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1分子鉴定技术在中药中的应用显示文摘对近些年来兴起的分子鉴定技术进行了分析总结,主要包括随机扩增多态性DNA(RAPD)、扩增性简单序列重复(ISSR)、限制性内切酶切片段长度多态性(RFLP)、扩增限制性内切酶片段长度多态性(AFLP)、单核苷酸多态性(SNP)、DNA条形码序列分析等技术。从中药材真伪鉴定、中药材正品与替代品鉴定、中药材多基原鉴定和遗传多样性、中药材产地鉴别、中药材年限鉴别5个方面对分子鉴定技术在中药中的应用进展进行了归纳总结,阐述了分子鉴定技术存在的一些问题及其未来的发展方向。时圣明 潘明佳 王洁 陈常青 2016中草药2016,47,17:63
2ISSR标记技术在药用植物资源中的研究进展及应用显示文摘简单重复系列区间(inter-simple sequence repeat,ISSR)是在简单重复序列(simple sequence repeat,SSR)基础上发展起来的一种新型分子标记技术。目前药用植物研究与开发面临资源枯竭、药效物质不明确及质量难以控制等难题,DNA分子标记技术,包括ISSR技术为上述难题提供了新的解决办法。比较了几种常用分子标记的优缺点,最后着重介绍了目前广泛应用于药用植物研究中的DNA分子标记ISSR的技术原理和特点,综述了ISSR分子标记技术在药用植物的遗传多样性和遗传结构、种质资源鉴定、中药品质鉴定,以及遗传图谱等方面的研究进展及应用前景,旨为药用植物的开发和利用提供参考。任梦云 陈彦君 张盾 杜乐山 刘方 关潇 张银东 2017生物技术通报2017,33,4:32
3铁皮石斛生物技术研究进展显示文摘铁皮石斛是一种名贵中药材。近年来,因为需求量的增加和自然繁殖困难等原因,野生资源日趋濒危。除原生地保护之外,利用生物技术进行人工繁殖和种质改良是解决这一问题的有效途径。本文就近年来有关铁皮石斛生物技术方面的研究进展进行简要综述,重点对种质资源的离体保存、遗传多样性和鉴定、组织培养、诱变育种和基因工程技术等方面的研究进行了综述,同时对铁皮石斛今后的开发利用工作提出了建议。张志勇 齐泽民 黄作喜 2014核农学报2014,28,4:25
4不同产地连翘的DNA指纹图谱构建与聚类分析显示文摘目的以不同产地的14批连翘Forsythia suspensa为材料,运用RAPD技术对其进行遗传多样性研究并构建DNA指纹图谱。方法采用RAPD技术,从45条RAPD随机引物中进行筛选,以14批连翘进行DNA指纹图谱的分析研究。结果从45条RAPD随机引物中筛选出11条多态性好的引物,利用这11条RAPD引物进行PCR扩增,共获得80条谱带,平均每个引物扩增出7.27条谱带,其中多态性谱带67条,多态性条带比率为83.8%,是连翘药材资源研究的一种有效分子标记。14批连翘药材间的遗传相似系数(genetic similarity,GS)在0.487 5~0.962 5,表明遗传多样性比较丰富。聚类结果显示遗传多样性与连翘药材来源地有明显的相关性,而且与其亲缘关系较近有关,符合植物种群分布的一般规律。结论以14批不同产地连翘药材资源的RAPD扩增谱带为基础,构建连翘药材资源的DNA指纹图谱并进行聚类分析。吴婷 魏珊 米丽华 李敏 张淑蓉 2016中草药2016,47,5:18
