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1牛结节性皮肤病防控技术研究现状及其策略显示文摘2019年8月我国新疆伊犁地区首次爆发牛结节性皮肤病,为做好该病的防控工作,防止外来疫情扩散蔓延到我国内地,现将该病防控的诊断检测技术、疫苗研发状况以及我国的策略进行概括介绍,为有效控制、净化和根除该病提供指导。景志忠 何小兵 陈国华 贾怀杰 房永祥 陈思睿 杨帆 吕彦蓉 Takele Tesgera HURISA 王国蒨 殷宏 2020中国兽医科学2020,50,2:36
2羊痘病毒基因组及其功能研究概况显示文摘羊痘病毒(sheeppox and goatpox virus,SGPV)属于羊痘病毒属(Capripoxvirus,CPV),包括绵羊痘病毒(sheeppox virus,SPPV)和山羊痘病毒(goatpox virus,GTPV),引发的羊痘(sheeppox and goatpox,SGP)是羊的一种急性、热性、接触性传染病。受感染的羊群皮毛质量下降,或造成羔羊的大批死亡,陈轶霞 2015中国兽医学报2015,35,2:11
3羊痘病毒诊断学研究进展显示文摘羊痘病毒是动物重要的痘病毒,属于痘病毒科脊椎动物痘病毒亚科,包括绵羊痘病毒、山羊痘病毒和疙瘩皮肤病毒。其引起的羊痘严重影响了养羊业和国际贸易的发展。作者介绍了羊痘病毒病原学特征、危害及临床症状,重点阐述了羊痘病毒分类检测的研究进展,并对新的检测方法应用于羊痘病毒分类检测进行了展望。王曼 卢昌 赵志荀 吴国华 颜新敏 朱海霞 李健 张强 2014中国畜牧兽医2014,41,7:6
4我国羊痘的防治显示文摘羊痘是一种急性、热性、高度接触性的传染病。本文介绍了近年来我国羊痘的流行情况,阐述了羊痘的实验室诊断与免疫现状,分析了羊痘防控工作面临的挑战,如羊养殖方式落后、羊痘的基础免疫和调运监管难度大、企业与科研机构实验室生物安全监管难度大等,以期为我国羊痘的防治工作提供参考。张建滨 2017中国动物检疫2017,34,7:4
5牛结节性皮肤病研究进展显示文摘牛结节性皮肤病(Lumpy skin disease,LSD)是由牛结节性皮肤病病毒(Lumpy skin disease virus,LSDV)引起的高度传染性牛病毒性疾病[1]。该病被世界动物卫生组织(OIE)列入须通报动物疫病名录,其也是《中华人民共和国进境动物检疫疫病名录》中的一类动物传染病[2-3]。LSD起源于非洲,1929年首次在赞比亚发现LSD疫情[4]。1989年,LSD首次出现跨洲传播,传入中东地区并逐渐蔓延,但LSD疫情在该地区多以散发为主;2013年,LSD再次出现跨湖传播,传入欧洲并且蔓延趋势扩大[5]。2015年以后,LSD疫情在欧洲及欧亚交界处不断蔓延,哈萨克斯坦、俄罗斯等我国周边国家LSD疫情的暴发致使LSD疫情输入我国的风险增加[5]。2019年,我国首次在新疆确诊LSD疫情,随后福建、江西、广东、安徽、浙江等省份也报导了LSD疫情的发生,给养牛业造成了巨大的经济损失[6-7]。如今LSD已传入我国,应重视该病宣传及防控,阻止其在我国牛群中的蔓延,防止其进一步危害我国养牛业。赛力克·巴合达吾列提 刘存 刘砚涵 如扎·阿布德哈勒克 梁琳 崔尚金 2020中国兽医杂志2020,56,12:3
6羊口疮病毒青海QH02株ORF011基因的克隆、原核表达及鉴定显示文摘目的克隆羊口疮病毒QH02株ORF011基因并进行序列分析及原核表达、鉴定。方法提取羊口疮病毒QH02株的DNA,根据GenBank中(GU320351.1)的序列设计并合成引物,PCR扩增ORF011基因。将测序正确的序列用生物信息学软件对其基因及蛋白的结构进行预测,并将基因构建至pET-32a(+)原核表达载体,转化至大肠埃希菌BL21(DE3),挑取阳性克隆测序正确后用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-d-thiogalactoside, IPTG)诱导表达,经十二烷基硫酸钠-十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis, SDS-PAGE)、Western-blot验证重组蛋白反应原性。结果 PCR扩增得到1 137 bp的ORF011基因片段,重组蛋白在大肠埃希菌中以包涵体的形式存在,重组蛋白相对分子质量为60×10~3,且纯度较高,Western-blot检测结果表明目的蛋白具有较好的反应原性。结论构建的原核表达系统可以成功表达B2L蛋白,经Western-blot验证具有良好的反应原性,可作为羊口疮防控产品研发的候选分子。耿嘉谦 贾怀杰 陈国华 何小兵 房永祥 景志忠 王晓霞 2019中国病毒病杂志2019,9,3:0
