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| 1 | 飞蝗总DNA的抽提及其RAPD分析条件的摸索显示文摘通过试验寻求得到一种快速、简便抽提飞蝗 (Locustasp .)总DNA的方法 ,使每头雄性和雌性成虫分别可以得到 5 0和 10 0 μg的总DNA。所得到的总DNAOD2 60 /OD2 80 为 1 5~ 2 2 ,分子量 45kb。为了获得高分子量的DNA产品 ,使RPAD结果具重复性 ,酚氯仿抽提后的DNA沉淀用灭菌Tip头挑出 ,而不用离心收集。对各种分析条件如模板、Taq酶、dNTP及引物的浓度、不同的PCR仪、反应管进行了比较试验 ,发现在一定的范围内 ,它们对RAPD结果影响不大。用优化的试验条件对我国 3个飞蝗亚种 5个地理种群进行RAPD分析 ,结果在 3个亚种UPGMA聚类图中 ,东亚飞蝗和西藏飞蝗的 2个种群以 10 0 %Bootstrap分别聚类在一起 ,亚洲飞蝗与东亚飞蝗的 2个种群以 6 6 %的Bootstrap聚类在一起。在 3个亚种所有个体的UPGMA聚类图中 ,亚种内的所有个体都聚类在一起 ,各自形成独立分支 ,说明 3个飞蝗亚种有明显的区别。西藏飞蝗的 2个种群之间 ,群居型与散居型东亚飞蝗之间在聚类图中混合聚类 。 | 张民照 康乐 | 2001 | Zoological Research2001，22，1： | 54 |
| 2 | 单核苷酸多态性的研究技术显示文摘本文在对人类基因组单核苷酸多态性 (SNP)的概念做简要说明的基础上 ,系统地介绍 14种检测分析SNP的技术和方法的原理、操作要点及其优缺点。 | 罗怀容 施鹏 张亚平 | 2001 | 遗传2001，23，5： | 54 |
| 3 | RAPD技术的标准化问题显示文摘 | 汪永庆 徐来祥 张知彬 | 2000 | 动物学杂志2000，35，4： | 42 |
| 4 | 濒危植物七子花RAPD条件的优化显示文摘以改进SDS法抽提濒危植物七子花嫩叶总DNA ,进行随机扩增多态DNA(RAPD)分析 ,分别测试了镁离子 ,dNTP ,模板DNA含量 ,引物和DNA聚合酶量对反应结果的影响 ,通过各因子的组合研究 ,可知七子花RAPD分析较适宜的扩增条件是 :1 5μLPCR反应体积 ,1×Taq酶配套缓冲液 (1 0mmol/LTris·HClpH 9.0 ,50mmol/LKCl,0 .1 %TritonX_1 0 0 ) ,2 .5mmol/LMgCl2 ,2UTaq酶 (上海华美公司 ) ,1 0ng模板DNA ,2 0pmol引物 (上海Sangon公司 ) ;dATP、dCTP、dGTP、dTTP各 0 .1mmol/L。 | 李钧敏 金则新 柯世省 | 2002 | 植物学通报2002，19，4： | 36 |
| 5 | 贵州小型香猪基因组DNA的AFLP检测研究显示文摘报道了AFLP标记在研究贵州小型香猪遗传多态性方面的应用和该品系猪个体基因组DNA的AFLP扩增结果 ,分析了贵州小型香猪的群体遗传结构。实验应用 10条AFLP引物 ,用PstⅠ酶切 ,对 17头猪基因组DNA进行AFLP反应 ,共获得 116个AFLP标记 ,单引物获得的标记数在 2~ 2 2间 ,贵州小型香猪群体相似系数AFLP研究结果为 0 .86 6 (0 .76 0~ 0 .96 7) ,该研究为评价贵州小型香猪的遗传稳定性提供了相关的参数 。 | 吴丰春 魏泓 甘世祥 周建华 马静 | 2001 | 遗传2001，23，5： | 30 |
| 6 | 部分枣属植物硅胶干燥叶片DNA提取方法的比较显示文摘以硅胶干燥15 D和半年的3种野生枣属植物叶片为试材,分别采用简易CTAB法、高盐沉淀法和高盐低PH法3种方法提取基因组总DNA,通过A260/A280、琼脂糖凝胶电泳、PCR扩增分析对提取的基因组DNA进行了鉴定。半年内不同保存时期的材料对于DNA提取没有明显差异;高盐沉淀法所得DNA纯度最高。 | 李学营 彭建营 彭士琪 | 2006 | 河北农业大学学报2006，29，1： | 26 |