5川续断种质资源遗传多样性的SRAP分析显示文摘目的开展川续断种质资源的遗传多样性研究,为合理利用川续断种质资源提供理论依据。方法运用SRAP分子标记方法对川黔境内川续断的遗传多样性进行分析。结果 10对引物共检测到124个位点,其中102个位点具有多态性,多态位点百分率(PPL)为82.26%。川续断总的Nei’s基因多样性指数(H)为0.280 0,Shannon’s多态性信息指数(I)为0.435 3;居群水平上川续断的PPL为53.92%,H为0.121 2~0.244 0、I为0.179 6~0.361 1,其中5个高海拔、小生境特征的居群遗传多样性指标较高。居群间的基因分化系数Gst为0.293 0,基因流(Nm)为1.206 4。基于遗传相似度,14个居群可聚为3类。结论川续断居群的遗传多样性水平丰富,遗传变异主要存在居群内,地理位置(海拔)和气候是川续断居群遗传多样性较高的影响因素,而地理隔离(小生境)是造成居群内遗传变异高于居群间的另一因素。艾强 周涛 江维克 袁媛 肖承鸿 熊厚溪 贺勇 2013中草药2013,44,15:17
6不同产地西洋参种质遗传多样性的RAPD和ISSR分析显示文摘目的采用RAPD和ISSR分子标记技术对我国10个产地的西洋参Panax quinquefolium的遗传多样性进行分析。方法以人参及加拿大西洋参为对照,采用CTAB法提取基因组DNA,选取13个RAPD随机引物及12个ISSR引物对样品进行PCR扩增,根据条带数目,应用NTSYS-pc2.10e软件采用UPGMA方法进行聚类分析。结果 13条RAPD引物共扩增出97条清晰条带,多态性条带81,多态性百分率为85.51%;12条ISSR引物共扩增出99条清晰条带,多态性条带64,多态性百分率为64.65%;通过聚类分析,RAPD及RAPD+ISSR综合将样品聚为4大类;ISSR将样品聚为2大类。结论 RAPD和ISSR标记构建的样品聚类树状图在分类上稍有差异,但总体趋势一致。人参与西洋参被明显区分开来;在ISSR上,吉林兴参镇与北岗镇西洋参与人参聚为一大类;在生长环境及种植条件影响下,东北部分产地西洋参与加拿大西洋参相比在遗传多样性上有所改变。魏晓雨 田义新 赵智灵 孙福仁 2014中草药2014,45,21:17
7基于ISSR的甘肃不同产区栽培当归遗传多样性研究显示文摘目的研究甘肃不同产区栽培当归的遗传多样性。方法应用ISSR分子标记技术对甘肃省41个居群的栽培当归样本进行分析,利用Popgene 32软件分析Nei’s基因多样性指数(H)等遗传信息参数,应用Ntsys软件构建亲缘关系UPGMA聚类图。结果 8条引物共检测到154个位点,其中多态性位点119个,多态位点百分率(PPB)为77.27%。栽培当归居群间的H为0.222 9,Shannon’s多样性信息指数(I)为0.337 4,种群间基因分化系数(Gst)为0.683 9,基因流(Nm)为0.2311,遗传距离变化范围0.042 9-0.327 8。结论甘肃栽培当归遗传多样性在物种水平上较高;居群间遗传多样性水平明显高于居群内;居群间遗传分化程度大,且基本无基因交流。朱田田 晋玲 张裴斯 李应东 杜弢 何子清 2015中草药2015,46,23:16
8不同产地菘蓝ISSR分析与鉴定显示文摘目的应用ISSR-PCR标记技术探讨不同产地菘蓝的遗传多样性,为其种质鉴定及育种提供参考。方法对采自全国不同地区的菘蓝及其变异类型的23份样本进行ISSR-PCR分析,采用NTSYS-pc软件计算Jaccard遗传相似系数,按非加权配对算术平均法(UPGMA)建立所研究类群的系统聚类图。结果 10条引物共扩增出109个条带,其中多态性条带为88条,占总扩增条带数的80.7%,菘蓝种质具有较丰富的遗传多样性。从聚类分析图可以看出,所研究样本聚为3支,第1支包括绝大多数样本,第2支为一被毛变异类型,第3支相距最远,从相似度0.62处即被分开,表明为一独立类群。结论 ISSR标记可以为菘蓝的种质资源鉴定、遗传关系分析及栽培育种提供分子生物学依据。孙稚颖 姚辉 2014中草药2014,45,22:12
