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| 1 | 芪合酶基因Fm-STS在何首乌毛状根中的过量表达及dsRNA干扰显示文摘目的:建立一套探究植物基因功能的方法体系,验证由芪合酶基因保守序列通过RACE扩增技术在何首乌中得到的基因Fm-STS的功能。方法:由含CaMV 35S启动子驱动的gfp基因的植物转基因表达基础质粒pBIN-35S-GFP构建过表达质粒pBIN-35S-STS-GFP(阳性)和双链RNA干扰重组质粒pBIN-35S-正向-反向-GFP(阴性),并同空白表达质粒pBIN-35S-GFP(空白)均导入野生型发根农杆菌ATCC15834中,转化何首乌外植体,诱导生成毛状根并培养,对毛状根进行高效液相色谱分析以及实时荧光定量检测。结果:在过表达组、空白组和干扰组中毛状根中发根农杆菌Ri质粒中的rolB基因和外源基因gfp均有表达,高效液相色谱法分析芪合物二苯乙烯苷含量依次为4.67mg/g、2.18mg/g和0.65mg/g,在mRNA水平上测试荧光定量检测基因Fm-STS表达量:RNAi组是空白组的1/433.53,过表达组是空白组的2.41倍。结论:结果表明过量表达与双链RNA干扰相结合在植物基因功能研究中有良好的应用,何首乌中芪合酶Fm-STS是二苯乙烯苷主要的合成酶。 | 朱宽鹏 赵树进 | 2012 | 中国生物工程杂志2012，32，8： | 9 |
| 2 | 塔杨松散型均质胚性愈伤组织培养体系显示文摘为了获得塔杨(Populus×canadensis Moench‘Tower’)松散型、均质、胚性愈伤组织(LHEC),以塔杨试管苗叶片为外植体,通过不同浓度激素(BA、KT、2,4-D)、蔗糖和无机盐处理,建立了松散型愈伤组织(LC)诱导—继代培养—胚性愈伤诱导的高效体系。结果显示:塔杨叶片在低蔗糖和低无机盐(1/4MS+2 mg·L^(-1)2,4-D+1mg·L^(-1)BA+10 g·L^(-1))的培养基上培养可以诱导出完全的LC(诱导率100%)。LC在继代培养基(MS+2.0mg·L^(-1)2,4-D+2.0 mg·L^(-1)BA+Vc100 mg·L^(-1)+30 g·L^(-1))上进行2~3次转接后,再转移到LHEC培养基(MS+0.5 mg·L^(-1)2,4-D+3 mg·L^(-1)BA+Vc100 mg·L^(-1)+40 g·L^(-1)蔗糖)上培养4~5周(每7天转接1次),即可诱导出具有许多球状体(原胚状体)的松散型胚性愈伤组织。此外,适当的2,4-D与BA浓度比例,可以使LC保持细胞的松散特性、不形成根、无褐变,生长快;含有30 g·L^(-1)蔗糖的培养基利于LC生长和LHEC的形成;维生素C能较好的抑制继代培养中的褐变;BA有利于形成LC,而KT有利于紧密型愈伤组织的形成,同时BA处理的愈伤组织生长较KT处理的快;当2,4-D浓度为0.5~1 mg·L^(-1)时,随着BA浓度的增加,LHEC的数量也随之增加,当BA为3 mg·L^(-1)时,LHEC数量达到最大值100%。本文还对影响愈伤组织胚性化的主要因素进行了讨论。提出的各项建议对均质胚性愈伤组织LHEC的培养有重要的指导意义。 | 刘艳军 张超 杨静慧 李冰 刘婷 秦艳筠 | 2016 | 植物研究2016，36，1： | 9 |
| 3 | 何首乌叶愈伤组织的诱导和二苯乙烯苷含量的检测显示文摘[目的]对何首乌叶进行愈伤组织诱导并检测叶愈伤组织中二苯乙烯苷的含量。[方法]在25℃暗箱培养条件下,将何首乌叶在含有浓度为1 mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)和浓度为0.4 mg/L萘乙酸(NAA)的MS诱导培养基中进行诱导,15 d后把诱导出的愈伤组织转接到相同培养基中培养15 d,共转接3次,并通过HPLC法检测叶愈伤组织中二苯乙烯苷的含量。[结果]诱导出的愈伤组织生长状况良好,并且测得叶愈伤组织中二苯乙烯苷的含量为0.37 mg/g。[结论]由叶诱导出的愈伤组织中含有二苯乙烯苷,该愈伤组织可以用于进一步的生理生化研究。 | 范洪琼 | 2011 | 安徽农业科学2011，39，32： | 1 |
| 4 | 紫外光照射对何首乌愈伤组织二苯乙烯苷的影响显示文摘为了筛选药用成分高的优质何首乌中药材,以组织培养获得的淡绿色疏松何首乌愈伤组织为材料,将其分割成体积一致的愈伤组织团接种到添加5.0mg/L 6-BA+1.0mg/L NAA的MS培养基中,用15~20cm高的30W紫外灯照射不同时间,再用HPLC法检测其愈伤组织中的二苯乙烯苷含量。结果表明,何首乌愈伤组织经紫外光照射50min/d的二苯乙烯苷含量最高,为0.010 8%。因此,适当的紫外光照射可提高何首乌愈伤组织中的二苯乙烯苷含量。 | 徐秋云 王华磊 赵致 刘洪昌 李金玲 罗春丽 罗夫来 黄明进 孙悦 | 2013 | 贵州农业科学2013，41，6： | 1 |
| 5 | 芪合酶基因Fm-STS在何首乌毛状根中的过量表达分析显示文摘目的:通过过量表达探究在何首乌中得到的芪合酶基因Fm-STS的功能。方法:由含CaMV 35S启动子驱动以及荧光标记蛋白(Green fluorescent protein,GFP)基因的植物转基因基础表达质粒pBIN-35S-GFP构建过量表达质粒pBIN-35S-STS-GFP(阳性),并同空白表达质粒pBIN-35S-GFP(空白)均导入野生型发根农杆菌ATCC15834中,转化何首乌外植体(无菌苗叶片),诱导生成毛状根并培养,对毛状根进行高效液相色谱分析芪合物二苯乙烯苷含量变化以及实时荧光定量检测基因Fm-STS表达差异。结果:在过表达组和空白组中毛状根中发根农杆菌Ri质粒中的rolB基因和外源基因GFP均有表达,芪合物二苯乙烯苷含量依次为4.67 mg/g和2.18 mg/g(干重),在mRNA水平上检测基因Fm-STS表达量:过表达组是空白组的2.41倍。结论:基因FM-STS是何首乌中芪合物二苯乙烯苷生物合成过程中的酶基因,过量表达在基因功能研究中有良好的应用。 | 朱宽鹏 生书晶 赵炜 陆娣 夏晚霞 赵树进 | 2013 | 现代生物医学进展2013，13，5： | 0 |
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