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| 1 | shRNA逆转耐阿霉素人乳腺癌细胞株(MCF-7/AdrR)的多药耐药性显示文摘目的利用短发夹RNA(shorthairpinRNA,shRNA)表达载体逆转耐阿霉素人乳腺癌细胞株(MCF-7/AdrR)的多药耐药性(multidrugresistance,MDR)。方法构建2个MDR1基因shRNA表达质粒,稳定转染MCF-7/AdrR细胞。RT-PCR分析MDR1基因mRNA的表达,Westernblotting检测P-糖蛋白(P-gp)的表达,流式细胞术和MTT法分别检测乳腺癌细胞的凋亡和对阿霉素的敏感性,激光共聚焦荧光显微镜检测细胞内柔红霉素的稳态积累。结果稳定转染pSilencerTM3.1-H1neoMDR1-A和MDR1-BshRNA表达质粒的MCF-7/AdrR细胞,RT-PCR结果显示MDR1基因mRNA表达分别减少到37.6%和28·0%,Westernblotting结果显示P-gp表达被明显而特异地抑制。转染细胞对阿霉素的耐药性由162倍分别减低到108倍和50倍,并且MDR1shRNA表达质粒增加MCF-7/AdrR细胞内柔红霉素的积累。MDR1shRNA表达质粒和阿霉素联合应用可诱导MCF-7/AdrR细胞的凋亡。结论shRNA表达质粒有效地逆转多药耐药,使耐药的肿瘤细胞恢复对化疗药物的敏感性。 | 干惠珠 张桂珍 张凤春 卜丽莎 杨绍娟 高申 郑德明 | 2006 | 中国肿瘤生物治疗杂志2006，13，5： | 1 |
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