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| 1 | 山羊流产嗜衣原体OmpA基因重组质粒构建及对小鼠免疫效果研究显示文摘为探讨山羊流产嗜衣原体重组真核质粒进入临床试验的可行性,本试验用PCR方法扩增出山羊流产嗜衣原体OmpA基因,克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)中,经PCR和双酶切鉴定后,将重组质粒pcDNA3.1-OmpA转染至PK-15细胞,观察目的基因表达情况,并将制备的大肠杆菌基因组单链DNA作为分子佐剂与重组质粒共同免疫小鼠,检测重组质粒在小鼠体内分布情况及血清抗体水平。结果表明,经PCR、双酶切和测序鉴定表明成功构建重组质粒pcDNA3.1-OmpA;转染PK-15细胞后,荧光抗体试验结果证实重组质粒pcDNA3.1-OmpA得到有效表达。首免后14d,重组质粒加分子佐剂组的抗体效价显著高于重组质粒组和灭活疫苗组(P<0.05);随着免疫次数增加和时间推移,免疫小鼠抗体水平均呈现上升趋势,至35d时达到最高峰,此后抗体滴度逐渐下降,但仍维持较高水平。首免后21d,在小鼠心脏、肝脏、脾脏、肾脏、肺脏、脑、空肠和腿肌中均可检测到质粒的分布,此后逐渐消失,49d在所检组织中均未检测到重组质粒的存在。表明试验成功构建了基于OmpA基因的山羊流产嗜衣原体重组真核质粒,且加入分子佐剂后可诱导小鼠产生较高水平的血清抗体。 | 龙冲冲 邓位喜 毛以智 曾贵英 伍波涛 熊朝丽 徐茂文 夏鹏 文明 | 2016 | 中国畜牧兽医2016，43，11： | 2 |
| 2 | 表皮葡萄球菌DNA体内抗小鼠宫颈癌U14的实验研究显示文摘目的探讨表皮葡萄球菌DNA(S.epidermidis DNA)体内抗宫颈癌U14的作用。方法提取S.epidermi-dis DNA。于昆明小鼠前臂皮下注射宫颈癌U14细胞(1×107 mL-1)0.1mL.只-1,共24只。造模7d后,将荷瘤小鼠按随机数字表法分为S.epidermidis DNA治疗组(DNA组,n=8)、溶剂对照组(LES组,n=8)、模型对照组(NS组,n=8),并于荷瘤小鼠前臂分别肌内注射S.epidermidis DNA(质量浓度100μg.mL-1)、DNA溶解液、生理盐水,0.3mL.次-1,每2天1次,共注射8次。采用MTT法测OD值计算刺激指数,记录荷瘤小鼠的存活时间,测量肿瘤体积,计算S.epidermidis DNA平均抑瘤率。结果荷瘤小鼠造模成功率为100%。DNA组的荷瘤小鼠脾脏T淋巴细胞的刺激指数(0.603±0.086)较LES组(0.433±0.062)、NS组(0.428±0.056)明显增高(P<0.05);肿瘤大小DNA组[(3.240±0.053)cm2]较LES组[(5.460±0.045)cm2]、NS组[(5.620±0.064)cm2]明显缩小(P<0.05);DNA组的生存时间[(38.250±5.245)d]较LES组[(17.150±3.563)d]、NS组[(16.650±2.187)d]延长(P<0.05);S.epidermidis DNA平均抑瘤率为62.9%。结论 S.epidermidis DNA体内治疗后,荷瘤小鼠脾脏T淋巴细胞增殖功能明显增强,肿瘤大小明显缩小,小鼠平均生存时间明显延长,抑瘤率较高。S.epider-midis DNA具有一定的抗小鼠宫颈癌U14的作用。 | 陈小英 曾小平 胡有长 辜小汉 傅颖媛 | 2013 | 南昌大学学报(医学版)2013，53，4： | 0 |
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