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1Apollon反义核酸促进肝癌HepG_2细胞凋亡机制的探讨显示文摘目的研究凋亡抑制蛋白(IAP)家族成员Apollon反义核酸(ASO)对人肝癌HepG2细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其机制。方法将化学合成的Apollon ASO经脂质体包裹后作用于肝癌HepG2细胞48 h,采用WST-8法检测不同浓度的Apollon ASO对肝癌细胞增殖抑制作用,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(PCR)检测细胞Apollon mRNA的表达水平;流式细胞术检测细胞早期凋亡率;Hochest33258染色观察HepG2细胞凋亡形态;线粒体膜电位检测细胞凋亡;比色法测定半胱氨酸蛋白酶(Caspase-3、Caspase-9)活性的改变;蛋白质免疫印记技术检测细胞色素C蛋白的表达水平。结果 Apollon ASO转染HepG2细胞48 h能明显抑制细胞增殖,并呈浓度依赖关系。Apollon ASO能促进HepG2细胞凋亡。不同浓度的Apollon ASO能显著下调Apollon mRNA的表达水平,同时Caspase-3、Caspase-9的活性明显增加,细胞色素C蛋白表达水平也增加。经荧光显微镜观察,ASO组可见核高强度荧光的细胞,并见凋亡小体。结论 Apollon ASO可下调Apollon mRNA表达水平,抑制HepG2细胞增殖,其诱导细胞早期凋亡可能通过线粒体介导的途径。黎毓光 何金花 王莉 谢杏仪 陈顺仪 陈武嘉 黄国贤 2013检验医学2013,28,9:1
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