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1花粉管通道法介导的铁皮石斛转基因技术显示文摘该研究以含有GFP和GUS基因的质粒和农杆菌为载体,采用花粉管通道法对铁皮石斛进行转基因技术研究。结果表明:(1)铁皮石斛种子萌发和原球茎生长对卡那霉素的最低致死浓度分别为90和150 mg·L^(-1)。进一步研究证实,在筛选转化种子和原球茎时,可分别向培养基中添加100和150 mg·L^(-1)的卡那霉素进行选择培养。(2)以携带GFP和GUS基因的质粒(pSuper1300和pBI121)和农杆菌为载体,用无菌去离子水重悬质粒pSuper1300和pBI121至浓度为100 ng·μL^(-1),用2%蔗糖+1/2MS+0.1%silwet-77+0.1%AS或5%蔗糖+0.1%silwet-77+0.1 mmol·L^(-1)AS重悬携带质粒pSuper1300和pBI121的农杆菌至菌液浓度为OD_(600)=0.7~0.8;在授粉后0.5~2.5 h内使用柱头滴加法导入携带外源基因的质粒或农杆菌溶液,收集成熟的转化种子,经选择培养及PCR检测发现,几乎所有处理的转化材料均能检测出外源GFP和GUS基因片段。另外,与农杆菌相比,以质粒为载体进行转化,可获得更高的结实率。该研究结果为铁皮石斛的基因工程育种提供了参考。冼康华 付传明 何金祥 龚庆芳 苏江 黄宁珍 2017广西植物2017,37,9:8
2花粉管通道法介导PRSV-CP基因dsRNA转化番木瓜显示文摘以番木瓜‘蔬罗Ⅰ号’植株为受体材料,采用花粉管通道技术将番木瓜环斑病毒外壳蛋白(PRSV-CP)基因3′-端同源序列dsRNA转入番木瓜子房中。用PCR方法对T0代种子进行了分子检测,获得53株转基因番木瓜,转化率达到8.9%;对获得的T0代转基因番木瓜进行了田间抗病性鉴定,结果表明,转基因番木瓜植株对番木瓜环斑病毒(PRSV)表现为不同程度的抗性,可以推迟发病。魏军亚 刘德兵 陈业渊 蔡群芳 周鹏 2008西北植物学报2008,28,11:7
3百合花粉管通道法遗传转化的研究显示文摘为了提高百合花粉管通道法遗传转化效率,采用pBI121-GFP-FT载体,对外源基因携带形式、导入方式和导入时间进行了研究。对质粒和农杆菌两种形式携带的外源基因的研究结果表明:菌液形式携带外源基因有利于百合花粉管通道法遗传转化。采用切割柱头授粉后涂抹外源基因、常规授粉后涂抹外源基因以及子房注射外源基因3种导入方式进行百合遗传转化,结果表明常规授粉后涂抹外源基因更适宜百合花粉管通道法遗传转化。对授粉后0 h涂抹外源基因和授粉后延迟3 h涂抹外源基因2种处理进行比较研究,结果表明授粉后0 h涂抹外源基因更适宜于百合花粉管通道法遗传转化。将试验所得种子进行荧光观察,转基因植株有绿色荧光。PCR检测结果表明GFP-FT基因已经整合到百合基因组中。李双 袁霖 贾桂霞 2011黑龙江农业科学2011,,8:4
4CspB基因植物表达载体的构建及转化玉米自交系的研究显示文摘利用来自Bacillus subtilis细菌的CspB基因(Gene ID:936224)构建了Ubiquitin启动子驱动的CspB基因植物表达载体PBPC-CspB-bar,以bar基因为抗性筛选标记,通过花粉管通道法将构建的表达载体转化到玉米自交系京501、京517和吉444,通过喷洒除草剂筛选得到60株草丁膦抗性植株,用PCR检测得到48株bar基因阳性植株,将获得的转基因植株进行CspB基因PCR鉴定,获得13株同时整合CspB和bar的转基因株系。陈丽娟 黄从林 张秀海 吴忠义 杨德光 2011作物杂志2011,,3:4
5玉米DNA导入水稻的RAPD分子验证显示文摘对高光效C4植物玉米DNA为供体、通过花粉管通道技术导入水稻所获得的水稻后代进行了RAPD分析.结果表明:从60个引物中找到12个引物检测出DNA的多态性,证明外源DNA导入受体后引起后代基因组的显著变异.王永斌 孟庆勇 刘传雪 王广金 2009生物技术通报2009,25,S1:2
6碱蓬DNA导入玉米变异后代耐盐性研究及SSR分析显示文摘研究导入野生碱蓬DNA的玉米自交系后代的耐盐性及分子水平的变异,从中筛选出较强的耐盐新材料,为玉米耐盐育种提供种质资源。结果表明,在250 mmol/L的Na Cl胁迫后,导入系K-3与其他导入系及受体相比存活绿叶多,鲜重和干重变化率较低,耐盐性明显。SSR分析得出,引物phi065标记座位检测到导入系K-3与供体有相同的带型,phi077标记座位检测到导入系K-3还产生与受体和供体均不相同的带型,分析导入系K-3的耐盐性可能是由于整合了部分野生碱蓬DNA片段的结果所致。钱海霞 高树仁 王霞 孙丽芳 王振 2015玉米科学2015,23,1:1
7分子标记结合田间观察快速鉴定外源DNA导入玉米的变异后代显示文摘本研究通过花粉管通道导入技术将甜高粱总DNA导入优良玉米自交系4112和8902中,并应用RAPD标记技术从导入后代中筛选出变异后代。从306个RAPD引物中筛选出79个引物对供受体及导入后代进行鉴定,其中10个随机引物在供、受体和导入后代间有多态性。对D1和D2代进行田间茎秆糖分调查,并对D2代室内考种,发现糖分含量和穗长、穗重、轴粗、穗粒重等穗部性状都发生了明显变异。结合分子鉴定结果,最终获得了一批变异材料。刘芳 刘晓鑫 高树仁 袁英 孔祥梅 刘德璞 李晓辉 2008分子植物育种2008,6,4:1
8蛋白激发子基因peaT1转基因棉花的获得及初步鉴定显示文摘将来源于极细链格孢菌的蛋白激发子基因peaT1克隆到植物表达载体pCAMBIA2300上,成功构建了含有增强子和多联终止子的植物表达载体pCAMBIA2300-G4AS-peaT1。通过花粉管通道法转化棉花,经卡那霉素抗性筛选、PCR和RT-PCR检测获得一株转基因棉花植株,其植株茎粗和成铃数均高于非转基因对照株。唐宏琨 曾洪梅 杨秀芬 李国媛 盛德鹏 袁京京 邱德文 2012生物技术通报2012,28,1:1
9外源DNA经花粉管通道法导入玉米及后代分子验证研究进展显示文摘花粉管通道法自建立以来,在谷类分子育种中已有广泛应用.作为世界重要的经济作物和良好青储饲料,玉米是谷物中最佳研究和最易操作的遗传系统,使其成为首要模式系统.阐述了中国科学家最早提出的花粉管通道技术以及在玉米应用方面的最新研究进展.详细地综述了花粉管通道技术的操作、遗传转化机制和导入后代的分子验证方法,并对今后的发展前景进行了展望.王世伟 姜丽娟 李旭业 2010高师理科学刊2010,30,2:0
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