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| 1 | 鱼类的干扰素系统和干扰素系统基因的鉴定显示文摘 | 张义兵 张奇亚 桂建芳 | 2004 | 水生生物学报2004，28，3： | 23 |
| 2 | 鳜鱼(Siniperca chuatsi)β-肌动蛋白基因cDNA全序列与5′侧翼区的克隆与分析显示文摘采用RT-PCR及RACE法,分离、克隆鳜鱼β-肌动蛋白基因cDNA全序列,再用基因组步行法(Genome Walker)克隆鳜鱼β-肌动蛋白基因5′调控区。序列分析结果表明,鳜鱼β-肌动蛋白基因全长1897bp,其中5′-UTR长94bp,3′-UTR长675bp,编码区长1128bp,编码375个氨基酸。将所得序列与其它动物类群的β-肌动蛋白基因序列进行比较分析显示,鱼类、两栖类、鸟类、哺乳类等不同类群脊椎动物β-肌动蛋白氨基酸序列同源性均在96%以上,说明该基因在生物进化过程中高度保守。通过鳜鱼与其它脊椎动物β-肌动蛋白基因的核苷酸序列构建的进化树显示,脊椎动物β-肌动蛋白聚类成3个分支,鱼类β-肌动蛋白基因形成一个独立的分化群,说明鱼类β-肌动蛋白基因起源于一个共同祖先。克隆得到的鳜鱼β-肌动蛋白基因5'侧翼序列长1399bp,对其进行序列分析,在其起始密码字ATG上游200bp范围内发现含有CAATbox、CC(A/T)6GG(CArGbox)、TATA box对转录调控起重要作用的顺式元件,同时在侧翼区也发现含有GC box、MYOD、YY1、SP1、GATA等多个潜在调控元件。鳜鱼β-肌动蛋白基因5′侧翼序列的克隆成功,为今后转基因鳜鱼的研究工作奠定了基础。 | 刘秀霞 梁旭方 王琳 端金霞 李光照 廖婉琴 | 2009 | 海洋与湖沼2009，40，1： | 16 |
| 3 | 异育银鲫实验性免疫抑制模型的建立显示文摘分别以每kg体重鱼注射0、1、10、20 mg环磷酰胺的剂量、每隔5 d给异育银鲫注射1次,共注射3次,第16天检测各组试验鱼外周血白细胞数量及吞噬活性、不同类型的白细胞数量变化、脾脏和头肾的溶菌酶活性、体外培养外周血B淋巴细胞分泌的IgM、IFN-α含量、外周血NK细胞杀伤功能及头肾、脾脏、外周血B淋巴细胞转化能力。结果表明,环磷酰胺剂量的增加可以使试验鱼外周血白细胞的数量包括各种类型的白细胞的数量、体外培养外周血B淋巴细胞分泌的IgM、IFN-α含量下降,脾脏和头肾的溶菌酶活性、外周血白细胞吞噬活性及头肾、脾脏、外周血B淋巴细胞转化能力降低。提出每kg鱼10mg的环磷酰胺是建立异育银鲫实验性免疫抑制模型的适宜剂量。 | 陈勇 周洪琪 余奇文 张继英 沈佰华 柏峻 | 2005 | 水产学报2005，29，2： | 10 |
| 4 | 转Hu-IFN-α基因草鱼的分子验证及抗性研究显示文摘采用显微注射法将人α-干扰素抗病基因转移到草鱼受精卵中 ,获得转基因群体 ,通过 PCR及 Southern杂交对转基因草鱼进行分子水平的检测 ,以进一步验证外源人α-干扰素是否整合入草鱼基因组 .结果表明 ,外源人α-干扰素抗病基因已整合入草鱼基因组中 .采用腹腔注射法 ,对转基因鱼进行草鱼出血病病毒接种攻毒试验 。 | 苏建明 章怀云 张学文 肖调义 陈韬 陈立祥 陈开健 | 2003 | 湖南农业大学学报(自然科学版)2003，29，5： | 9 |
| 5 | 大菱鲆组成型热休克蛋白70的全长cDNA克隆及表达分析显示文摘根据感染哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)的大菱鲆(Scophthalmus maximus)的差减cDNA文库中hsp70EST序列设计引物,用RACE方法首次克隆到长2188bp的大菱鲆HSC70(Heat-shock cognate protein 70)全长cDNA序列,包括1956bp的开放阅读框及5′和3′非翻译区。在预测的651个氨基酸序列中发现了Dnak特征性基序,胞质HSP70特征基序以及四肽简并重复序列。