| 7 | 麻疯树RAPD分析的影响因素显示文摘麻疯树 (JatrophacurcasL .)是一种具有广泛潜在用途的植物 .为获得有重复性的RAPD分析结果 ,以对麻疯树的遗传多样性进行研究 ,本文作者对影响RAPD扩增结果的多个因素 ,包括缓冲体系成分 ,Taq酶、引物、模板浓度 ,PCR循环数等进行了研究 ,确定了反应的最适条件范围 .图 4参 | 孙晴 徐莺 颜钫 陈放 | 2002 | 应用与环境生物学报2002，8，3： | 24 |
| 8 | 红树植物海漆ISSR条件的优化显示文摘在利用ISSR分析对海漆Excoecariaagallocha的遗传多样性进行了研究。为获得清晰、重复性的ISSR扩增结果,对影响ISSR_PCR的多个因素,包括DNA的提取、模板浓度、TAQ酶的选择与用量、Mg2+和dNTP浓度等进行了比较、优化,确定了海漆ISSR_PCR分析最适宜的扩增条件:10μLPCR反应体积中,1×Taq酶配套缓冲液(10mmol LTris·HCl,pH9 0,50mmol LKCl,0 1%TritonX-100),0 6~0 7UTaqDNA聚合酶(上海申能博彩生物科技有限公司),0 2μmol L引物,0 2mmol LdNTP,1 5~2 0mmol LMgCl2,10ng模板DNA。 | 张志红 谈凤笑 何航航 吴令辉 钟才荣 施苏华 | 2004 | 中山大学学报(自然科学版)2004，43，2： | 22 |
| 9 | 不同方法对枣叶片总DNA提取效果的影响显示文摘以串杆枣的成熟鲜叶为试材,分别采用-20℃、-70℃和硅胶脱水干燥3种方法保存样品,采用简易CTAB法、高盐沉淀法与高盐低pH值法分别对3种方法保存的样品及对照样(鲜叶)进行了基因组DNA提取效果的比较分析。结果表明,3种方法均能有效地从枣叶片中获得质量较高的DNA,以高盐沉淀法所得的DNA纯度最高,高盐低pH值法次之。就DNA的产量而言,高盐沉淀法的DNA产量相对较低,低于其他的2种方法,但未达到显著水平。硅胶干燥法和-70℃超低温保存的样品与鲜叶相比,所提DNA的质量和产量均无明显差异,均能满足PCR扩增要求。硅胶保存法适于野外远距离采样。 | 李莉 彭建营 白瑞霞 | 2007 | 果树学报2007，24，3： | 21 |
| 10 | 紫外条件诱导下麦长管蚜DNA的变异研究显示文摘用 RAPD-PCR技术研究了麦长管蚜 Macrosiphum avenae在紫外辐射诱导下的 DNA分子变异与多态性。用相似性指数 ( F )和遗传距离 ( D)及聚类分析对本研究所筛选的 4种引物 S88、S71、S1 0 3、S6 6的扩增结果分析表明 :在紫外辐射 ( 2× 4 0 w)诱导条件下蚜虫的平均遗传距离为 0 .2 0 2 8,而在自然状态下蚜虫 (对照 )平均遗传距离为 0 .0 81 2 5。紫外辐射处理下的实际遗传距离为 0 .1 2 1 55,在该水平上 DNA的变异频率为4 7.6 6 6 7%。说明紫外辐射引起了蚜虫 DNA的变异 ,该变异是否能遗传值得进一步研究。 | 姚建秀 赵惠燕 | 2001 | 西北农业学报2001，10，1： | 21 |
| 11 | 烟粉虱B型及二个非B型种群的SCAR分子标记显示文摘用随机引物H16对浙江采集的烟粉虱(Bemisiatabaci)B型和2个非B型种群进行RAPD分子标记,结果表明:B型、非B型ZHJ-1和非B型ZHJ-23个种群分别能稳定地扩增出446、390和1317bp的特异性片段。将3个种群的特异性片段分别克隆和测序,根据测序结果设计3对SCAR引物。通过PCR反应条件的优化,B型、非B型ZHJ-1和非B型ZHJ-23个种群各自的SCAR引物分别能扩增出本种群的特异性条带,其大小依次为439、366和1238bp,而其它种群与温室白粉虱(Tri-aleurodesvaporariorum)则无扩增。 | 臧连生 江彤 徐婧 刘树生 张友军 | 2006 | 农业生物技术学报2006，14，2： | 19 |
