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| 1 | 肠胃清方对人结肠癌HCT116/L-OHP裸鼠皮下移植瘤miR-30a/Beclin1通路的影响显示文摘目的本课题旨在分子生物学技术和中医基础理论指导下,从miRNAs与自噬相关联的角度,讨论miR-30a与自噬基因Beclin1在结肠癌化疗耐药中的相关性,并探讨肠胃清对miR-30a介导自噬的调控作用及逆转结肠癌耐药的分子机制.方法建立人结肠癌耐奥沙利铂(L-OHP)细胞株HCT116/L-OHP裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为空白组、L-OHP组、肠胃清方组、肠胃清方低剂量+L-OHP组、肠胃清方高剂量+L-OHP组.治疗结束后采用RT-PCR、免疫组织化学、Tunnel等研究肠胃清对瘤体组织中miR-30a、Beclin1、LC3的表达及细胞凋亡的影响.结果奥沙利铂组可见Beclin1、LC3的上调,miR-30a的下调,细胞凋亡的减少.而肠胃清联用奥沙利铂组可见Beclin1、LC3的下调,miR-30a的上调,细胞凋亡的增加(P<0.05或P<0.01).结论奥沙利铂诱导保护性自噬导致细胞凋亡减少可能是其耐药的机制.肠胃清可通过调控miR-30a/Beclin1通路而抑制自噬逆转结肠癌耐药. | 张瑞娟 许建华 孙珏 梁芳 张勇 余倩云 范忠泽 | 2017 | 世界华人消化杂志2017，25，12： | 8 |
| 2 | 耐5-氟尿嘧啶的人结肠癌HT-29/5-FU细胞株的建立及其生物学特性显示文摘目的建立耐5-氟尿嘧啶人结肠癌细胞株(HT-29/5-FU)并观察其生物学特性。方法采用5-FU持续接触浓度递增法诱导;观察细胞形态变化和克隆形成率;MTT法测定生长曲线和药物敏感性;Western blot法分析胸苷酸合成酶(TS)、二氢嘧啶脱氢酶(DPD)的表达情况;流式细胞术检测细胞周期和凋亡。结果 HT-29/5-FU的耐药指数为3.59;与HT-29细胞相比,HT-29/5-FU细胞形态发生改变、生长缓慢、克隆形成率降低,TS和DPD高表达;S期细胞比例增多,更能耐受5-FU诱导的细胞凋亡。结论 HT-29/5-FU细胞株生物学性状的改变可能是5-FU化疗耐药机制的重要组成部分,有助于阐明肿瘤潜在耐药机制和逆转肿瘤耐药。 | 邱婷婷 项晓军 雷婉 郝超 张凌 冯苗 余锋 黎军和 熊建萍 | 2015 | 细胞与分子免疫学杂志2015，31，3： | 7 |
| 3 | miR-140-5p调控Nrf2影响结肠癌细胞5-FU耐药性显示文摘目的观察miR-140-5p对结肠癌耐药细胞株SW480/5-FU及其亲本细胞株SW480 5-FU敏感性的影响及其与核因子NF-E2相关因子2(NF-E2-related factor 2,Nrf2)的关系,探讨miR-140-5p调控结肠癌细胞5-FU耐药的可能机制。方法用结肠癌细胞株SW480构建结肠癌耐药细胞株SW480/5-FU,qRT-PCR法检测两株细胞中miR-140-5p的表达,CCK-8法和细胞集落形成实验评估miR-140-5p对两株细胞5-FU敏感性的影响;采用qRT-PCR法、Western blot法双荧光素酶报告基因验证miR-140-5p与Nrf2的关系,CCK-8法、细胞集落形成实验探讨miR-140-5p调控结肠癌细胞5-FU敏感性与Nrf2的关系。结果成功构建结肠癌耐药细胞株SW480/5-FU,其miR-140-5p表达水平显著低于亲本细胞株SW480(P<0.05);CCK-8法、细胞集落形成实验结果显示,miR-140-5p可增强SW480/5-FU细胞对5-FU的敏感性,而降低SW480对5-FU的耐药性;qRT-PCR法、Westren blot法、双荧光素酶报告基因实验共同证实miR-140-5p可结合并抑制Nrf2的表达;CCK-8、细胞集落形成实验表明,Nrf2过表达能逆转miR-140-5p对结肠癌耐药细胞SW480/5-FU的5-FU敏感性调控结果。