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| 1 | 中药五谷虫抗菌物质的分离纯化及抗菌机制的实验研究显示文摘目的:分离纯化五谷虫的有效抗菌物质,同时研究五谷虫抗菌物质对大肠杆菌的杀伤作用,初步探讨其可能的抗菌机制。方法:将五谷虫与大肠杆菌共培养使五谷虫获得二次免疫。用DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析柱和sephacryls-200HR凝胶过滤层析柱分离纯化,浊度法检测,获得五谷虫抗菌物质。用荧光探针、琼脂糖凝胶电泳技术分析五谷虫的抗菌机制。结果:五谷虫粗提物浓度>1.0 mg/mL时对大肠杆菌的抗菌效果较强,分子量在10KD左右。荧光探针技术示20 mg/mL的抗生素变化率为35.4%,50 mg/mL的抗生素变化率为40.0%,100 mg/mL的抗生素变化率为42.3%,2 mg/mL的粗提物变化率为1223.1%,80 mg/mL的粗提物变化率为1300.0%。琼脂糖凝胶电泳图示含2 mg/mL和80 mg/mL粗提物的泳道无质粒DNA条带。结论:用DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析柱和sephacryls-200HR凝胶过滤层析柱可以纯化得到有效的五谷虫抗菌成分,呈单一蛋白条带。其抗菌机制可能是破坏了大肠杆菌的细胞膜以及影响了质粒DNA的复制。 | 王寿宇 张振 李旭东 吕德成 | 2013 | 中华中医药学刊2013,31,9: | 3 |
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