| 12 | 随机扩增多态DNA规范化反应体系的探讨显示文摘在研究猪分子标记遗传距离同杂种优势的关系时 ,对模板浓度和纯度、引物浓度、dNTP浓度、Mg2 +浓度、不同商标的Tag酶等影响RAPD扩增的因素进行了系统的分析 ,在此基础上建立了适宜于本实验室研究的最佳RAPD技术体系 :2 5 μl反应体系中 ,含 10×buffer 2 .5 μl,MgCl2 1.75mmol/L ,dNTP 0 .2 5mmol/L ,引物 0 .2 4μmol/L ,Tag酶 2U ,模板 5 0~ 10 0 μg ,1μg/μlBSA。反应程序为 :94℃预变性 5min ,然后 94℃变性 1min ,36℃退火1min ,72℃延伸 2min4 0个循环 ,最后在 72℃延伸 10min。 | 蒋曹德 邓昌彦 熊远著 | 2002 | 生物技术通报2002，18，3： | 15 |
| 13 | 石榴DNA提取方法的比较及抗氧化剂对DNA质量的影响显示文摘比较了SDS-CTAB微量提取法和改进的SDS微量提取法提取的石榴叶片DNA质量,结果认为两种方法提取的DNA均可用于RAPD分析,但SDS微量提取法较适合于石榴叶片DNA的提取。试验中还研究了抗氧化剂PVP,α-巯基乙醇和抗坏血酸3种试剂单独使用及PVP与α-巯基乙醇混合使用对SDS-CTAB微量提取法的影响,发现与对照相比,单独加抗坏血酸及PVP与α-巯基乙醇混合使用能很好地防止DNA在提取过程中的褐化。 | 杨荣萍 李文祥 龙雯虹 杨正安 | 2005 | 云南农业大学学报2005，20，5： | 14 |
| 14 | 诃子及其混淆品RAPD分析显示文摘目的 :对不同品种的诃子进行 DNA指纹图的鉴别研究 ,并对 RAPD在中药材鉴别中存在的一些问题进行研究。方法 :应用 RAPD技术对诃子及其常见混淆品进行 DNA指纹图多态性的比较。结果 :DNA指纹图显示 ,各样品间具有不同的遗传关系 ,根据这些差别可进行鉴别 ,同时对存在的若干问题提出了解决的方法。结论 | 黄丰 王培训 周联 曹柳英 梁瑞燕 徐鸿华 刘军民 | 2000 | 中草药2000，31，9： | 14 |
| 15 | 苹果基因组RAPD反应体系影响因子的优化显示文摘分析了影响苹果基因组RAPD扩增的几种因素,包括模板DNA、Mg2+、dNTPs和引物的浓度、以及Taq酶的用量等,并提出了一个最佳方案,即25μl总反应体系中含DNA模板40~60ng、Mg2+2.0mmol/L、dNTPs0.2mmol/L、引物0.45μmol/L、Taq酶1.2U。本研究的PCR反应程序为:94℃预变性4min,然后按94℃变性30s,37℃退火35s,72℃延伸90s进行40个循环,最后72℃延伸5min。 | 田义轲 王彩虹 张继澍 戴洪义 顾耘 段方猛 | 2003 | 莱阳农学院学报2003，20，3： | 14 |
| 16 | 波尔山羊和江苏本地山羊的AFLP和RAPD分析显示文摘实验山羊共 10 5只 ,其中波尔山羊 6 0只 (公母羊各半 ,采血样 2 0个 ,组织样 4 0个 ) ,徐淮山羊 30只 (公母羊各半 ,每羊采血样 1个 ) ,海门山羊 15只 (公羊 7只 ,母羊 8只 ,每羊采血样 1个 )。分别提取DNA ,按品种构建DNA池。应用 36个选择性引物组合对波尔山羊、徐淮山羊和海门山羊品种间AFLP多样性进行研究 ,其中 2 9个引物组合共扩增出 32 5 3个标记 ,包括多态标记 92个 ,平均每个引物组合扩增 3.17个多态标记 ,多态频率达2 .8%。