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| 1 | 人卵巢癌细胞特异性结合短肽的原核表达及靶向性分析显示文摘目的通过原核表达的方式制备人卵巢癌HO8910细胞株特异性结合短肽(ovarian cancer specific binding peptide 1,OSBP-1)和氨基酸顺序重排的短肽(scrambled peptide,OSBP-S),探讨其对卵巢癌HO8910细胞的靶向特异性。方法构建pGEX-6P-3/OSBP-1与pGEX-6P-3/OSBP-S原核表达载体,转化大肠埃希菌BL21(DE3),进行GST融合蛋白的诱导表达和纯化,纯化后的融合蛋白经SDS-PAGE和蛋白质印迹法分析无误后,进行融合蛋白的酶切及小分子肽Tricine-SDS-PAGE电泳鉴定,N端进行FITC标记。通过细胞免疫荧光和竞争性结合实验分析OSBP-1对人卵巢癌HO8910细胞株的靶向性,以及这种靶向性是否与特定的氨基酸顺序有关;通过亲和性试验研究OSBP-1与其他卵巢癌细胞、不同组织来源的肿瘤细胞及正常细胞的亲和性。结果成功构建了pGEX-6P-3/OSBP-1与pGEX-6P-3/OSBP-S原核表达载体;纯化后的融合蛋白经SDS-PAGE分析显示,出现单一的GST-OSBP-1和GST-OSBP-S蛋白条带;蛋白质印迹法分析证明,融合蛋白能被GST单克隆抗体识别;小分子肽Tricine-SDS-PAGE表明,成功获得OSBP-1和OSBP-S;标记后的FITC-OSBP-1与FITC-OSBP-S经高效液相色谱技术和质谱分析,纯度均>95%。细胞免疫荧光实验显示,FITC-OSBP-1对HO8910细胞有很强的结合能力,能进入细胞内显示很强的绿色荧光,但其与正常卵巢上皮细胞仅个别细胞显示绿光荧光,而FITC-OSBP-S与HO8910细胞和正常卵巢上皮细胞均显示很弱的绿色荧光。另外,随着FITC-OSBP-1浓度的增加,HO8910细胞的荧光强度增强;竞争性结合实验显示,FITC-OSBP-1与HO8910细胞的结合能力随着OSBP-1浓度的增加而下降,平均荧光强度(mean fluorescent intensity,MFI)递减,分别为0.140±0.002 1、0.062±0.001 5、0.027±0.002 0和0.009±0.001 5,差异有统计学意义(F=3 111,P<0.001),而加入不同浓度OSBP-S的MFI无明显变化,分别为0.142±0.004 2、0.142±0.005 7、0.139±0.002 5和0.138±0.001 5,差异无统计学意义,F=0.874,P=0.494;亲和性试验结果显示,FITC-OSBP-1与人卵巢癌HO8910细胞的MFI为0.157 4±0.001 1,明显大于FITC-OSBP-S阴性对照组0.006 2±0.000 5(t=219,P<0.001),与正常卵巢上皮细胞的MFI0.002±0.000 3,明显小于FITC-OSBP-S阴性对照组0.006 3±0.000 5(t=13.462,P<0.001),而与其他卵巢癌细胞OVCAR3、SKOV3、不同组织来源的肿瘤细胞LOVO、HepG2及正常细胞293T的MFI与FITC-OSBP-S阴性对照组分别比较,差异均无统计学意义,P>0.05。结论通过原核表达的方式成功制备OSBP-1和OSBP-S,证实OSBP-1对卵巢癌HO8910细胞具有浓度依赖性和氨基酸序列特异性靶向结合能力,且OSBP-1对正常卵巢上皮细胞几乎没有亲和力,对其他肿瘤细胞及正常细胞293T仅有很弱的亲和力,为卵巢癌的靶向治疗提供了理想的载体。 | 钟嘉莉 康佳丽 廖花 刘启才 周聪 王小霞 | 2014 | 中华肿瘤防治杂志2014，21，22： | 7 |
