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1钾素对马铃薯钾转运体KUP6和KUP7基因表达量的调节显示文摘为了研究不同钾素浓度对钾转运体KUP6和KUP7基因表达量的影响,通过水培法培养马铃薯幼苗,通过提取马铃薯总RNA,经检测合格后用反转录试剂盒合成其c DNA的第一链。运用实时荧光定量核酸扩增检测技术对幼苗叶片进行基因转录水平的检测。在马铃薯幼苗种植后的第10,20,30天分别测定马铃薯幼苗根、茎和叶中钾的含量,并进行统计分析。结果表明:钾素浓度为1.00 mmol/L时,KUP6和KUP7基因表达量最高,且与其他处理有显著差异;钾素浓度低于0.10 mmol/L时,表达量较低,钾素浓度为10.00 mmol/L时该基因表达量也降低。表明较高和较低的钾离子浓度都不利于KUP6和KUP7基因的表达。通过对根、茎和叶内钾素含量测定表明:对于根系来说,钾素浓度在1.0 mmol/L时已到达其吸收饱和值;在钾素浓度为1.00,10.00 mmol/L的高钾水培中,马铃薯根、茎和叶钾素含量大于水培钾素浓度为0.01,0.10 mmol/L的低钾处理;在低钾水培条件下,茎叶随着培养时间的延长,其钾素含量之间的差异逐渐减小,而在高钾条件下,其差异逐渐增大。张子义 赵阳 梁红胜 樊明寿 2018华北农学报2018,33,2:6
2盐穗木钾转运蛋白基因HcKUP12的克隆及在盐胁迫下的表达分析显示文摘利用RACE技术从盐生植物盐穗木(Halostachys caspica)中克隆获得了一个钾离子转运体基因,经BLAST同源比对发现该基因与拟南芥钾离子转运蛋白At KUP12基因最为相似,命名为Hc KUP12。Hc KUP12基因c DNA全长为2953 bp,含有2544 bp的阅读框、262 bp的5'-UTR和147 bp的3'-UTR,编码847个氨基酸,分子质量为93.31 k D,理论等电点为7.19。利用实时荧光定量RT-PCR分析了Hc KUP12基因在600 mmol/L Na Cl处理下胁迫24 h的表达模式,结果显示该基因在盐胁迫下表达量显著增加,至处理24 h时达到最高(为对照的225倍),初步推测其可能是与盐穗木耐盐相关的一个候选基因。杨中敏 王艳 2015植物科学学报2015,33,4:5
3超量表达NtHAK1基因提高烟草干旱胁迫能力显示文摘高亲和钾离子通道蛋白(high-affinity potassium transporter protein,HAK)在植物干旱胁迫过程中起重要调控作用。本研究以超量表达NtHAK1基因烟草(Nicotiana tabacum)T4代种子为材料,分析干旱胁迫后种子发芽相关生理指标以及烟草抗性相关指标。结果表明,干旱处理后,转基因烟草种子的平均发芽势、发芽率和发芽指数均高于野生型烟草种子。随干旱处理时间的延长,野生型烟草3 d即出现叶片萎蔫并停止生长,而转基因烟草到10 d出现叶片萎蔫现象,野生型烟草叶片相对含水量降幅更大。同时,干旱胁迫3 d时,转基因烟草植株体内MDA积累量显著低于野生型(P<0.05)。转基因和野生型烟草植株脯氨酸含量、SOD活性和CAT活性均呈上升趋势,但转基因烟草植株的涨幅高于野生型,差异达到显著水平(P<0.05)。干旱胁迫引起转基因烟草植株钾吸收相关基因VAG1和HAK1表达上调。干旱胁迫3 d时,超量表达NtHAK1基因极显著提高了植株钾含量。综上所述,超量表达NtHAK1基因增强了烟草在干旱逆境中的耐受力。本研究为后续培育耐旱烟草新种质和进一步研究超量表达NtHAK1烟草对干旱胁迫耐受机制提供参考。张祎 秦利军 赵丹 赵德刚 2017植物生理学报2017,53,8:5
