反应及T细胞免疫应答;未检测到明显的交叉免疫保护。结论两种复制型DNA疫苗均可诱导针对多抗原的体液及细胞免疫应答,但不能诱导有效的交叉保护。本研究为HCV新型疫苗研制提供了一定参考。 | 邓瑶 管洁 殷霄 文波 陈红 王文 谭文杰 | 2015 | 中华微生物学和免疫学杂志2015，35，3： | 3 |
| 2 | 多表位丙型肝炎病毒抗原的表达和分析显示文摘目的目前常用的丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)血清学检测试剂都基于3~6个重组蛋白或合成多肽,抗原制备繁琐且诊断效果参差不齐。制备一种诊断效能优良的HCV抗原势在必行。方法利用原核表达系统和层析纯化技术制备涵盖我国HCV主要流行株(1b和2a)的6个免疫显性区域的多表位HCV抗原(命名为H65),并以此建立HCV-IgG的血清学检测方法,通过对部分HCV阴阳性血清的检测,初步评价了H65抗原的免疫活性。结果融合Trx标签的H65抗原为可溶性形式表达,纯化后蛋白浓度可达2.991mg/ml,纯度为94.53%;Western blot法检测实验初步证实了蛋白H65的抗原性;应用某商品化试剂盒与H65抗原血清检测方法,对50份HCV阴阳性血清进行检测,McNemer检验显示,新制备诊断抗原与“金标准”比较,P>0.05,Kappa>0.75,且与某商品化试剂盒比较,P>0.05,Kappa>0.75,提示一致性优异。结论H65具有良好的免疫活性,为进一步应用多表位HCV抗原为基础的HCV-IgG体外诊断试剂提供了依据。 | 苏秋东 郭敏卓 伊瑶 毕胜利 贾志远 邱丰 | 2020 | 医学研究杂志2020，49，6： | 2 |
| 3 | 基于丙型肝炎病毒结构基因的DNA疫苗初免重组腺病毒疫苗加强免疫小鼠后可诱导交叉保护显示文摘目的 探索基于HCV多个靶抗原的新型T细胞疫苗研发策略.方法 用表达HCV河北株(1b亚型)结构蛋白(Core,E1,E2)的DNA疫苗与重组腺病毒载体疫苗联合免疫小鼠,并采用ELISPOT与胞内细胞因子染色分析(ICS)方法分析了特异性T细胞免疫应答特点与交叉保护效果.结果 DNA疫苗与重组腺病毒疫苗联合免疫小鼠后,针对Core、E1、E2都可产生较强细胞免疫应答;ELISPOT结果表明:联合免疫针对E1的反应最强,明显高于DNA疫苗同源免疫;ICS结果显示:针对E1抗原特异的CD4+T细胞分泌的TNF-α水平与CD8+T细胞分泌的IFN-γ水平以及E2抗原特异的CD4+T细胞与CD8+T细胞分泌的IFN-γ水平均高于三针DNA疫苗免疫组.在表达2a亚型HCV(JFH1)全长ORF的重组痘苗病毒替代攻击小鼠模型中,复制型DNA疫苗与重组腺病毒联合免疫可表现出交叉保护效应.结论 本研究为HCV新型疫苗研制及免疫保护机制研究提供了一定参考. | 邓瑶 管洁 殷霄 蓝佳明 陈红 王文 谭文杰 | 2016 | 中华微生物学和免疫学杂志2016，36，3： | 1 |
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