9金线莲RAPD-SCAR标记的开发和种质遗传多样性评价显示文摘目的研究不同种质资源金线莲Anoectochilus roxburghii的遗传进化关系,开发高效、实用的分子标记方法。方法在20个不同产地金线莲种质资源的基础上开发RAPD标记,并将其换成特异SCAR标记。结果从100条RAPD随机引物中筛选出28条具有显著多态性的引物,扩增得到135条多态性位点。RAPD聚类分析显示,当20个金线莲种质资源平均遗传距离为0.748时,可以聚为6类,同一区域起源金线莲基本归为一类,表明不同区域金线莲种质资源存在着显著遗传差异。在此基础上,从多态性RAPD条带中挑选出5个特异位点转换为SCAR标记,并在不同金线莲种质资源中进行验证,结果显示5条SCAR标记具有显著的种质资源特异性和扩增模式。结论所筛选的特异RAPD-SCAR标记为加快金线莲优良品种选育进程奠定坚实基础。王剑锴 李明杰 王建明 韦坤华 古力 林文明 张君毅 张重义 2016中草药2016,47,1:11
10基于CNKI文献大数据视野下生药学学科发展及研究进展分析显示文摘以CNKI收录学术文献资源为数据来源,基于数据挖掘与分析技术,从文献计量学的视角,对我国生药学领域近10年来科研发展状况、学科发展趋势进行梳理,通过对测量数据分析,揭东领域中核心研究机构、优势研究团队、学科领军人物、学科研究主要问题和研究进展等。研究表明,生药学领域科研人员主要集中在高校和研究院,这两类研究机构占研究成果总量的74.6%,并形成了一批核心学者。从学科间的引用强度和引用时效来看,生药学引用其他学科文献占主导,以吸收和利用其他学科知识为主,属于一门不断成长和发展的学科。分子鉴定、遗传多样性等成为近几年生药学领域的研究热点,ISSR,RAPD,DNA条形码,DNA分子标记等技术方法得到广泛应用。胡力 肖宏 2018中国中药杂志2018,43,4:10
11秦巴山区石斛属亲缘关系及金钗石斛遗传多样性ISSR分析显示文摘为研究秦巴山区石斛属亲缘关系,利用5条ISSR引物对秦巴地区石斛属植物12个居群的遗传多样性进行了初步探讨。结果表明:(1)UPGMA聚类分析结果显示,金钗石斛(Dendrobium nobile Lindl)、曲茎石斛(D.flexicaule Z.H.Tsi)和细叶石斛(D.hancockii Rolfe)分别聚为三支,在分子水平上出现了明显的分化,揭示三者是独立物种。(2)金钗石斛种下6个居群可明显分为2支,LJ、MT、YP和WF遗传一致度较近聚为一支;YJ和PT遗传高度一致,遗传距离最近聚在一起。(3)金钗石斛种下居群间Neis总基因多样性(Ht)为0.388,基因分化系数(Gst)为0.934,显示金钗石斛居群间存在较高的遗传分化。研究结果揭示了秦巴山区石斛属植物的亲缘关系,从分子水平上为其鉴定提供了依据,并为金钗石斛的资源利用和遗传改良奠定理论基础。江爱明 曹俊 蔡高磊 2016西北植物学报2016,36,10:10
12铁皮石斛的性状和显微鉴别研究显示文摘目的为铁皮石斛提供科学准确的性状和显微鉴别特征。方法采用性状及显微鉴别方法对其茎进行性状特征研究,对其根、茎、叶进行组织构造和粉末特征研究。结果铁皮枫斗呈螺旋形或弹簧状,通常为4~5个旋纹;断面平坦,灰白色至灰绿色,质坚实,易折断;气微,味淡,嚼之有黏性。铁皮石斛根、茎、叶的横切片显微特征如下:根被细胞壁具网状增厚,呈网纹状,木质化的外皮层细胞与通道细胞间隔排列,中皮层细胞中有草酸钙针晶束。茎表皮边缘有10~11个浅波,内侧的黏液细胞中含草酸钙针晶束,基本组织中有网状增厚的细胞和排成4~5圈的有限外韧型维管束。叶下表皮有多数气孔存在,叶肉组织内含少数草酸钙针晶束,叶脉维管束为有限外韧型。铁皮石斛根、茎、叶的粉末显微特征如下:网纹状的根被细胞成片;草酸钙针晶成束或散在。茎纤维束周围的细胞中含有类圆形硅质块,纵行排列;草酸钙针晶成束或散在,导管主要为梯纹、网纹导管;木薄壁细胞常附着于纤维束旁,垂周壁呈连珠状。叶气孔为药用单子叶植物特有的四细胞型气孔。结论所确定的铁皮石斛的药材性状及显微特征均具有重要的鉴别意义,可作为铁皮石斛的真伪鉴别依据。秦文 李旭梅 卫子皎 岳玥 曾建红 2017时珍国医国药2017,28,8:10
