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| 1 | H1N1亚型流感病毒诱导外周血单个核细胞凋亡研究显示文摘A型流感病毒能诱导淋巴细胞、单核巨噬细胞的凋亡,为进一步探讨淋巴细胞和单核巨噬细胞在凋亡中可能存在的相互作用,用H1N1亚型流感病毒诱导人外周血淋巴细胞和单核巨噬细胞的凋亡.结果显示,前48h,H1N1流感病毒能诱导淋巴细胞和单核巨噬细胞的凋亡,但在培养48h后,流感病毒对单核巨噬细胞表现为凋亡抑制作用,同时流感病毒对淋巴细胞吸附不同时间后,荧光染色和流式细胞术检测凋亡未见明显差异,说明细胞凋亡与病毒吸附时间长短并无相关性.检测p53抑制剂Pifithrin-α(PFT-α)加入前后淋巴细胞和单核巨噬细胞的凋亡情况,结果显示,淋巴细胞和单核巨噬细胞的凋亡均被抑制,提示通过p53诱导的凋亡可能是流感病毒诱导细胞凋亡的一条重要途径. | 张衡 王革非 高媛丽 陈小璇 林桂梅 李康生 | 2009 | 生物化学与生物物理进展2009，36，6： | 17 |
| 2 | 病毒性脑炎发病机制的研究进展显示文摘病毒性脑炎是由病毒感染引起的脑实质炎症,是一种严重的神经系统疾病,影响世界公共卫生安全。目前临床上有多种病原体可引起人类病毒性脑炎,发病机制还未完全清楚。近年来由于分子病毒学方面研究的进展,为人类治疗病毒性脑炎提供了很多新的思路和方法。 | 王雨薇 郭爱松 蔡俊燕 刘苏 王司晔 | 2019 | 中国实用神经疾病杂志2019，22，17： | 15 |
| 3 | 流感病毒H1N1和H5N1感染小鼠小胶质细胞与星形胶质细胞诱导趋化因子转录水平上调显示文摘目的:探讨胶质细胞感染流感病毒后的天然免疫反应,检测流感病毒H1N1和H5N1体外感染小鼠小胶质细胞和星形胶质细胞,是否会诱导胶质细胞趋化因子转录水平的变化及其规律。方法:从新生小鼠大脑皮质分离培养神经胶质细胞,并进一步纯化小胶质细胞和星形胶质细胞,经纯度鉴定后,用感染复数为2的流感病毒H1N1和H5N1进行体外感染,8小时后用免疫荧光检测流感病毒核蛋白(NP)的表达,以确认感染细胞比例。在感染早期(6小时)和感染中期(24小时)分别提取细胞RNA,检测趋化因子转录水平的变化。结果:分离得到小鼠的小胶质细胞和星形胶质细胞,病毒感染后超过95%的细胞可以被感染,感染后的小胶质细胞与星形胶质细胞的CCL-3、CCL-5、CXCL-2、CXCL-9和CXCL-10的转录水平发生不同程度的上调,其中CXCL-10的上调幅度最为明显,禽流感病毒H5N1感染能诱导更强烈的上调反应。结论:流感病毒H1N1和H5N1感染小鼠小胶质细胞与星形胶质细胞,可诱导趋化因子转录水平上调。 | 王革非 李卫中 张衡 曾俊 张丹桂 陈幼莹 陈小璇 李康生 | 2010 | 中国免疫学杂志2010，26，1： | 6 |
| 4 | 流感病毒诱导小鼠胶质细胞的细胞因子级联反应显示文摘目的:探讨流感病毒感染星形胶质细胞后释放的细胞因子是否会诱导正常胶质细胞趋化因子及促炎细胞因子转录水平的变化,从而产生细胞因子级联效应。方法:从新生小鼠大脑皮质分离培养神经胶质细胞,并进一步纯化星形胶质细胞,经纯度鉴定后,用感染复数为2的流感病毒H1N1和H3N2进行体外感染星形胶质细胞,分别于6小时和24小时收获上清,采用超滤分子截留的方法,去除流感病毒颗粒。用不同时间点的条件上清,分别刺激星形胶质细胞和小胶质细胞,24小时后提取RNA并进行反转录,利用Real-Time PCR检测促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6,趋化因子IP-10、MCP-1、MIP-1转录水平的变化。结果:不同时间点的条件上清皆可诱导正常胶质细胞的促炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6和趋化因子IP-10、MCP-1、MIP-1的转录水平发生不同程度的上调,产生细胞因子级联效应。结论:流感病毒H1N1和H3N2感染星形胶质细胞后所引起的细胞因子风暴,可诱导正常胶质细胞的细胞因子转录水平显著上调,引发细胞因子级联反应,其可能与流感病毒感染中枢神经系统所引发的细胞因子风暴及免疫病理损伤存在一定关系。 | 周健祥 王革非 蒋治武 曾俊 苏芸 李康生 | 2012 | 中国免疫学杂志2012，28，1： | 6 |