与其他真核生物HSP70家族成员进行同源性比较,发现大菱鲆HSC70与牙鲆(Paralichthys olivaceus)HSC71、虹鳟(Oncorhynchus mykiss)HSC71、人(Homo sapiens)HSC70、家鼠(Mus musculus)HSC70、烟草天蛾(Manduca sexta)HSC70的氨基酸相似性分别是97%,95%,94%,93%,86%,表现出较高的保守性。表达分析显示,hsc70mRNA在大菱鲆正常肝脏、鳃、肠、脾脏、头肾、肾等组织中以不同的水平存在,呈组成型表达;被哈维氏弧菌感染后,大菱鲆肝脏和脾脏组织hsc70mRNA表达水平分别在24h和12h出现上调(2.5-fold和1.6-fold);注射生理盐水组与未注射组之间差异不显著。 | 贾爱荣 王传娟 张晓华 | 2010 | 水生生物学报2010，34，3： | 9 |
| 6 | 壳聚糖和益生菌对免疫抑制性异育银鲫正向调节作用的研究显示文摘本研究旨在应用环磷酰胺诱导建立的免疫抑制性异育银鲫的实验模型,以研究壳聚糖和益生菌壳聚糖和益生菌对异育银鲫免疫功能的影响。实验分别设立基础饲料、生理盐水为对照,基础饲料、环磷酰胺为阴性对照组,实验饲料加注环磷酰胺为实验组。饲养异育银鲫(体重123.2±4.8)g 30 d,在实验的第15天按10 mg/kg.bw的剂量给实验组和阴性对照组的每尾鱼注射环磷酰胺液,空白对照组每尾鱼注射等量生理盐水,每隔5 d注射1次,共注射3次。第3次注射后的第6天,分别取各组鱼的外周血和头肾为实验标本材料。以瑞氏染色计数和分析外周血白细胞数量及分类,白细胞吞噬白色葡萄球菌的活性。应用硝酸还原酶法测定NO含量,比浊法测定头肾溶菌酶活力。采用IFN-αELISA试剂盒和ABC-HRP方法测定IFN-α、ELISA法测定IgM含量。采用靶细胞乳酸脱氢酶释放法测定外周血NK细胞杀伤活性以及采用3H-TdR掺入法测定外周血淋巴细胞转化能力。实验结果表明:阴性对照组各项免疫指标均显著低于空白对照组;添加的壳聚糖和益生菌能够不同程度地恢复免疫抑制实验组的大多数免疫指标。三种壳聚糖的免疫调节能力各不相同,分子量居中的壳聚糖A的调节能力较强;分子量较大的壳聚糖B的调节能力较弱;壳聚糖C的调节能力并没有随添加量的增加而提高。因此,本研究的初步结论为:壳聚糖的免疫调节能力受分子量的影响较大,并不与添加量成正比,而适量的壳聚糖或益生菌能够不同程度地消除鱼类的免疫抑制,具有使其拓展成为鱼类免疫功能调节剂的前景。 | 陈勇 华雪铭 张冬青 余奇文 张继英 柏峻 周洪琪 | 2011 | 现代免疫学2011，31，5： | 6 |
| 7 | 转Hu-IFN-α基因草鱼雌核发育F_1的遗传配型分析显示文摘The Hu-IFN-αgene,which was transducted into downstream promoter of β-actin gene of common carp(Cyprinus carpio),was recombined by DNA recombination technology.These recombined genes were injected into 1-2 cell fertilized eggs of grass carp(Ctenophatyngodon idellus) by micro-injection technology,we gained transgenetic fish by molecular detection methods.In order to analyse the genetic expression of tran-Hu-IFN-α gene gynogensis F1,which male individualization were gained by raising methyl-testosterone,molecular genetic marker technology was used.In our research,30 random primers were picked out from 48 and were used into RAPD-PCR,the result indicated that 1 169 