13铁皮石斛及霍山石斛ISSR鉴定体系的建立与优化显示文摘采用均匀设计和单因素试验相结合的方法,探寻鉴定铁皮石斛及霍山石斛ISSR-PCR最佳的各组分(即引物, 2×Taq Master Mix,模板DNA)用量,为进一步利用ISSR分子标记鉴别铁皮石斛和霍山石斛提供理论依据。结果表明,ISSR-PCR最佳反应体系为:20μL的反应体系中含有2×Taq Master Mix 11.5μL,模板DNA 35 ng,引物0.4μmol/L。此外,筛选出6条多态性较好、条带稳定的引物(UBC826, UBC827, UBC834,UBC842, UBC849及UBC817),并对该反应体系进行了验证,结果表明,所选引物及最佳反应体系对铁皮石斛和霍山石斛的ISSR扩增稳定性强,可用于铁皮石斛和霍山石斛的鉴定。段媛媛 卢超 郭杰 郭晓亮 周武先 游景茂 2019分子植物育种2019,17,13:10
14福建泰宁野生铁皮石斛种群的ISSR亲缘关系分析显示文摘为了解铁皮石斛(Dendrobium officinale)种质间的亲缘关系,利用ISSR 技术对34 份铁皮石斛种质资源进行亲缘关系和遗传多样性分析。结果表明,9 条ISSR 引物在34 份种质中共扩增出78 条带,多态位点百分率达100%。UPGMA 聚类分析表明,种质的相似系数为0.61~0.92,在相似系数0.626 处,福建省泰宁的野生铁皮石斛与栽培铁皮石斛分为两大类。泰宁野生铁皮石斛种群的Nei’s 基因多样性(H)和遗传分化系数(Gst)分别为0.3111 和0.4609,均高于栽培种群(0.3056 和0.4204),表明泰宁野生铁皮石斛具有较丰富的多样性和较高的种群分化系数。AMOVA 分析表明,铁皮石斛种群内变异指数为74%,种群间变异指数为26%,表明不同种群间可能存在基因交流。这些为不同地域的野生铁皮石斛资源的有效保护及利用提供理论依据及技术参考。江金兰 叶炜 李永清 范志敏 雷伏贵 张锐 周建金 2016热带亚热带植物学报2016,24,3:9
1522种石斛兰遗传多样性分析及DNA指纹图谱构建显示文摘为合理利用收集保存的石斛兰种质资源,采用ISSR分子标记方法对22种石斛兰的亲缘关系及遗传多样性进行分析。从100条引物中共筛选出6条扩增条带清晰、多态性高、重复性好的引物;利用筛选出的引物对22种石斛兰基因组DNA进行PCR扩增,共扩增出241条谱带,其中多态性谱带241条,多态性条带比例为100%;采用GenAlEx 6.5软件计算22种石斛兰的平均观测等位基因数(Na)为1.983,平均有效等位基因数(Ne)为1.167,平均Nei’s遗传多样性指数(He)为0.133,平均Shannon信息多样性指数(I)为0.247,22种石斛兰表现出丰富的遗传多样性;采用NTSYS-pc 2.1软件计算22种石斛兰的遗传相似系数为0.6984~0.8787;基于遗传相似系数进行UPGMA聚类,在相似系数0.795处,可将22种石斛兰划分为10个类群,UPGMA聚类结果与传统的形态学分类结果一致。利用3对引物构建的DNA指纹图谱均可单独鉴别出22种石斛兰。该研究为石斛兰种质资源鉴定、杂交育种亲本选择等提供了理论基础。崔学强 唐璇 黄昌艳 邓杰玲 李秀玲 卢家仕 李先民 张自斌 2021分子植物育种2021,19,9:9