| 5 | 121例新型甲型H1N1流感患者早期静脉血白细胞参数分析显示文摘目的分析甲型H1N1流感患者早期静脉血白细胞参数的变化。方法使用美国雅培CD-1800血液分析仪检测121例甲型H1N1流感患者早期静脉血白细胞参数,并与正常人群比较。结果甲型H1N1流感患者静脉血白细胞计数均值为4.77×109/L,95%可信区间(CI)为(1.63~8.25)×109/L。白细胞降低的发生率为30.58%,其中男性发生率为34.33%,女性发生率为25.93%,两者间差异无统计学意义(P=0.321)。甲型H1N1流感患者与正常人群相比较,淋巴细胞百分率(LYM%)降低(P〈0.01),中等大小细胞百分率(M ID%)升高(P〈0.01)、中性粒细胞百分率(GRAN%)差异无统计学意义(P〉0.05)。结论甲型H1N1流感患者早期静脉血白细胞计数的总体均数下降,白细胞降低的发生率在不同性别中无差异,与健康成人相比较甲型H1N1患者的LYM%降低、M ID%升高、GRAN%无差异。 | 孟予城 刘更新 杨继清 高占国 宋雪冬 周力 孙大根 姚学敏 张艳霞 | 2010 | 检验医学2010，25，12： | 5 |
| 6 | A型流感病毒感染免疫应答中细胞因子的作用显示文摘A型流感病毒是引起人和禽类呼吸道疾病的重要病原体。病毒在宿主的上皮细胞和中性粒细胞中复制并刺激机体产生具有各种生物活性的细胞因子。细胞因子作为天然免疫的一部分,具有抗病毒和辅助Th1型免疫应答的作用,同时细胞因子也影响适应性免疫应答和疾病的表现型。流感病毒感染导致趋化性细胞因子、促炎性细胞因子、肿瘤坏死因子α以及抗病毒细胞因子的产生。论文综述了细胞因子在A型流感病毒感染的免疫应答中的可能作用,为更好地阐明病毒感染的发病机理奠定基础。 | 侯佩莉 张茂林 李影 关振宏 | 2010 | 动物医学进展2010，31，10： | 4 |
| 7 | β-淀粉样肽对原代培养小鼠大脑皮质小胶质细胞形态学及细胞因子表达的影响显示文摘目的:研究原代培养的BALB/c小鼠大脑皮质小胶质细胞经β-淀粉样肽1-42(Aβ1-42)刺激后的形态学变化及细胞因子表达情况。方法:小胶质细胞用2次温和胰酶消化法分离,经预处理的Aβ1-42刺激后,相差显微镜观察形态学改变,RT-PCR检测IL-1β、-6基因表达水平。结果:小胶质细胞经Aβ1-42刺激后6 h细胞形态学发生明显改变;刺激24 h后IL-1β、-6基因表达水平明显上调(P<0.05)。结论:Aβ1-42可明显活化小胶质细胞,并诱导炎性细胞因子的表达。 | 辛岗 苏芸 王革非 许燕璇 陈小璇 李康生 | 2011 | 汕头大学医学院学报2011，24，2： | 3 |
| 8 | 儿童甲型H1N1流感病理及免疫学认识显示文摘在2009年大流行的甲型H1N1病毒感染的问题上,我并没有研究的经历。谨将学习中的发现和想法提供给临床医生。
2005年,文献以“为下一个流感大流行做准备”为题,提出流感大流行“什么时候发生?会是流行于亚洲的禽流感(H5N1)吗?比1918年的流感大流行是强还是弱?或相当于1957年和1968年的流感?”“解决问题的关键是制备有效的疫苗”等一系列问题。 | 胡坚 | 2010 | 中国实用儿科杂志2010，25，2： | 3 |
| 9 | Effects of NS1 variants of H5N1 influenza virus on interferon induction, TNFa response and p53 activity显示文摘Non-structural protein 1(NS1)is an important virulence factor of the highly pathogenic H5N1 avian influenza virus.A five-amino-acid(5 aa)deletion at position 80–84 and an aspartic acid to glutamic acid substitution at position 92(D92E)are two major NS1 mutations that are highly correlated with enhanced virulence.To investigate the effect of these mutations in H5N1 virulence,three H5N1-NS1 variants were constructed:NS51(lacking 