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1酪胺信号放大-量子点标记银染增强的基因芯片可视化检测方法的建立显示文摘目的:建立一种酪胺信号放大-量子点标记银染增强的基因芯片可视化检测方法,提高基因芯片检测的灵敏度。方法:待测靶基因与固定在玻片上的探针杂交,依次加入链霉亲和素标记的辣根过氧化物酶、生物素标记的酪胺及链霉亲和素标记的量子点,37℃孵育,然后加入银增强试剂显色,最后用可视化生物芯片扫描仪扫描并记录结果;以牛布鲁菌 210105 株为检测对象,以酪胺信号放大-荧光素 Cy3(TSA-Cy3)检测法为对照方法,测定酪胺信号放大-量子点标记银染增强(TSA-QDS)检测法的灵敏度。结果:确定了基因芯片量子点标记银染增强可视化检测方法的检测流程,优化了检测条件,并考察了检测灵敏度。优化的检测条件为:酪胺-生物素稀释比例为 1∶4000,链酶亲和素标记的量子点稀释比例为 1∶50,37℃孵育时间为 25~30 min,银染增强时间为 6~7 min。检测牛布鲁菌的灵敏度为 103 CFU/mL。结论:该方法实现了基因芯片高灵敏度可视化检测,其灵敏度与荧光法相当,并且有可视化的优势。张春 刘琪琦 陈苏红 张宏刚 王升启 2012生物技术通讯2012,23,4:6
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