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1胚胎癌F9细胞中Oct4对miR-302启动子的调控作用显示文摘目的:检测胚胎癌F9细胞中Oct4对miR-302启动子活性是否具有调节作用。方法:构建PGL3-P-miR-302启动子荧光素酶报告基因质粒并验证其活性,然后将0.5μg PGL3-P-miR-302分别与0.5和1.0 g Oct4表达质粒共转染至293T细胞中,检测过表达Oct4对miR-302启动子活性的影响;并将0.5μg PGL3-P-miR-302和Oct4 siRNA(2.0μg siRNA1和2.0μg siRNA2)共转染到F9细胞中,检测Oct4 RNA干扰对miR-302启动子活性的影响,以验证Oct4对miR-302启动子是否有调控作用。结果:成功构建了PGL3-P-miR-302启动子荧光素酶报告基因质粒,并证实了PGL3-P-miR-302在F9细胞中具有启动子活性;在T293细胞中,当Oct4表达质粒为0.5μg时miR-302启动子转录活性是对照组的2.6倍(P<0.05),当Oct4为1.0μg时miR-302启动子转录活性是对照组的4.3倍(P<0.05);在F9细胞中miR-302启动子的活性在转染Oct4 siRNA后明显下降,约为siRNA非特异性对照组的68%(P<0.05)。结论:Oct4对miR-302启动子具有正调节作用,miR-302可能是Oct4的靶基因之一。刘海英 黄青 董静文 李莉 2014癌变.畸变.突变2014,26,4:0
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