5 aa at position 80–84),NS51(I)(carrying a 5-aa insertion at position 80–84)and NS51(IM)(carrying both the 5-aa insertion and the D92E mutation).We examined the effects of these mutations on interferon(IFN)induction,tumor-necrosis factor(TNF)a response,p53 activity and apoptosis.We found that the D92E mutation eliminated NS1’s repressive effect on IFN induction,while the 5-aa deletion resulted in enhanced resistance to TNFa responses.We also observed that all three variants exhibited a similar suppressive effect on p53 transcriptional activity,although none of them significantly influenced apoptosis of host cells.Our findings shed new light on the role of NS1 in the pathogenicity of H5N1 virus. | Weizhong Li Gefei Wang Heng Zhang Gang Xin Dangui Zhang Jun Zeng Xiaoxuan Chen Yanxuan Xu Youhong Cui Kangsheng Li | 2010 | Cellular & Molecular Immunology2010，7，3： | 3 |
| 10 | 评判性思维在甲型H1N1流感患者护理过程中的应用显示文摘评判性思维是一种科学的思维方法,它在护理学中的应用,促进了护理学的发展,使护士在临床护理决策实践中能够恰当地运用评判性思维方法和工作方法,为甲型H1N1流感患者提供高质量,高效率的护理。本文主要介绍评判性思维在甲型H1N1流感患者中护理程序、心理护理、护理健康教育等方面护理工作中的应用。 | 雷云宏 王成中 黄蓉 周超 朱涤潮 | 2010 | 中国民族民间医药2010，19，6： | 3 |
| 11 | 脂多糖活化小鼠大脑小胶质细胞后炎性细胞因子的表达显示文摘目的采用细菌脂多糖(LPS)对原代培养的BALB/c小鼠大脑皮质小胶质细胞进行刺激,检测小胶质细胞IL-1bI、L-6和TNF-α等细胞因子的基因表达情况。方法分离纯化小胶质细胞,采用1μg/ml LPS刺激24h,再采用RT-PCR检测IL-1bI、L-6和TNF-a mRNA表达水平。结果体外培养的小胶质细胞经LPS刺激后,细胞因子IL-1bI、L-6和TNF-a mRNA表达水平明显上调。结论 LPS活化的小胶质细胞可产生大量的炎性细胞因子。 | 辛岗 苏芸 许燕璇 陈小璇 李康生 | 2011 | 中国热带医学2011，11，8： | 3 |
| 12 | 流感病毒感染神经胶质细胞条件培养上清对星形胶质细胞的免疫生物学影响显示文摘目的利用人流感病毒H1N1和H3N2感染小鼠星形胶质细胞获得条件培养上清刺激正常星形胶质细胞,研究人流感病毒感染星形胶质细胞后释放的细胞因子,是否会诱导正常胶质细胞的免疫病理学变化。方法从新生小鼠大脑皮质分离纯化星形胶质细胞,经纯度鉴定后,用人流感病毒H1N1和H3N2体外感染,分别于感染早期(6 h)和感染中晚期(24 h)收获条件培养上清,刺激正常星形胶质细胞,CCK-8法检测细胞存活率,Western blotting法检测星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达状况,ELISA法检测细胞不同时间分泌的炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6水平变化。结果流感病毒感染星形胶质细胞的条件培养上清,可显著抑制正常胶质细胞的活性,诱导GFAP蛋白表达的上调,而炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6在不同时间点的蛋白表达水平发生不同程度改变,总体呈下降趋势。结论体外实验中,人流感病毒感染星形胶质细胞后释放的细胞因子会诱导正常胶质细胞发生较为明显的免疫病理学变化,但未见明显的细胞因子级联现象。 | 王革非 李蕊 周健祥 蒋治武 代剑平 李康生 | 2015 | 热带医学杂志2015，15，4： | 2 |
