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| 1 | 原代心肌细胞缺氧/血预处理模型的建立与评价标准显示文摘目的:探讨原代心肌细胞缺氧预处理模型并建立评价标准。方法选择1~2 d出生的SD大鼠,原代分离培养心肌细胞,3 d后更换缺氧缓冲液,同时实施物理和化学缺氧预处理即缺氧1 h,复氧1 h,重复3次,然后实施缺氧复氧损伤即进行8 h缺氧和2 h复氧。分别用倒置显微镜电镜观察细胞形态,通过MTT法检测心肌细胞的存活率,以及培养液中LDH的含量,并通过QRT-PCR检测缺氧预处理后HIF-1aαmRNA的表达情况。结果通过MTT法检测心肌细胞的存活率发现:缺氧复氧损伤组存活率显著低于常规培养组(P<0.05),物理缺氧预处理组心肌细胞的存活率显著高于缺氧复氧损伤组和化学缺氧预处理组(P<0.05)。预处理后检测细胞培养液LDH水平发现:与常规组相比缺氧复氧损伤组,LDH的含量显著(P<0.05),实施物理缺氧预处理后LDH的含量显著低于缺氧复氧损伤组(P<0.05)。与对照组相比物理缺氧预处理组、化学缺氧预处理组的HIF-1αmRNA的表达量均显著增高(P<0.05),物理缺氧预处理组、化学缺氧预处理组的HIF-1αmRNA的表达量无统计学差异。结论本研究所采用的心肌缺氧预处理模型,优于化学缺氧预处理模型,且能够启动心肌内源性保护保护机制,可重复性强,是今后通过心肌细胞原代培养研究缺氧预处理机制提供可靠、易操作的实验模型。 | 王涵 郭海 郑宏 | 2016 | 新疆医学2016，46，6： | 1 |
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