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1沉默SOCS1共表达HMGB1及肿瘤相关抗原质粒构建显示文摘目的:构建沉默细胞因子信号抑制因子1(SOCS1)并共表达高迁移率族蛋白B1(HMGB1)及肿瘤相关抗原的质粒。方法:首先PCR扩增带有胰岛素信号肽序列的IRES片段和带有胰岛素信号肽序列的HMGB1片段,PCR拼接后取代IRES及EGFP片段装入pIRES-EGFP载体中构建pIRES/sig-HMGB1质粒。然后PCR扩增带有NY-ESO-1编码序列及MAGE3(表位)编码序列亚克隆入pIRES/sig-HMGB1中后以此为模板扩增CMV+NY-ESO-1-MAGE3(表位)-IRES+胰岛素信号肽-HMGB1片段。最后合成针对SOCS1的shRNA序列并连接入pENTR/U6载体,扩增U6-shSOCS1片段与CMV+NY-ESO-1-MAGE3(表位)-IRES+胰岛素信号肽-HMGB1片段连接后装入pIRES-EGFP中,完成p/shS1-NY-IRES-sig-HMGB1质粒的构建并测序,酶切和PCR验证质粒。结果:经测序证实所构建质粒序列与预期序列一致,酶切和PCR验证质粒结构正确。结论:成功构建可用于修饰DC疫苗的p/shS1-NY-IRES-sig-HMGB1质粒,为构建新型DC疫苗奠定了基础。霍佳 杨莉莉 魏枫 于津浦 李慧 任秀宝 2011天津医科大学学报2011,17,1:0
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