16湖南产牡丹遗传多样性的ISSR分析显示文摘目的深入了解和掌握湖南产牡丹Paeonia suffruticosa的亲缘关系及遗传多样性。方法利用ISSR分子标记生物技术从100条ISSR引物中筛选出条带清晰、多态性好的引物7条,对源自湖南省内牡丹种质资源及部分实生后代共47份样品DNA进行扩增实验。结果共扩增获得77条带型完整清晰的谱带,其中多态性带为67条,多态位点比率为87.01%,表明湖南产牡丹种质资源多态性较高,具有较高的遗传多样性。经计算机软件计算结果分析,平均有效等位基因数为1.395 4,平均Nei’s基因多样性指数为0.248 0,平均Shannon’s信息指数为0.385 9;各品种间的Jaccard相似系数介于0.532 5~0.961 0,平均为0.751 5。UPGMA作图法将47份材料划分为2个类群3个亚类,很好地将不同来源的品种区分开来。结论从分子水平上揭示了湖南产牡丹品种间亲缘关系及较高的遗传多样性,为耐湿热牡丹的新品种选育工作提供了理论依据。张旻桓 金晓玲 成仿云 卢惊鸿 吴莎 2016中草药2016,47,7:9
17中麻黄ISSR-PCR反应体系的建立和优化显示文摘目的:建立适用于中麻黄的简单重复序列区间-聚合酶链反应(ISSR-PCR)最佳反应体系。方法:以凝胶成像系统下特异谱带特征为评价指标,以Mg2+、dNTPs、Taq DNA聚合酶、引物和DNA模板为考察因素,采用L16(45)正交试验优选条件;通过单因素试验对反应体系中各种影响因素进行筛选。结果:中麻黄ISSR-PCR最佳反应体系(20μl)为30 ng DNA模板、0.25 mmol/L dNTPs、2.0 mmol/L Mg2+(10×PCR Buffer)、0.4μmol/L ISSR引物、1.5 U Taq DNA聚合酶;并筛选出了12条ISSR-PCR引物的最佳退火温度。结论:所建中麻黄ISSR-PCR反应体系经过10份中麻黄材料检验证明该体系稳定可靠,可用于中麻黄遗传分析。朱田田 晋玲 杜弢 崔治家 林丽 高天鹏 张裴斯 2013中国药房2013,24,43:8
18铁皮石斛种质资源研究进展显示文摘铁皮石斛是云南省重要的药用植物之一,为了更好地开发和利用铁皮石斛种质资源,本文综述了铁皮石斛种质资源的研究进展,探讨了云南省铁皮石斛开发和利用中存在的问题,并提出了今后需要重点研究的方向。旨在进一步推动云南省铁皮石斛种质资源的深入研究与合理开发利用。刘莉 张庭 潘俊 李智敏 查应洪 张金渝 2014山地农业生物学报2014,11,3:8
19铁皮石斛不同外植体繁殖种苗的植株形态特征调查显示文摘为了研究利用不同再生途径繁殖的铁皮石斛组培苗植株形态特征的表现差异,分别随机抽取1000株人工栽培的不同再生途径繁殖的铁皮石斛组培苗植株进行形态特征调查,并进行分类归纳。结果表明,利用茎段外植体再生繁殖的铁皮石斛组培苗人工栽培植株,其形态特征表现高度一致;而利用种子外植体再生繁殖的铁皮石斛植株,其形态特征表现多种多样。由此可见,利用种子外植体再生繁殖,可以有效地拓宽铁皮石斛种质资源。莫俊杰 梁钾贤 曹汉才 谭倩婷 2014中国农学通报2014,30,16:8
20《中华人民共和国药典》(一部)中石斛药材的演变显示文摘目的:探讨《中华人民共和国药典》(一部)中石斛药材的演变。结果:1963年版《中华人民共和国药典》中石斛来源为兰科石斛属Dendrobium植物的新鲜或干燥茎;1977—2000年版《中华人民共和国药典》石斛来源为金钗石斛、环草石斛、马鞭石斛、黄草石斛或铁皮石斛;2005年版《中华人民共和国药典》石斛来源为金钗石斛、铁皮石斛或马鞭石斛;2010年版《中华人民共和国药典》石斛的来源为金钗石斛、鼓槌石斛或流苏石斛,铁皮石斛也从石斛项下都单列出来。讨论:石斛药材基源的变化、铁皮石斛的单列体现出石斛用药的科学性。但铁皮石斛与石斛的性味、功效一致,值得商榷;DNA条形码、分子标记技术等新方法可以应用到石斛药材的鉴别中。戴忠华 笪舫芳 朱华 樊柳园 秦丽 2017中华中医药学刊2017,35,2:8
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