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| 1 | 贝类中诺如病毒SYBR Green I实时定量RT-PCR检测方法研究显示文摘将诺如病毒(Noroviruses,NVs)RT-PCR特异产物纯化后与pGEM-T载体连接并转化至感受态细胞DH5α,经测序鉴定,提取阳性克隆质粒DNA,梯度稀释后作为实时荧光定量PCR的标准质粒。使用SYBR Green I染料建立检测贝类中NVs的实时荧光定量RT-PCR方法。结果表明,本方法标准曲线线性范围可达6个数量级(108~103拷贝),R2为0.9983,比常规RT-PCR方法敏感100倍,且特异性良好,与贝类中的轮状病毒、甲肝病毒均不反应;批内和批间重复性良好,变异系数(CV)分别在0.28%~4.03%和1.47%~5.53%范围。该方法具有简便、敏感、高效、稳定等优点,可用于水产品中NVs的定量检测。 | 苏来金 周德庆 马丽萍 曹慧慧 | 2009 | 中国食品学报2009，9，6： | 3 |
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