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| 1 | SELDI蛋白质芯片筛选差异蛋白分子的二级鉴定显示文摘目的探讨以SELDI蛋白质芯片筛选后的细胞差异表达蛋白的分离和鉴定方法及其意义。方法以经体外培养及10μmol/L褪黑素药物干预的内皮祖细胞差异表达蛋白质为研究对象,分别采用Tricine-SDS-PAGE和双向凝胶电泳方法进行差异蛋白分离及结果比较,以FT-MS二级质谱鉴定。结果经Tricine-SDS-PAGE分离后,选取分子量为53 ku左右的趋势性差异表达蛋白进行FT-MS分析,质谱鉴定为微管蛋白-α3(吻合度评分为87)。经双向凝胶电泳分离后,于凝胶近酸性端、分子质量在72~95 ku之间区域,选取蛋白表达量较高的一点,质谱鉴定其为人热休克蛋白90-α(吻合度评分为91)。结论 Tricine-SDS-PAGE对于大致35~62 ku范围的蛋白分离较清晰、重复性好且样品用量少,2-DE对最低上样量有较严格要求,但它能提供分子质量、等电点双重参数来更准确定位所感兴趣蛋白点,且对大分子质量蛋白的分离效果更佳,经质谱鉴定结果理想。 | 卡米拉.阿不里米提 仉红刚 马可 王琴 张秋菊 修瑞娟 | 2012 | 基础医学与临床2012，32，3： | 1 |
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