| 2 | 噬菌体展示技术在多肽类药物开发中的应用显示文摘目的对噬菌体展示技术在多肽类药物开发中的应用进行综述。方法通过查阅近年来国内外相关文献30篇,对其进行分析和归纳总结。结果近年来,利用噬菌体展示技术筛选特异性多肽取代抗体作为导向分子在导向药物研发中取得了很大的成功,目前已有很多运用噬菌体展示技术开发多肽类药物的成功案例。作者主要介绍通过噬菌体展示技术筛选特异性多肽在癌症、心功能障碍及神经性疾病、免疫性疾病和寄生动物及细菌病毒感染病等方面的应用。结论噬菌体展示技术是多肽类药物开发的重要手段,该技术越来越成熟,基于该技术筛选到的多种靶向多肽已经商业化或进入临床试验。 | 刘倩倩 夏思远 张舟 | 2017 | 沈阳药科大学学报2017，34，8： | 3 |
| 3 | 肿瘤归巢肽及其在肿瘤靶向治疗中的应用显示文摘肿瘤归巢肽(THPs)是一类对肿瘤组织或血管具有归巢效应的多肽,它能识别和结合肿瘤组织或血管表面的特异性受体或标志物。除了原位肿瘤,THPs还能识别并结合血管源性或转移性肿瘤。因此,THPs可将抗肿瘤药物直接靶向递送至肿瘤组织、细胞中,能够减少或消除药物耐受及毒副作用。本文将综述迄今人们对THPs的认识、开发及其在抗肿瘤诊断及治疗应用中所取得的进展。 | 吴娇 杨唐斌 柳长柏 | 2016 | 海南医学2016，27，1： | 3 |
| 4 | 异硫氰酸荧光素标记膀胱癌靶向肽NYZL1的体外特异性鉴定显示文摘目的探讨膀胱癌靶向肽NYZL1的特异性,为其临床应用提供理论基础。方法 (1)采用固相化学合成法制备多肽及其异硫氰酸荧光素(FITC)连接肽,噻唑蓝(MTT)鉴定其细胞毒性。(2)采用免疫荧光技术检测FITC-NYZL1与人膀胱癌组织结合的特异性,以FITC-sv NYZL1作阴性对照。(3)应用扫描激光共聚焦显微镜检测FITC-NYZL1与膀胱癌BIU-87、T24、E-J、5637细胞和肾癌KC细胞结合的特异性,以FITC-sv NYZL1作阴性对照。结果 (1)成功制备了实验所需的化学合成肽,高效液相色谱纯化和质谱检测结果显示其纯度高达98%,MTT结果表明化学合成肽对BIU-87细胞的增殖无影响。(2)FITC-NYZL1标记的膀胱癌组织出现了荧光富集,而其他组织未见荧光富集,FITC-sv NYZL1标记的各组织均未见荧光富集。(3)与对照组相比,FITC-NYZL1在膀胱癌细胞上均有荧光富集,且不同膀胱癌细胞间平均荧光强度差异无统计学意义(P>0.05)。结论多肽NYZL1与膀胱癌组织、细胞均能特异结合,具有显著的结合特异性,为膀胱癌的早期诊断和靶向治疗提供了新的可能。 | 逯晓青 赵量 贾昕 姚红 杨晓峰 张帆 | 2018 | 中国药物与临床2018，18，9： | 2 |
| 5 | 癌细胞/组织靶向多肽研究进展显示文摘恶性肿瘤是严重威胁人类健康生活的高发性疾病,由于缺乏早期诊断的方法以及放/化疗的巨大毒性,恶性肿瘤仍然是对人类生命健康的最大威胁之一.未来恶性肿瘤诊治取得突破的关键在于早期诊断和靶向治疗,而特异、敏感的肿瘤标志物对此意义十分重大.近年来,肿瘤标志物的研究探索取得了一定进展,尤其是肿瘤靶向多肽类标志物的研究进展较大.本文对近年来恶性肿瘤靶向多肽的筛选、鉴定、应用及未来的发展方向等进行了简要综述,以供从事相关研究的人员参考. | 郭永娥 侯颖春 | 2014 | 玉林师范学院学报2014，35，5： | 2 |
