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| 1 | CPP32在阿霉素诱导的胃癌耐药细胞的凋亡显示文摘目的探讨耐药细胞和药敏细胞中 caspase-3 mRNA、蛋白的表达以及他们相互之间的关系,试图阐明 caspase-3在诱导耐药细胞凋亡中的作用及意义.方法利用已有的胃癌耐药细胞系 SGC7901/08,通过 RT-PCR 研究 caspase-3的 mRNA 在细胞毒药物处理耐药细胞0h,24h 及药敏细胞0h,6h 时的表达,用 Western-blot 的方法讨论其蛋白在耐药细胞中0h,6h,24h,30h 的表达和药敏细胞中0h,6h,24h 的表达,DNA ladder 检测其特征性凋亡变化.MTT法检测细胞的存活率.结果耐药细胞在0h,24h 和药敏细胞在0h,6h 表达的caspase-3mRNA 无显著性差异,蛋白表达在耐药细胞中在6h 出现微量的表达,在30h 时出现更小片断;药敏细胞在6h 时出现小片断,在24h 出现完全裂解.细胞 DNA 分析表明耐药细胞在30h 出现典型的凋亡谱带;应用了 caspase-3抑制剂后细胞的凋亡延迟.药敏细胞在6h 出现典型的凋亡谱带,应用了抑制剂后也出现凋亡的延迟.结论提高耐药细胞的用药量仍然可以使耐药细胞出现凋亡,而且其凋亡的过程与耐药细胞相同,均有 caspase-3的激活,而抑制了 caspase-3的活性,凋亡的发生可被抑制或是延迟,其差别就在于耐药细胞需要较高的药物诱导浓度.耐药细胞与药敏细胞的凋亡机制从本质上并无显著的不同,其根本的差别可能在于凋亡发生前的诸多因素产生的差异. | 王少东 张振书 张杏泉 周殿元 | 2001 | 世界华人消化杂志2001，9，10： | 4 |
| 2 | 小鼠甲胎蛋白基因的克隆真核表达载体构建及表达鉴定显示文摘目的:克隆小鼠甲胎蛋白(AFP)基因,构建小鼠 AFP 真核表达载体并进行表达鉴定.方法:从 Hepal-6细胞中提取总 RNA 进行 R7-PCR,克隆出小鼠 AFP 基因,亚克隆于 pcDNA3.1载体,重组阳性克隆进行酶切和测序鉴定.重组质粒瞬时转染 CHO-Kl 细胞,Western blot 检测小鼠 AFP 的表达.结果:利用 RT-PCR 从 Hepal-6细胞总 RNA 中成功克隆出1.8kb 的小鼠 AFP 基因,重组阳性克隆经酶切和测序鉴定证实目的基因已正确插入 pcDNA3.1载体中,Western blot结果证实重组质粒 pmAFP 能够在 CHO-Kl 细胞中正确表达结论:小鼠 AFP 真核表达载体构建成功,为进一步研究其在肝癌免疫治疗中的作用奠定了基础. | 田耕 易继林 | 2003 | 世界华人消化杂志2003，11，11： | 0 |
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