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| 1 | 新型表达载体 pEC34 试用于人 γ 干扰素基因的高表达显示文摘构建了一个新的双顺反子表达载体pEC34,它的第一个顺反子是已高表达的era基因的部分序列,并带有原核翻译增强子。当检测pEC34的可用性时,获得了人γ干扰素的极高表达。目的蛋白占菌体总蛋白的855%,诱导后经SDSPAGE分析,出现分子量为155kDa左右的蛋白表达带,Westernblot结果证实为人γ干扰素。无压力传代30次表达质粒仍然稳定,表明pEC34可能用作真核蛋白质高表达工程菌株的载体。 | 柴玉波 陈苏民 赵忠良 陈南春 高辉 | 1997 | 生物工程学报1997，13，4： | 9 |
| 2 | 两种大肠杆菌表达融合蛋白的纯化显示文摘 | 王飙落 陈南春 陈苏民 | 2001 | 第四军医大学学报2001，22，13： | 0 |
| 3 | rnc基因的高表达及核糖核酸酶Ⅲ的纯化显示文摘根据大肠杆菌中核糖核酸酶Ⅲ(RNaseⅢ)含量很低的原因是RNaseⅢ能作用于自身基因(rnc)转录物5'端、负反馈调控其自身合成,设计RNaseⅢ高表达的方案。去除rnc基因5'侧能转录生成可被RNaseⅢ降解的RNA结构的序列,保留整个rnc基因及其5'侧的天然翻译起始序列,将之置于λP_L启动子控制下,所构建的质粒在大肠杆菌中经诱导后高表达出RNase Ⅲ,其含量达细胞总蛋白质量的65%以上,并在菌体内形成包涵体。利用RNaseⅢ溶解度变化的特点,在低温、低盐条件中裂菌,并洗涤沉淀,在室温、高盐条件下溶解、过Q-Sepharose FF柱,获得具有良好活性、电泳纯的RNase Ⅲ,收获量为10—12mg/100ml培养液。同时还发现RNase Ⅲ具有特异性结合ATP的活性。 | 陈苏民 Court D.L. | 1992 | 生物工程学报1992，8，2： | 0 |
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