| 6 | 肿瘤归巢肽的研究进展显示文摘随着噬菌体展示技术的发展,数百种肿瘤归巢肽(tumor homing peptides)及其衍生物被发现。研究证实,这些肿瘤归巢肽在动物体内具有发现肿瘤细胞的潜力,并能将抗肿瘤药物特异性递送到肿瘤部位;其中,部分肿瘤归巢肽还具有穿膜特性,使药物能够更加有效地进入肿瘤细胞内而发挥治疗作用。目前,有关肿瘤归巢肽用于肿瘤诊断和治疗的研究已经进入不同的临床试验阶段。本文就肿瘤归巢肽的识别、分类及特性以及用于肿瘤诊断和治疗等方面的研究进展进行综述。 | 朱蕾蕾 任建丽 周志益 | 2016 | 肿瘤2016，36，5： | 1 |
| 7 | 噬菌体展示肽库技术在胃癌研究与治疗中的进展显示文摘胃癌是我国最常见的消化道肿瘤之一。近几年,胃癌早期诊断以及低副作用的有效治疗已经成为研究人员重点关注的方向和领域。噬菌体展示肽库技术(PDL)作为分析蛋白质之间相互作用的有效方法,具有简便、高效、高通量等优点,这使得PDL在胃癌的诊断检测和靶向治疗领域展示出了极大的研究价值和潜力。本文就目前PDL技术在胃癌诊断和治疗领域中的研究进展进行综述。 | 刘芳远 苏秀兰 | 2020 | 内蒙古医科大学学报2020，42，5： | 1 |
| 8 | 肿瘤导向肽的研究进展显示文摘恶性肿瘤是造成人类死亡的主要原因之一,其早期诊断和早期治疗很关键。鉴于目前大多数抗癌药物无法区分肿瘤细胞和正常细胞,研究有效的肿瘤特异性药物输送系统很有必要。应用噬菌体展示技术,已经发现一类能够特异识别并结合到肿瘤细胞或肿瘤血管的多肽——肿瘤导向肽,它能够靶向在体肿瘤,特异性地传递抗癌药物、显像剂、无机纳米粒子、脂质体等到达肿瘤组织。肿瘤导向肽作为目前研究的热点,相比于抗体导向药物具有相对分子质量小、渗透性高、特异性高、成本低等诸多优点,已经在肿瘤靶向诊断和治疗方面显示出独特的优势。本文将对肿瘤导向肽的研究进展进行较为全面的综述。 | 苗婕 张瑞 杨晓峰 | 2016 | 生命的化学2016，36，2： | 1 |
| 9 | 噬菌体抗体库技术在肿瘤治疗中的研究进展及应用显示文摘肿瘤是严重威胁人类健康的疾病。目前肿瘤治疗策略以手术切除、放化疗、靶向治疗和免疫治疗为主。单克隆抗体药物因具备高效性和低毒性等特点,逐渐成为肿瘤临床治疗中不可或缺的药物类型。噬菌体抗体库技术(phage antibody library technology,PALT)是一种新型的单克隆抗体制备技术,其将免疫球蛋白可变区VH(variable region of heavy chain)/VL(variable region of light chain)基因重组后整合在噬菌体载体上,并以融合蛋白的形式将抗体表达到噬菌体表面,从而获得多样性抗体库。抗体库经过“吸附-洗脱-扩增”过程即可筛选获得到特异结合抗原的抗体分子及其基因序列。PALT具有抗体生产周期短、抗体结构可塑性强、抗体产量大、多样性高和可直接生产人源化抗体等优点,已应用于乳腺癌、胃癌、肺癌和肝癌等肿瘤标志物的筛选和抗体药物的制备等领域。文中综述了PALT在肿瘤治疗中的研究进展及应用。 | 陈晓阳 安瑞珩 黄菊 梁有沣 张文静 郝明炫 郭蕊 李小宁 李永超 应璐 杨昭 | 2023 | 生物工程学报2023，39，9： | 1 |