| 13 | 一株引起病毒性脑炎的柯萨奇B3病毒的生物学特性分析显示文摘目的通过分析分离自病毒性脑炎病人的一株柯萨奇病毒B3株KMA103-09生物学特性,研究其致病机理。方法将KMA103-09病毒分别按一定量接种至KMB17细胞、RD细胞、VERO细胞、Hep-2细胞、Hela细胞及MRC-5细胞进行培养,观察细胞的生长情况,并采用微滴法检测病毒在不同时间、不同细胞中的病毒感染滴度;将一定量KMA103-09病毒注射乳鼠和成鼠脑内,观察病毒的致病性,并检查鼠血清中IL-2、IL-4、IL-6、IFN-r、TNF、IL-17A、IL-10含量。结果该病毒株在6种细胞上皆能适应生长,并产生明显的细胞病变效应。病毒在Hela细胞上生长繁殖最快,42h时细胞全部发生病变,感染性滴度达8.625lgCCID50/ml;在MRC-5细胞上病毒的感染性滴度最低,120h才全部发生病变,感染性滴度为5.50lgCCID50/ml。该病毒对一日龄乳鼠致死并在脑、肺和心脏等组织产生病理改变,实验乳鼠血清IL-6、IL-10、TNF含量分别为4.71pg/ml、21.08pg/ml和36.79pg/ml,与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),其余4种皆无表达。该病毒对成鼠不致病,脑、肺、心脏病理检查无异常。结论 KMA103-09病毒在Hela细胞生长适应性良好,对乳鼠致病而对成鼠不致病。 | 李华 杨卉娟 王东宝 柯华昕 王玺 沈冬 王庆玲 马绍辉 | 2014 | 中国病原生物学杂志2014，9，4： | 2 |
| 14 | 甲型H1N1流感并偏瘫1例显示文摘患儿男,2岁3个月,因发热、咳嗽2d,抽搐2次入院。发热时体温最高39.5℃,无寒战、抽搐,单声咳,咯白色痰。 | 李丹 李小青 | 2010 | 中国当代儿科杂志2010，12，10： | 2 |
| 15 | 浅析评判性思维在治疗支气管扩张患者中的临床运用显示文摘目的:探讨评判性思维在治疗支气管扩张患者中的临床运用。方法:以护理中的评判性思维为指导方法,去探索其在支气管扩张患者中的临床运用价值。结果:评判性思维作为一种辩证统一的哲学思维方法,可以更好的协助医生开展临床治疗。结论:评判性思维是一种科学严谨的治疗思想,在临床治疗支气管扩张中具有极大的帮助。 | 孙朝文 郭瑜 申安辉 傅芳芳 姚滟琳 范磊磊 白明霞 | 2010 | 中国民族民间医药2010，19，12： | 2 |
| 16 | 人APOBEC-3F和-3G的克隆表达、亚细胞定位及其抑制HBV的研究显示文摘载脂蛋白B mRNA编辑酶催化多肽(apolipoprotein B mRNA-editing enzyme catalytic-polypeptide,APOBEC)家族成员,是近年来发现的具有抗病毒作用的天然免疫分子,对HIV和HBV等多种病毒具有抑制作用,为研究APOBEC的抗病毒作用,对APOBEC-3F和-3G进行克隆、表达及亚细胞定位分析.HBV主要的生物合成发生于细胞核中,利用核定位信号(NLS)及二联核定位信号(B-NLS)与APOBEC-3F和-3G融合表达,以进一步了解APOBEC-3F和-3G的亚细胞定位及功能.利用RT-PCR从植物凝集素(PHA)刺激的人外周血淋巴细胞RNA中,对APOBEC-3F和-3G进行克隆,利用HindⅢ和KpnⅠ双酶切插入到pcFlag载体中,脂质体转染MDCK细胞后利用免疫荧光检测APOBEC重组蛋白的亚细胞定位.电泳结果表明,RT-PCR扩增得到APOBEC-3F和-3G基因,双酶切鉴定结果表明,APOBEC真核表达载体构建成功,基因序列经DNA测序证实.免疫荧光结果表明,转染表达后的APOBEC-3F和-3G均定位于细胞胞浆中.APOBEC-3F和-3G可以在HepG2.2.15细胞中显著抑制HBV的复制.可以有效转运绿色荧光蛋白(GFP)入核的NLS及B-NLS,不能将APOBEC-3F和-3G有效地转运至核中.成功地对APOBEC家族中的两个重要成员APOBEC-3F和-3G进行了克隆、表达及亚细胞定位研究,为进一步利用APOBEC家族蛋白开发抗HIV及HBV药物提供基础. | 王革非 彭程 李卫中 辛岗 苏芸 陈幼莹 林桂梅 李康生 | 2009 | 生物化学与生物物理进展2009，36，3： | 2 |