多态标记数较多的引物组合为 :E0 0 +ACG/M 0 0 +CAA(13个 )、E0 0 +ACG/M0 0 +CAG(10个 )、E0 0 +AAC/M0 0 +CAC(8个 )和E0 0 +AAC/M0 0 +ACT(7个 )。从 93个随机引物中筛选出品种间多态性较强、重复性好的引物 2 2个 ,对 3个品种池DNA进行RAPD扩增 ,共扩增出 183个标记 ,其中多态标记 6 0个 ,平均每个引物扩增2 .73个多态标记 ,多态频率为 32 .8%。两种方法得到一致结果 ,即徐淮山羊与海门山羊遗传距离最近 ,徐淮山羊与波尔山羊次之 ,海门山羊与波尔山羊遗传距离最远。按UPGMA法将海门山羊与徐淮山羊聚为一类 ,其次为波尔山羊。两种方法均能较好地反映 3个山羊品种的遗传差异 ,但AFLP方法多态标记数更多。 | 曹少先 杨利国 姜勋平 刘红林 陆维忠 向阳海 | 2002 | 中国农业科学2002，35，10： | 13 |
| 17 | 不同提取方法对厚朴叶片总DNA提取效果的影响显示文摘以厚朴(Magnolia officinalis Rehd.et Wils)叶片为材料,采用SDS-CTAB结合法、高盐低pH值法、CTAB法、SDS法等4种方法分别对2种方法保存的样品及对照样(鲜叶)进行了基因组DNA提取效果的比较,并进行ISSR-PCR检测。结果表明:4种方法均能从厚朴叶片中获得高质量的DNA,其中以SDS-CTAB结合法所得的DNA纯度最高,高盐低pH值法次之,CTAB法提取的厚朴叶片DNA纯度最低;高浓度NaAc的引入及相应的冻融,可以提高所得厚朴基因组DNA的纯度;硅胶干燥和-70℃超低温保存的样品与鲜叶相比,所提DNA的质量无明显差异,均能满足PCR扩增的要求。 | 于华会 杨志玲 杨旭 舒枭 刘若楠 | 2010 | 中南林业科技大学学报2010，30，4： | 11 |
| 18 | 单核苷酸多态性检测方法的研究进展显示文摘单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)作为第三代遗传标记已经广泛应用于基因作图、疾病相关性分析、群体遗传学及药物研究等领域。因此建立高度自动化和高通量的SNP检测分析技术十分重要。简要介绍了国内外几种主要SNP检测技术的原理和检测分析手段,并对SNP高通量检测技术的发展进行了展望。 | 陈冬 吴登俊 | 2008 | 生物技术通报2008，24，2： | 11 |
| 19 | RAPD在商品中药鉴别中若干问题的探讨显示文摘以各地产西洋参为研究对象,对影响中药材随机扩增多态性DNA(RAPD)的若干问题进行探讨。研究发现,中药材DNA模板的降解程度、纯度、浓度,Tap酶的浓度,Mg2+浓度以及循环参数等诸多因素皆会不同程度的影响扩增结果,同时推荐一个较为适用的循环参数。 | 王培训 黄丰 周联 曹柳英 梁瑞燕 | 1999 | 中药新药与临床药理1999，10，2： | 10 |
| 20 | 波尔山羊随机扩增多态DNA标记与体重和体尺的关系显示文摘应用 19个波尔山羊个体间多态性较强、重复性好的随机引物对 2 0只 5~ 6月龄波尔山羊公羊组织样DNA进行扩增 ,共得到 15 6个标记 ,其中可变标记 47个。t检验表明 ,OPE 15 .1阳性组腰角宽显著高于阴性组 ,OPH 15 .8、OPE 15 .4阳性组臀端宽显著高于阴性组 ;而OPH 13 .6、OPH 13.8等标记阴性组多个体尺、体重性状显著高于阳性组。这说明这些标记与特定性状可能存在相关 ,其遗传基础可能是该标记与控制性状的QTL或主基因连锁。 | 曹少先 杨利国 赵文魁 张兆柏 姜勋平 茆达干 | 2001 | 华中农业大学学报2001，20，2： | 10 |
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