| 10 | 基于纳米磷脂盘包被CD44v6的特异性多肽筛选显示文摘目的本研究对噬菌体展示进行改良,拟获取对Nanodiscs组装即体外膜蛋白模拟后的CD44v6具有结合力及特异性的多肽配体序列。方法对真核来源CD44v3-v10蛋白进行Nanodiscs包被,采取SDS-PAGE、分子排阻色谱验证。以Nanodiscs组装后的CD44v3-v10蛋白为靶蛋白,采用液相筛选磁珠吸附及抗体特异性竞争洗脱的方法获得针对于CD44v6的候选噬菌体,测序获得多肽配体序列。用ELISA法以及噬菌体洗脱试验验证并选择最佳序列。结果SDS-PAGE显示Nanodiscs包被后出现新增条带,分子排阻色谱提示产物峰形成。噬菌体筛选过程中出现明确的富集效应,测序后发现30个克隆包含6条序列。噬菌体ELISA结果显示待测克隆和靶蛋白结合的OD值,与待测克隆和对照蛋白结合、对照克隆和靶蛋白结合的OD值的差异存在统计学意义(P<0.05)。选取OD值最高的3个克隆进行噬菌体洗脱试验。待测克隆与CD44v6阳性的SGC-79细胞结合数量,与待测克隆与CD44v6阴性的HEK-293细胞结合,对照克隆与SGC-7901细胞结合数量间差异存在统计学意义(P<0.05)。选取与阳性细胞结合数量最多、阴性细胞结合数量少的噬菌体克隆(携带多肽序列HNTYVTSFHRNY)为最佳克隆。结论本研究成功对CD44进行Nanodiscs包装,并利用其筛选出CD44v6特异性多肽序列。 | 张丹 卢桂芳 冯云 刘亚萍 赵倩 任牡丹 卢新兰 和水祥 | 2020 | 山西医科大学学报2020，51，7： | 0 |
| 11 | 噬菌体肽库技术筛选肿瘤靶向短肽的研究进展显示文摘噬菌体展示技术是一项特殊的基因重组表达技术,亦是一种强大的筛选工具。1985年,Smith等成功地创立了噬菌体展示技术;1990年,Scott等在噬菌体展示技术的基础上发展并构建了噬菌体展示随机肽库。噬菌体肽库技术是一种新兴的药物发现工具[1],通过噬菌体随机肽库筛选获得的肽可以作为分子载体运载药物,起到生物导弹的功能。筛选的肽也可以直接与药物靶点分子特异性结合,起到生物治疗的作用。近年来,噬菌体肽库技术已广泛应用于肿瘤研究,如癌症的检测和诊断、肿瘤相关抗原的筛选、肿瘤药物的研制、肿瘤细胞信号转导及肿瘤的基因治疗研究等。现就近年来噬菌体展示肽库技术在筛选肿瘤靶向短肽研究中的应用综述如下。 | 张洋 张小明 刘刚 | 2015 | 重庆医学2015，44，8： | 0 |
| 12 | 胃癌细胞及临床标本特异结合的多肽的筛选与鉴定显示文摘从噬菌体随机十二肽库筛选出两个与人胃腺癌细胞SGC-7901表面特异结合的阳性噬菌体克隆,用细胞免疫荧光法鉴定这些克隆与SGC-7901结合的特异性,据亲和力确定克隆GSP5为最佳克隆,进一步以免疫细胞/组织化学等方法鉴定此克隆与胃癌细胞和临床组织的特异性/敏感性.结果显示,噬菌体克隆GSP5对SGC-7901细胞及胃癌临床组织具有较好的结合特异性/敏感性.该多肽有望成为胃癌分子影像诊断与靶向治疗的候选多肽导向分子. | 李蕊 王瀚 马彩霞 郭永娥 王琦轩 胥谨慧 吴琼 许楠 侯颖春 | 2014 | 陕西师范大学学报(自然科学版)2014，42，4： | 0 |
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