clear,steady and repeated DNA finger printing bands were achieved.On the basis of gentic distance matrix among tran-Hu-IFN-α gene gynogenesis F1 group,the genetic relationship of gynogenesis F1 were analysed by UPGMA,the results showed the genetic patterns are close between the 3# male gynogenesis F1 and the the 23# female of gynogenesis F1,5# and 27#,2# and 28#,2# and 30#.The data indicated that these group could be served as parent of tran-Hu-IFN-α grass carp(Ctenophatyngodon idellus) pure line. | 肖调义 唐湘北 章怀云 张学文 苏建明 陈开健 许宝红 | 2006 | 水产学报2006，30，6： | 4 |
| 8 | β-肌动蛋白启动子指导下人bcl-2转基因小鼠模型的建立显示文摘目的 :通过原核注射法将肌动蛋白启动子 /bcl 2基因转入小鼠受精卵 ,制作转bcl 2基因的小鼠 .方法 :构建 β actin启动子 /bcl 2表达载体 ,小鼠进行超排获得原核期胚胎 ,应用原核注射法进行转基因操作 ,对新生小鼠通过基因组DNAPCR和Southernblot方法进行鉴定 .结果 :注射成功率为5 8% (5 80 / 10 0 0 ) ,新生小鼠为 33只 ,PCR检测转基因阳性为 8只 ,经过Southern杂交检测有 4只转基因阳性鼠 .结论 :通过原核注射法获得转bcl 2基因的阳性小鼠 ,建立bcl 2转基因动物模型 ,为脑缺血再灌注损伤的机制研究提供手段 . | 薛荣亮 吴刚 吕建瑞 李伟 雷晓鸣 | 2004 | 第四军医大学学报2004，25，18： | 4 |
| 9 | 转Hu-IFN-α基因草鱼F_1代人α-干扰素表达水平的研究显示文摘为探明人α-干扰素在转Hu-IFN-α基因草鱼F1代中的表达水平,以转Hu-IFN-α基因草鱼F1群体为材料,随机抽取332尾鱼分离其血清后,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测人α-干扰素基因在转基因草鱼F1代中的表达情况.结果表明:转人α-干扰素基因草鱼F1代表达率为52.1%,表达水平偏低,其表达水平受外界因素影响. | 王红权 章怀云 张学文 肖调义 苏建明 唐湘北 | 2006 | 湖南农业大学学报(自然科学版)2006，32，1： | 4 |
| 10 | 抑制性消减杂交技术在养殖鱼类免疫基因克隆中的应用显示文摘抑制性消减杂交技术(SSH)是近年来兴起的一种分离、克隆差异基因的新技术,它结合了消减杂交和抑制PCR的优点,具有操作简便、特异性强、背景低及重复性好的优点。目前已经用SSH技术鉴定出了鱼的许多免疫相关基因,如白细胞介素、趋化因子、肿瘤坏死因子、溶菌酶、NKEF、补体、干扰素及急性期蛋白基因等,对它们的结构和功能进行了较为深入的研究。本文对SSH技术在养殖鱼类中克隆的免疫基因进行了归纳与总结,旨为全面了解鱼类的抗病免疫基因提供基础资料。 | 王传娟 张晓华 贾爱荣 | 2007 | 中国水产科学2007，14，3： | 4 |
| 11 | 转基因抗病草鱼研究进展显示文摘草鱼是我国淡水养殖的著名品种。草鱼的疾病严重阻碍着我国水产业的发展。通过分析当前国内外转基因技术培育抗病草鱼的现状,对今后转基因抗病草鱼的研究作了展望。 | 李耀国 肖调义 | 2011 | 生物技术通报2011，27，1： | 3 |