7山羊痘病毒L1R蛋白的原核表达及其免疫原性的研究显示文摘摘要:为探究山羊痘病毒LIR蛋白的免疫原性,将山羊痘病毒的LIR基因克隆到pET-30a(+)原核表达载体并转化大肠杆菌BL21(DE3),挑取阳性克隆进行诱导表达。表达产物经SDS-PAGE和Western-blot分析后进行纯化.将纯化的重组L1R蛋白免疫BALB/c小鼠.通过间接ELISA、淋巴细胞增殖和微量中和试验研究重组LIR蛋白的免疫原性及其多克隆抗体的抗病毒作用。结果显示,成功表达出分子质量约为26ku的目的蛋白,其可被山羊抗绵羊痘阳性血清所特异性识别。重组LIR蛋白能够刺激小鼠产生体液免疫和细胞免疫,并且其多克隆抗体能够中和山羊痘病毒,从而证实山羊痘病毒LIR蛋白具有良好的免疫原性。牛贤云 贾怀杰 陈国华 何小兵 张君 房永祥 成温玉 景志忠 2018中国兽医科学2018,48,4:0
8牛结节性皮肤病病毒LAMP快检方法的建立与应用显示文摘本研究旨在建立一种特异性检测牛结节性皮肤病病毒(LSDV)的LAMP快检方法,以用于该病临床早期诊断与监测。笔者根据LSDV的特异性基因序列,设计了数十套LAMP引物,经过筛选最终确定1套反应效率最高的引物,其位于LSDV095基因序列内。以实验室保存的PUC57-LSDV质粒作为阳性质控进行方法的优化与验证,基于不同的检测需求,分别建立了实时浊度LAMP检测方法、实时荧光LAMP检测方法及荧光可视化LAMP检测方法。优化后的3种LSDV LAMP方法灵敏度均可达20 copies/反应的靶基因,与WOAH推荐的实时荧光PCR方法(5 copies/反应)相近;特异性良好,与山羊痘病毒(GTPV)、绵羊痘病毒(SPPV)、小反刍兽疫病毒(PPRV)、赤羽病病毒(AKV)、蓝舌病病毒(BTV)及口蹄疫病毒(FMDV)均无交叉反应。其中,实时浊度法操作程序简单,实时荧光法反应快速(25 min内完成检测),荧光可视化法不依赖专用仪器及中心实验室。将所建方法应用于临床样本的检测,显示这3种方法均可特异性检测到LSDV,与实时荧光PCR方法检测结果一致性为100%,优于WOAH推荐的普通PCR方法。所建方法具有快速、特异、灵敏、操作简便且不依赖专用仪器等优点,可为LSDV的临床快速筛查提供技术支持。袁向芬 许晓琳 孔玉方 吕继洲 王慧煜 王彩霞 张舟 邓俊花 景志忠 吴绍强 2023中国兽医科学2023,53,11:0
9绵羊痘病毒A11R基因的优化表达及抗体间接ELISA方法的建立显示文摘本研究旨在对免疫原性目的蛋白基因A11R优化表达的基础上建立羊痘血清学检测方法,为羊痘防控提供技术支撑。绵羊痘病毒A11R基因经密码子优化后合成目的基因,连入pET-28a(+)载体,并转化至BL21(DE3)大肠杆菌,pET28a-A11R经鉴定后进行诱导表达。结果显示,经密码子优化后的A11R蛋白的表达量显著增加,更易从转化的大肠杆菌裂解上清液和经过复性的包涵体中大量纯化获得。将该蛋白作为包被抗原,通过优化反应条件,建立检测羊痘抗体的间接ELISA方法,并进行特异性和敏感性试验,用该方法与商业化试剂盒对临床样品进行检测。结果显示,A11R蛋白的最佳包被剂量为0.5μg/孔,待检血清最适稀释度为1∶100,家兔抗羊Ig G最适稀释度为1∶20 000。用建立的间接ELISA方法检测小反刍兽疫、羊口疮、口蹄疫的阳性血清,结果均为阴性,无交叉反应,具有良好的特异性。当羊痘阳性血清稀释到1∶1 600时抗体检测仍为阳性,具有较高的敏感性。用该ELISA方法与商业化试剂盒检测临床样品,符合率为98.71%,具有良好的一致性。上述结果表明,本研究建立了基于A11R蛋白的羊痘血清学免疫诊断方法,同时表明了密码子偏好性的优化可显著提高蛋白表达量。朱学亮 赵志荀 蒙学莲 曾巧英 2022中国兽医科学2022,52,8:0
10牛结节性皮肤病诊断方法研究进展显示文摘牛结节性皮肤病(lumpy skin disease, LSD)是由痘病毒科山羊痘病毒属的结节性皮肤病病毒(lumpy skin disease virus, LSDV)感染牛而引起的一种热性、接触性、嗜上皮性病毒病。2019年8月3日,我国首次在新疆维吾尔自治区伊犁州确诊暴发了牛结节性皮肤病疫情,目前LSD已扩散至我国东南、西南、中部及北部等大部分地区且呈蔓延态势。对LSD高效、准确、快速的诊断,是成功控制和根除LSD的基础。本文对LSD的临床特征、病原学、分子生物学和血清学等诊断方法进行综述,为LSD快速有效的诊断及科学防控提供理论支持。张辉 张慧 余翰维 陈国华 何小兵 苏洋 房永祥 2023畜牧与兽医2023,55,7:0
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