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1灵芝多糖对斑马鱼存活、发育和衰老的影响显示文摘目的:观察灵芝多糖对斑马鱼存活、发育和衰老的影响。方法取正常受精的斑马鱼卵,在其单细胞发育期注射二胺吗啉代寡核苷酸(mO),制备 p53基因敲除斑马鱼模型。正常斑马鱼卵和 p53基因敲除斑马鱼卵孵育8 h 后,分别加入灵芝多糖1,2和3 g·L-1于28℃继续培养3 d,测定斑马鱼存活率和畸形率,并用衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gaI)染色法分析斑马鱼细胞 SA-β-gaI 染色阳性率,用逆转录 PCR 检测衰老相关基因端粒酶逆转录酶基因( TERT)、抑癌基因 p53、小鼠双微体基因( mdm2)和 p21基因表达。结果灵芝多糖1和2 g·L-1培养3 d 对野生型斑马鱼的发育无明显影响,3 g·L-1时大部分野生型斑马鱼胚胎细胞表现为畸形,并且存活率仅为48.6%;灵芝多糖1~3 g·L-1对 p53基因敲除斑马鱼的存活和发育无明显影响。灵芝多糖2 g·L-1处理3 d,野生型斑马鱼 SA-β-gaI 染色阳性率与对照组相比明显降低( P﹤0.01),p53基因敲除斑马鱼 SA-β-gaI 染色阳性率无明显变化。逆转录 PCR 结果表明,灵芝多糖2 g·L-1可降低野生型斑马鱼细胞 p21和 p53基因表达(P﹤0.05,P﹤0.01),对 TERT和 mdm2基因表达无明显影响;对 p53基因敲除斑马鱼 TERT,mdm2,p21和 p53基因表达均无明显影响。结论灵芝多糖2 g·L-1对野生型斑马鱼胚胎细胞复制性衰老具有改善作用,≥3 g·L-1时可导致野生型斑马鱼幼胚发育畸形和死亡。灵芝多糖对斑马鱼衰老的改善作用可能与其降低 p21和 p53基因表达有关。夏广清 姚慧敏 董丽红 刘伟 2014中国药理学与毒理学杂志2014,28,4:4
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