4葡萄HAK基因家族的鉴定与表达分析显示文摘从葡萄基因组数据库中检索到18个HAK基因家族成员,对其在生物信息学及非生物胁迫下的表达水平进行分析。结果表明:葡萄HAKs编码CDS序列长度为2000~2500bp,外显子数从7个到12个不等。二级结构主要以α-螺旋和不规则卷曲为主,至少含9个跨膜区域,亚细胞定位表明该家族主要在细胞质膜上。葡萄HAK基因分为7个亚族且整个家族与拟南芥HAK家族成员的同源性很高。基因芯片表达谱分析表明,葡萄HAK基因家族能够响应高温、低温、盐、干旱和水分等非生物胁迫,不同成员的表达水平存在一定的差异。荧光定量分析表明,VvHAK01、VvHAK04、VvHAK06和VvHAK13质量分数为10%PEG处理6h后表达量显著上升;VvHAK02、VvHAK07、VvHAK09、VvHAK10、VvHAK12、VvHAK13、VvHAK15、VvHAK16、VvHAK17、VvHAK18在50μmol·L^-1ABA处理6h后表达量显著上升;VvHAK07、VvHAK09、VvHAK11在400mmol·L^-1NaCl处理6h后表达量显著上升;VvHAK05在50μmol·L^-1ABA、400mmol·L^-1NaCl和质量分数为10%的PEG处理6h后,叶片表达量显著下调。大多数HAK基因家族成员对ABA、NaCl和PEG无法有响应,试验为进一步解析HAK基因功能和利用HAK基因进行植物的遗传改良奠定基础。马丽娟 马钰 何红红 梁国平 万鹏 陈佰鸿 毛娟 2019西北农业学报2019,28,6:5
5拟南芥钾转运突变体atkup12鉴定及非生物胁迫的敏感性检测显示文摘[目的]鉴定获得拟南芥HAK/KUP/KT高亲和钾离子转运突变体atkup12,通过检测种萌期atkup12突变体在低钾、盐及氧化胁迫下的生长指标以初步明确拟南芥AtKUP12基因是否参与植物对非生物胁迫的响应。[方法]以拟南芥atkup12突变体基因组和总RNA反转后的cDNA为模板,通过PCR扩增确定AtKUP12基因T-DNA插入失活的纯合突变体。将野生型和atkup12突变体点种于0.5μmol/L低钾、不同NaCl浓度和1μmol/L甲基紫精的胁迫培养基,测定并比较突变体与野生型拟南芥在根长、种子萌发率及子叶绿化率间的差异。[结果]利用双引物法,结合反转录PCR,在DNA及RNA水平鉴定获得了AtKUP12基因的纯合突变体。低钾胁迫下,atkup12突变体种苗的根长比较野生型拟南芥短40%左右,较野生型受到了显著抑制;不同NaCl浓度胁迫下,atkup12突变体种子的萌发率较野生型显著降低;1μmol/L甲基紫精显著的抑制了突变体种苗的子叶绿化率。[结论]成功鉴定获得了AtKUP12基因T-DNA插入失活的纯合突变体,且AtKUP12基因的缺失会增加植物对盐、低钾及氧化等非生物胁迫的敏感性。游西龙 杨中敏 王艳 2017生物技术2017,27,5:3
6烟草NtKEA4基因的克隆、生物信息学及表达分析显示文摘K^+efflux antiporter (KEA)是一类钾离子反向转运蛋白,属于一价阳离子/质子反向转运体超家族,对植物细胞钾离子的积累和平衡具有重要作用。从烟草品种K326中利用同源克隆的方法获得一个钾离子反向转运蛋白基因,序列分析表明该基因全长1 749 bp,编码一个由582个氨基酸残基组成的酸性疏水蛋白。生物信息学分析预测该蛋白分子量为62.1 kD,理论等电点为5.50,含有11个跨膜区。同源性分析结果显示,该基因编码蛋白与美花烟草(Nicotiana sylvestris)钾离子转运体KEA4、辣椒(Capsicum baccatum)钾离子转运体KEA4等具有较高的同源性,所以将该基因命名为NtKEA4。表达模式分析表明,NtKEA4基因在组织中均有表达,但主要在烟草茎中表达,其表达受低钾、高盐、脱落酸(ABA)、低温等非生物胁迫条件的诱导。李佳皓 吕承承 罗银 鲁黎明 李立芹 2019分子植物育种2019,17,18:0
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