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| 1 | 大豆成熟种子胚尖基因枪法转化体系的优化显示文摘以山东省主栽大豆品种'荷豆12'成熟种子胚尖为材料,探讨了6-BA和潮霉素浓度等因素对基因枪法遗传转化的影响,并通过报道基因GUS检测了外源基因的表达和整合情况。结果表明:经5 mg.L-16-BA诱导16 h,'荷豆12'胚尖的再生丛生芽数目、丛生芽的伸长速率等综合指标最佳;5~15 mg.L-1的潮霉素多步梯度筛选可以提高转化筛选效率。基因枪转化后的胚尖组织和转基因植株后代的叶片中均可以观察到GUS基因的表达;通过分子鉴定证明外源GUS基因插入到转基因后代的基因组中。 | 叶美 张敏 杨素欣 邵群 安海龙 曹子谊 冯献忠 | 2011 | 大豆科学2011,30,1: | 13 |
| 2 | 农杆菌介导大豆不同外植体遗传转化研究显示文摘以MYB转录因子GmPHR1为目的基因,冀豆12、冀豆16和绥农14为转化受体,比较农杆菌介导大豆不同外植体的遗传转化技术,为大豆转基因育种提供技术支撑。结果表明,以茎尖转化系统的不定芽诱导率、植株再生率和转化效率最高,且对基因型的依赖性最小,但由于对抗生素的敏感性较差,因而存在一定程度的假阳性;其次,以胚尖转化系统的不定芽诱导率、植株再生率和转化效率较高,对基因型的依赖性较小,同时对抗生素的敏感性较强,因而是一种较为理想的转化系统。而子叶节、下胚轴转化系统则表现出不定芽诱导率、植株再生率和转化效率均较低,且存在较强的基因型依赖性等不足。同时,利用上述4种转化系统,获得了3个供试大豆品种的转基因T1植株。 | 刘翠 李喜焕 常文锁 张春锋 张彩英 | 2012 | 华北农学报2012,27,3: | 10 |
| 3 | Southern杂交技术在农作物遗传转化研究中的应用显示文摘Southern杂交技术作为分子生物学中的经典技术,为特定DNA片段的检测提供了快速、准确、灵敏的方法。在植物遗传转化研究中,Southern杂交技术广泛应用于外源基因的检测及拷贝数的鉴定工作,为植物转基因研究的准确性提供了充分的保障。综述了Southern杂交技术在水稻、玉米、小麦、大豆等主要农作物遗传转化研究中的应用,可为农作物转基因研究方法的明确及转基因食品安全检测方法的探索提供参考。 | 代军 | 2015 | 安徽农业科学2015,43,1: | 5 |
| 4 | 根癌农杆菌介导的大豆子叶节转化体系的优化显示文摘以13种不同基因型的大豆为材料,研究了大豆外植体再生过程中不同大豆基因型对丛生芽数目的影响,选取优势基因型为受体材料,比较了在草丁膦和潮霉素筛选压力下外植体的再生情况,并确定其合适的筛选浓度,在对农杆菌介导的子叶节转化体系优化的基础上进行了大豆转化效率的研究。结果显示:在相同的芽诱导条件下,山宁14产生的丛生芽最多,更适合于大豆子叶节转化;与其它筛选剂相比,采用潮霉素的梯度筛选更有利于抗性苗的成活,其最适筛选浓度为8 mg.L-1;通过检测GUS基因的表达和分子鉴定证明外源的GUS基因已插入到转基因植株的基因组中,转化效率达到3.2%。 | 郝荣华 邵群 杨素欣 李继存 冯献忠 赵彦修 | 2012 | 大豆科学2012,31,2: | 4 |
| 5 | 利用“微创刷”法获得抗草甘膦转基因大豆显示文摘以发芽3 d的大豆成熟种子胚尖生长点为作用点,利用'微创刷'法将抗草甘膦基因(EPSPS)转入绥农22中,对转化植株T1代进行草甘膦筛选,对筛选后的抗性植株进行PCR检测,得到抗草甘膦转基因大豆。同时研究了不同浓度草甘膦对野生型绥农22与抗草甘膦转基因绥农22大豆植株的影响。结果表明:绥农22 T0代成株率为97.38%,对T1代具有草甘膦抗性的植株进行PCR检测,初步证明EPSPS基因成功转入大豆中,T1代转化效率为6.20%;对野生型绥农22与'微创刷'法获得的转基因绥农22大豆在不同浓度草甘膦进行相关生理指标测定,抗草甘膦转基因绥农22大豆在不同浓度草甘膦作用下叶片叶绿素含量指数、光合速率高于野生型绥农22大豆,莽草酸含量低于野生型绥农22大豆,进一步证明了大豆抗性植株对草甘膦的抗性。 | 荣非 王罡 季静 王萍 董歆 高海伶 曹越平 邱丽娟 | 2015 | 大豆科学2015,34,2: | 3 |
