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| 1 | 一株皮革脱毛用工程菌的构建及酶法脱毛应用显示文摘构建一株低胶原蛋白酶活力枯草工程菌,用于皮革脱毛并研究其脱毛特性。以Bacillus subtilis AS1.398中性蛋白酶基因为模板,聚合酶链式反应(PCR)扩增得到中性蛋白酶基因npr,并借助p HT43质粒转化至蛋白酶缺陷型宿主菌WB800N中,培养并经过1mmol/L的异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导,发酵液上清经SDS-PAGE电泳证明重组蛋白表达成功,经明胶平板验证重组菌株胶原蛋白酶表达能力显著低于野生菌株AS1.398。扩大培养获得重组中性蛋白酶,对牛皮进行脱毛试验表明:重组中性蛋白酶初始脱毛速率大于野生菌株AS1.398蛋白酶;7h到达脱毛终点,且此时脱毛液中羟脯氨酸值(13μg/m L)较低;经显微及感官鉴定重组中性蛋白酶脱毛后皮块毛孔清晰可见,不损伤皮粒面。综上,重组蛋白酶可以在不损害皮质量的前提下完成脱毛过程,为酶法脱毛制革提供新的技术支撑。 | 郑翔 胡美荣 刘春卯 薛刚 李江燕 牟庆璇 | 2016 | 中国皮革2016，45，10： | 6 |
| 2 | DR脂肪酶的应用研究:Ⅰ.表面活性剂与DR脂肪酶的协同作用显示文摘本文探究了将不同类型的表面活性剂和脂肪酶间的复配,通过测定其酶活,选择出对脂肪酶具有协同作用的表面活性剂。其中阴离子表面活性剂K12对脂肪酶DR表现出了抑制作用,相对酶活降低20%~30%,非离子型表面活性剂XL-90、AEO9和TX-7对脂肪酶有明显的激活作用,其中TX-7可使相对酶活提高到150%。接着进一步考察其在兔皮脱脂中的应用效果,添加非离子表面活性剂的脱脂率增大,TX-7和AEO9尤为明显,脱脂率分别达到80.63%和76.45%,比DR脂肪酶单独脱脂提高了23.19%和16.80%。 | 袁琳琳 李双丽 刘强 李凌云 张宗才 | 2017 | 皮革与化工2017，34，4： | 4 |
| 3 | 戈壁异常球菌角蛋白酶基因的克隆及功能研究显示文摘旨为深入发掘角蛋白酶重要的基因资源,进一步提高其水解酶活,为工业生产提供理论基础。从分离于新疆戈壁沙漠的戈壁异常球菌(Deinococcus gobiensis)I-0中克隆出一个编码角蛋白酶的基因并命名Dgker。构建原核表达载体pET-22b-Dgker并进行体外诱导表达纯化,通过对羽毛水解活性的测定探究粗酶液的最适温度和pH。结果显示,Dgker蛋白N端前50个氨基酸对蛋白的表达纯化有很大影响。Dgker的重组菌株3d完全分解羽毛,在奶粉平板上重组菌株粗酶液比空载菌株粗酶液降解圈更显著。Dgker适应的温度和pH较为广泛其中最适温度是60℃、最适pH是5.0。Dgker能降解羽毛在以后的工业生产及处理废弃羽毛有极大的应用空间。 | 耿秀秀 周正富 刘盈盈 平淑珍 王劲 | 2019 | 生物技术通报2019，35，3： | 2 |
| 4 | 宏基因组中新角蛋白酶基因KerA的克隆与鉴定显示文摘皮革鞣制过程中产生大量有害物质,对环境造成了严重污染。角蛋白酶是一类水解角蛋白的酶,是皮革鞣制中理想的鞣制剂替代品。为了发掘角蛋白酶重要的基因资源,试验从土壤中克隆KerA基因,构建了原核表达载体p ET-22b-KerA,通过热激法转入BL21(DE3)中进行表达并在表达时间上进行了优化,对表达的产物进行Western-blot鉴定,通过Ni2+Sepharose Fast Flow分离纯化了KerA,并通过水解角蛋白验证其活性。结果表明:克隆的KerA基因可以在原核中表达,并具有水解角蛋白的活性。说明基因工程重组手段生产KerA具有可行性。 | 马建 许诺 王英哲 王云鹏 刘艳芝 | 2017 | 黑龙江畜牧兽医2017，，3： | 0 |
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