| 12 | 转基因鱼的研究进展及食品安全性显示文摘随着转基因技术的发展,各种转基因动物及转基因植物相继出现并应用于生产实践,给人们带来了巨大的利益。自1985年,世界上第一批转基因鱼诞生后,鱼类基因转移技术很快应用到鱼类育种中。20年来国内外主要进行了快速生长、抗寒(耐寒)、抗病等方面的转基因鱼的研究。本文主要介绍了几种常用的鱼类的基因转移技术和检测方法,转基因鱼的研究现状,并对其的食用安全性进行了讨论。 | 苏永昌 黄丽琼 | 2008 | 福建水产2008，30，4： | 2 |
| 13 | 转Hu-IFN-α基因草鱼的雌核发育及生理转雄性研究显示文摘为快速获得转Hu-IFN-α基因抗病草鱼纯系,从转Hu-IFN-α基因草鱼中,挑选9尾高表达水平的雌鱼作为亲本,经人工雌核发育,得到子一代水花89尾,与普通草鱼的雌核发育结果相比,两者孵化率差异不显著,但畸形率前者比后者高.从雌核发育子一代鱼苗中随机选取45尾鱼苗投喂含甲基睾丸素的饲料,进行生理转雄性试验,获得生理转雄性鱼苗21尾. | 许宝红 肖调义 唐湘北 章怀云 苏建明 张学文 陈韬 陈立祥 | 2008 | 湖南农业大学学报(自然科学版)2008，34，4： | 2 |
| 14 | 草鱼细胞凋亡抑制蛋白基因cDNA的克隆与表达分析显示文摘利用快速扩增cDNA末端(rapid amplification cDNA end,RACE)技术获得草鱼细胞凋亡抑制蛋白基因全长cDNA序列为2093bp,含有1个1944bp的开放阅读框,5′非编码区长25bp,3′非编码区长124bp,可编码647个氨基酸.生物信息学分析表明,在IAP的N端无氨基酸残基组成的信号肽;与斑马鱼的同源性最好,其次是斑猫鲿;在系统进化上,与斑马鱼、斑猫鲿共聚为1支.用半定量RT-PCR分析正常及细菌诱导下草鱼细胞凋亡抑制蛋白基因在不同组织中的表达分布,正常情况下,凋亡抑制蛋白基因在所取的7种组织中均有表达,其中脑、肠和肾表达最高,肝和心脏次之,鳃和肌肉最低,但差异不显著;用嗜水气单胞菌人工感染24h后,所有组织中的IAPmRNA水平平均降低约26%,以肝脏和肌肉降低较为明显,在感染48h后,所有组织中的IAPmRNA水平平均升高约4%,其中心脏、肝脏和鳃分别升高8%、16%、19%,这表明草鱼细胞凋亡抑制蛋白可能参与了机体对嗜水气单胞菌感染的免疫应答. | 左振华 唐建州 张钊 唐春华 陈韬 张东裔 | 2009 | 湖南农业大学学报(自然科学版)2009，35，3： | 1 |
| 15 | 鱼类转基因技术研究进展显示文摘近年来,随着分子生物学研究的进展,动物转基因技术得到了长足发展,基因转移的研究为鱼类遗传育种开辟了一条新的途径。阐述了转基因鱼的构建机理、方法及各自的优缺点。 | 穆楠 李海燕 李万良 | 2008 | 安徽农业科学2008，36，30： | 0 |
| 16 | 浅析桥面铺装防水措施显示文摘 | 万中强 | 2005 | 河南科技2005，24，8： | 0 |
| 17 | 草鱼呼肠孤病毒衣壳蛋白靶向灭活转基因P_0的构建显示文摘为探索草鱼出血病防治新技术,实验采用衣壳蛋白靶向灭活(capsid-targeted viral inactivation,CTVI)策略,利用Tgf2转座子元件,构建了带爪蟾EF1α或鲤热休克蛋白70两种不同启动子的CTVI转基因质粒p Tgf2-EF1α-VP3-SN或p Tgf2-Hsp70-VP3-SN。该2种质粒均包含GCRV衣壳蛋白VP3与金黄色葡萄球菌核酸酶(Staphylococcus aureus nuclease,SN)融合表达阅读框。通过将2种CTVI转基因质粒与体外合成的Tgf2转座酶5'加帽mRNA共同显微注射入草鱼1~2细胞期受精卵,获得了带2种不同启动子的CTVI转基因草鱼群体。PCR和测序结果显示,2种转基因阳性草鱼基因组中均含有外源GCRV衣壳蛋白VP3与SN基因片段,阳性率分别为40.2%和37.0%,表明Tgf2转座子已成功介导CTVI融合表达基因整合到草鱼基因组中。本实验共获得了120尾P0CTVI转基因个体,为将来构建抗出血病草鱼新品系奠定了基础材料。 | 秦波 程洛单 陈杰 蒋霞云 邹曙明 | 2014 | 水产学报2014，38，12： | 0 |
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