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| 1 | 流行性乙型脑炎病毒囊膜蛋白截片段的克隆及表达显示文摘目的获得流行性乙型脑炎(乙脑)病毒(JEV)SA14-14-2株囊膜蛋白抗原域Ⅲ基因并在大肠杆菌中表达,为进一步研发JEV血清学检测试剂盒提供抗原。方法逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增JEV SA14-14-2株囊膜蛋白抗原域Ⅲ测序,并定向克隆入原核表达载体pET-28a,构建原核重组表达质粒pET-EⅢ,转化大肠埃氏菌(Esche-richia coli,E.coli)BL21菌株,并经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(Isopropyl-βD-1-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导在大肠杆菌中表达SA14-14-2株囊膜蛋白抗原域Ⅲ。结果扩增的SA14-14-2株JEV囊膜蛋白截片段基因与发表的SA14-14-2株基因序列完全一致,构建了原核表达载体并在大肠杆菌中得到了表达,且表达产物具有免疫反应性。结论在大肠杆菌中表达了囊膜蛋白抗原域Ⅲ基因,为进一步研发JEV血清学检测试剂盒提供了抗原。 | 谢荣辉 朱函坪 翁景清 姚苹苹 徐芳 朱智勇 | 2007 | 中国计划免疫2007，13，6： | 1 |
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