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| 1 | Epitope peptides of influenza H3N2 virus neuraminidase gene designed by immunoinformatics显示文摘病毒表面蛋白质 neuraminidase (NA ) 是在流行性感冒的主要子类型特定的抗原类型 A 病毒。Neuraminidase 作为酶工作打破在红血球凝聚素之间的契约(哈) 并且到版本的 sialic 酸最新从感染的房间形成了病毒。在这研究,从 H3N2 子类型病毒的 NA 基因被定序, NA 蛋白质为 B 房间 epitopes 被屏蔽并且基于 immunoinformatics 估计了。把信息,三肽 ES8, RR9,和 WK7 基于这(盖住氨基酸残余 221228, 292300,和 383389,分别地) NA,蛋白质人工地被选择并且综合。这些肽被用来皮下地使新西兰兔子免疫提起 antisera。结果证明这三肽能够以一种特定、敏感的方式对 H3N2 病毒得到抗体,由连接酶的 immunosorbent 在 vitro 检测了试金。而且, hemadsorption 释放反的效果在 1:40 的冲淡发生在三 antisera 混合物。用数据库软件的排列证明在这三 epitope 肽的氨基酸残余在在这研究定序的所有 NA 在特定的地点被代替。我们建议这些 NA epitope 肽可能被使用与一起哈蛋白质同样疫苗的抗原。 | Lijun Liang Ping Huang Miaoheng Wen Hanzhong Ni Songnuan Tan Yonghui Zhang Qiuxia Chen | 2012 | Acta Biochimica et Biophysica Sinica2012，44，2： | 4 |
| 2 | 弓形虫复合抗原ROP2-SAG1优势表位与人乳头瘤病毒16型晚期结构蛋白L1融合体的构建及其在真核细胞中的表达显示文摘目的构建弓形虫复合抗原ROP2-SAG1免疫优势表位(RSepitope)与人乳头瘤病毒16型晚期结构蛋白L1(HPV16L1)的融合体(RSepitope-HPV16L1),验证其在真核细胞中的表达。方法优化RSepitope基因序列,构建pc DNA3.1/RSepitope重组真核表达质粒。从T-HPV16L1质粒中扩增HPV16L1基因片段,构建pc DNA3.1/RSepitope-HPV16L1重组质粒。双酶切、PCR、测序鉴定正确后,将2个重组质粒分别转染至非洲绿猴肾细胞COS-7细胞,培养48 h后收集细胞,提取RNA,RT-PCR扩增相应的目的基因。Western blotting和间接免疫荧光实验检测重组蛋白RSepitope和RSepitope-HPV16L1在细胞中的表达。结果构建的重组质粒pc DNA3.1/RSepitope和pc DNA3.1/RSepitope-HPV16L1经PCR扩增和双酶切分别获得282 bp和1 500 bp片段,与预期结果一致,测序结果正确。RT-PCR结果显示,以2个重组质粒转染细胞的c DNA为模板,分别扩增到282 bp和1 500 bp的目的条带。Western blotting分析结果显示,以RSepitope免疫血清为一抗,重组蛋白RSepitope和RSepitope-HPV16L1分别在相对分子质量(Mr)约为10 000和65 000处出现特异性条带;以HPV16L1单克隆抗体为一抗,重组蛋白RSepitope-HPV16L1在Mr65 000处出现特异性条带。间接免疫荧光实验结果显示,以RSepitope免疫血清为一抗,重组质粒pc DNA3.1/RSepitope和pc DNA3.1/RSepitope-HPV16L1转染细胞内均观察到绿色荧光;以HPV16L1单克隆抗体为一抗,重组质粒pc DNA3.1/RSepitope-HPV16L1转染细胞内观察到特异性绿色荧光。结论弓形虫优势表位RSepitope与HPV16L1融合体构建成功,且可在真核细胞中表达。 | 谢自新 姜洁 汪文寰 吕金辉 冯方方 张丽芳 李文姝 | 2018 | 中国寄生虫学与寄生虫病杂志2018，36，3： | 2 |
| 3 | EB病毒潜伏膜蛋白2多表位DNA联合多肽的免疫效应研究显示文摘目的研究HPV L1携带EB病毒(EBV)潜伏膜蛋白2(LMP2)多表位DNA联合多肽的免疫效应。方法BALB/c雌性小鼠随机分为4组。pcHPVL1-EBV LMP2DNA免疫组,肌肉注射pcDNA3.1(+)/HPVL1-EBV LMP2多表位DNA,每鼠每次100μg;DNA联合多肽免疫组:先用DNA免疫,每鼠每次50μg,同时皮下注射EBV LMP2多表位肽,每鼠每次5μg;DNA免疫对照组:肌肉免疫空载体pcDNA3.1(+),每鼠每次100μg;多肽免疫对照组:每鼠每次10μg皮下注射不相关多肽。共免疫4次,间隔2周。免疫后第7周收集小鼠血清,采用ELISA法检测小鼠EBV LMP2特异性抗体IgG、IgA以及HPVL1特异性抗体IgG;免疫后第9周测定EBV特异性抗体IgG1与IgG2a亚类,同时采用乳酸脱氢酶(LDH)释放法测定小鼠脾细胞CTL的杀伤活性。结果多肽联合DNA免疫组小鼠血清EBV LMP2特异性抗体IgG、IgA A值分别为1.573±0.025和0.436±0.033,单独DNA免疫组分别为1.282±0.051和0.317±0.022,差异有统计学意义(F=80.393,27.722,P<0.05);两免疫组小鼠血清HPV L1特异性IgG A值别为0.648±0.063和0.702±0.023,差异无统计学意义(F=1.952,P>0.05)。DNA免疫组IgG1和IgG2aA值别为0.723±0.023和0.594±0.084,差异无统计学意义(F=6.643,P>0.05),是混合Th1/Th2免疫反应类型;多肽联合DNA免疫组IgG1和IgG2aA值别为0.897±0.042和0.629±0.035,差异有统计学意义(F=72.306,P<0.05),是偏向Th2免疫反应类型。多肽联合DNA免疫组在效靶比为10︰1时,小鼠脾细胞CTL杀伤效应(杀伤率)为27.70%,DNA免疫组为21.50%,差异有统计学意义(F=51.559,P<0.05)。结论多肽联合DNA免疫可产生有效的CTL杀伤效应,更能发挥有效的体液免疫作用,其免疫策略可为EBV相关肿瘤的免疫治疗提供参考。 | 李文姝 田晓娟 林晓云 刘建晓 朱珊丽 薛向阳 张丽芳 | 2014 | 中国病原生物学杂志2014，9，2： | 1 |
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