| 6 | 大豆不定胚悬浮培养基因型筛选及基因枪遗传转化的研究显示文摘对32个不同基因型大豆的幼胚进行不定胚诱导,30 d时统计分析初生胚诱导率、次生胚诱导率和诱导效率,经综合比较得出适合体细胞诱导不定胚的4种基因型为L155、垦丰16、绥农25和吉育91。然后以不定胚诱导率较高的L155为材料建立大豆悬浮培养不定胚繁殖体系,并用基因枪轰击的方法将GUS表达盒片段转入不定胚细胞团。X-gluc染色后显微观察到基因蓝色产物,说明GUS基因通过微弹轰击法导入大豆不定胚细胞并表达。 | 盖江南 张彬彬 吴瑶 李文滨 | 2013 | 大豆科学2013,32,1: | 3 |
| 7 | 转NPR1和CHR3抗病基因提高大豆对疫霉根腐病抗性研究显示文摘为检测GmCHR3和广谱抗病基因NPR1双抗基因转化到大豆吉林30中的遗传稳定性和抗病能力,从而为培育出抵抗疫霉根腐病大豆新品种提供有效参考,以大豆品种吉林30转CHR3抗病基因转化品系JL30+GmCHR3为目标受体材料,以吉林30为对照受体材料,利用农杆菌介导法将NPR1导入受体中。利用常规PCR检测基因转化情况,利用Southern杂交和qRT-PCR技术分别鉴定JL30+GmCHR3受体和双抗基因转化株系T1和T2代中两个基因的整合和表达情况,采用下胚轴侵染法鉴定转基因大豆植株对疫霉根腐病的抗性。PCR研究结果显示:转化元件的启动子35s、终止子Nos、筛选标记基因Bar以及目的基因NPR1全部转入到受体基因组中;NPR1基因以单拷贝的形式在转化植株中完成整合;NPR1基因在大豆植株根、茎和叶中均有表达,其中T1代株系在3个部位的相对表达量分别是2.732,1.614和3.316,T2代株系的相对表达量分别是2.936,2.084和3.864;NPR1基因在各组织中的相对表达量为茎<根<叶。CHR3和NPR1双抗基因转化株系对疫霉根腐病表现为高抗,NPR1单抗基因转化株系表现为中抗,非转基因吉林30植株表现为感病。结果说明大豆吉林30转入双价抗病基因GmCHR3和NPR1可以增强其对疫霉根腐病的抗性。 | 朱婷婷 王春生 孙珊珊 赵贺 曲硕 焦耀磊 王丕武 | 2021 | 大豆科学2021,40,2: | 1 |
| 8 | 大豆品种改良的研究概况显示文摘大豆(Glycine max)是我国重要的油料作物,由于受到外界环境的影响,其产量和品质均不稳定。常规育种与生物技术在培育高产、优质、抗逆植物新品种方面发挥了巨大的作用。因此,为了获得具有优良性状的植株,达到快速培育大豆新品种的目的,从常规育种和生物技术两个方面对大豆品种改良的主要方法、基本原理及其应用进行综述,旨在为大豆育种研究工作提供参考。 | 杨莹 | 2013 | 广东农业科学2013,40,3: | 1 |
| 9 | 基因枪转化大豆胚尖草胺膦抗性浓度的确定显示文摘为了探讨基因枪法遗传转化时草胺膦的适宜浓度,以‘荷豆12’成熟种子胚尖为材料,将经6-BA诱导过的大豆胚尖转移至含不同草胺磷浓度的培养基上,观察生长及芽伸长情况。结果表明,随着草胺磷浓度增加,大豆胚尖死亡率增加,丛生芽伸长受抑制,再生能力减弱。添加草胺膦的浓度高于0.5 mg/L时,生长受严重抑制甚至死亡,移至基本培养基上也不能再生;在低于0.5 mg/L时,不能有效抑制其生长。因此,0.5 mg/L可作为基因枪法转化外源基因时草胺膦的筛选标准。 | 王冰 吴春霞 赵彦修 | 2012 | 中国农学通报2012,28,15: | 0 |