| 17 | 禽流感病毒H5N1全基因组克隆与分析显示文摘为明确广东地区分离的一株禽流感病毒H5N1的遗传背景,建立流感病毒反向遗传的平台。对该株禽流感病毒进行了空斑纯化与组织细胞培养,检测其在MDCK细胞中的增殖特性;利用H5N1病毒通用引物,通过RT-PCR对该病毒全基因组的8条片段进行全长克隆及测序分析;将H5N1的8条全长基因组片段分别插入反向遗传通用载体中,构建禽流感病毒H5N1的感染性克隆。结果表明,该H5N1毒株在MDCK细胞中可不依赖胰酶进行有效增殖与复制,可使MDCK细胞出现典型细胞病变,具有高致病性禽流感病毒的细胞增殖特征。RT-PCR克隆得到该H5N1毒株的PB2、PB1、PA、HA、NP、NA、M和NS八条全长片段,经测序分析确认该毒株的基因序列,其内部编码序列出现多处突变,其中HA连接肽为多个连续碱性氨基酸,表明该毒株可不依赖胰酶进行有效复制,与细胞培养结果一致,未出现抗药性的遗传突变。PCR与测序证明,插入H5N1八个全长基因组片段的载体序列完全正确,表明成功构建了该毒株的感染性克隆。为明确病毒遗传信息,建立流感病毒反向遗传的平台,为进一步研究禽流感病毒相关疫苗提供了研究基础。 | 王革非 李卫中 张衡 曾俊 陈幼莹 陈小璇 李康生 | 2010 | 微生物学免疫学进展2010，38，1： | 2 |
| 18 | LPS刺激神经胶质细胞条件培养上清诱导神经元凋亡显示文摘目的研究经脂多糖(LPS)刺激后神经胶质细胞培养上清对神经元死亡及凋亡的诱导情况。方法体外原代培养小鼠混合神经胶质细胞和神经元细胞,采用LPS刺激神经胶质细胞,24h后收获条件培养上清与神经元细胞共孵育,检测神经元细胞死亡和凋亡的情况。结果 LPS刺激后的神经胶质细胞培养上清对神经元的毒性作用与未刺激组无明显差别(P>0.05);LPS刺激后的神经胶质细胞条件培养上清诱导神经元细胞凋亡明显高于未刺激组(P<0.05)。结论神经胶质细胞LPS刺激后的条件培养上清可以诱导神经元凋亡,但没有导致明显的神经元细胞死亡。 | 辛岗 苏芸 许燕璇 李康生 | 2011 | 脑与神经疾病杂志2011，19，4： | 1 |
| 19 | 外周感染流感病毒WSN33对小鼠自发行为的影响显示文摘目的:研究外周感染流感病毒H1N1 WSN33后,小鼠在旷场自发行为中的变化规律,探讨外周感染流感病毒对小鼠情绪的影响。方法:通过滴鼻感染H1N1 WSN33或生理盐水,记录BALB/c小鼠两周内的体重变化,以及在旷场行为箱体内5 min的行走总路程、平均运动速度、中央区域运动路程及粪便排泄情况等。结果:外周感染H1N1 WSN33引起小鼠体重急速下降,从第8天开始逐渐恢复。旷场试验中WSN33感染组小鼠行走总路程减少,在感染后的5到10 d总路程减少量差异性比较显著;平均运动速度无统计学差异性;粪便粒数波动较大,无统计学差异。结论:外周感染流感病毒H1N1 WSN33后,BALB/c小鼠自发活动量减少,活动速度基本不变,启示流感病毒感染过程中伴随一定程度的抑郁、焦虑、紧张等情绪,在流感病毒感染的急性期和恢复初期表现比较明显,而紧张情绪表现不太显著。 | 周艳琳 李蕊 谷李铭 刘俊 陈燕霞 李康生 王革非 | 2015 | 中国免疫学杂志2015，31，5： | 1 |
| 20 | 流感病毒在神经元细胞中的感染与复制研究显示文摘目的:研究流感病毒在体外对神经元的感染及活性影响,检测流感病毒在神经元内的复制效率。方法:原代培养小鼠神经元细胞,β-tubulin III抗体进行免疫荧光鉴定小鼠神经元纯度,流感病毒吸附、培养;荧光定量PCR检测神经元内病毒载量;CCK-8检测流感病毒对神经元活性的影响。结果:免疫荧光结果表明,神经元纯度大于95%。CCK-8检测结果显示,流感病毒对神经元感染可显著抑制神经元细胞活性。荧光定量PCR结果表明,流感病毒可感染神经元并在其细胞内进行病毒复制。结论:流感病毒可在体外感染小鼠原代神经元进行病毒复制,并影响神经元活性。 | 王革非 蒋治武 李康生 | 2015 | 汕头大学医学院学报2015，28，2： | 1 |
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