结论 miR-140-5p可能通过结合并抑制Nrf2表达,增加结肠癌耐药细胞株SW480/5-FU对5-FU的敏感性。 | 刘进生 黄良祥 李建党 吴健生 夏浩沄 | 2018 | 中国癌症防治杂志2018，10，3： | 3 |
| 4 | 3-甲基腺嘌呤对人耐药大肠癌SW480细胞增殖及自噬活性的影响显示文摘目的 :研究自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)对耐5-氟尿嘧啶(5-Fu)结肠癌SW480细胞增殖及自噬活性的影响,探讨自噬抑制剂在逆转结直肠癌耐药中的作用。方法:浓度递增筛选法诱导耐5-Fu(100μg/L)的SW480细胞株,用10μmol/L浓度的3-MA处理后,再用5-Fu(浓度200μg/L)作用24 h。采用CCK-8法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡率,丹酰戊二胺(MDC)染色和电镜检测细胞自噬活性变化。结果:3-MA对耐药细胞自噬活性的抑制率达89.7%,增殖抑制率为9.6%,凋亡率为5.7%,与对照组比较差异具有统计学意义(P<0.05)。经3-MA处理后,5-Fu对耐药SW480细胞增殖抑制率达71.6%±2.9%,凋亡率达36.6%±2.9%,而单用5-Fu细胞增殖抑制率仅为23.6%±2.9%,凋亡率仅为10.3%±2.5%,3-MA预处理后5-Fu对耐药细胞的增殖抑制率及凋亡率均明显增强(P<0.05),自噬泡数量显著减少,自噬活性明显降低(P<0.05)。结论:3-MA单用时仅有较弱的抗肿瘤作用,与5-FU联用时耐药细胞的增殖及自噬活性被显著抑制,增强了SW480耐药细胞对5-Fu的敏感性,提高了化疗效果。 | 胡万乐 王玲琴 陈苏苹 陈荣 | 2014 | 温州医学院学报2014，44，3： | 2 |
| 5 | 人结肠癌5-氟尿嘧啶耐药细胞株SW620/Fu和LoVo/Fu的构建与鉴定显示文摘目的构建耐5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-Fu)的人结肠癌SW620/Fu和LoVo/Fu细胞株,以建立稳定的体外实验模型。方法选取亲本人结肠癌细胞SW620和LoVo进行培养传代,通过药物逐步递增法建立体外5-Fu诱导的耐药细胞株,并对耐药细胞株进行短串重复序列(STR)分析;采用MTT法分别检测5-Fu对亲本株和耐药株的半数抑制浓度(IC_(50)),并计算5-Fu耐药指数(RI)。结果耐药细胞株与STR分析结果高度匹配,表明成功构建人结肠癌细胞5-Fu耐药细胞株SW620/Fu和LoVo/Fu。5-Fu对SW620和SW620/Fu细胞的IC_(50)值分别为58.17±3.54和443.71±14.27μmol/L;对LoVo和LoVo/Fu细胞的IC_(50)值分别为152.53±13.95和1049.54±70.51μmol/L(均P<0.05),SW620/Fu和LoVo/Fu细胞的耐药指数分别为7.63和6.88。结论药物逐步递增法成功构建了5-Fu耐药细胞株,为结肠癌耐药机制研究建立了平台,有利于逆转肿瘤耐药的研究。 | 张伟 朱壮彦 张海燕 韩丽炘 张建业 周雯敏 闫燕艳 | 2022 | 山西大同大学学报(自然科学版)2022，38，3： | 0 |
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