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1Vero细胞膜上与日本脑炎病毒结合分子的初步筛选显示文摘目的:寻找Vero细胞膜上可与JEV结合的分子。方法:采用免疫共沉淀(Co-IP)技术,分离出Vero细胞膜上可与日本脑炎病毒(JEV)结合的分子,做质谱(MS)分析针对特异结合分子进行检测。用流式细胞术(FCM)和免疫荧光实验(IFA)验证候选结合分子与JEV结合的情况。结果:Co-IP产物经SDS-PAGE分离出3条可以与JEV分子特异性结合的条带。其中,MS分析只鉴定出相对分子质量(Mr)约为90000的分子为热休克蛋白90β(HSP90β)。FCM及IFA实验结果表明抗HSP90β单克隆抗体(mAb)可以明显阻断JEV与Vero细胞结合。结论:Vero细胞膜上的HSP90β能与JEV结合。李焱 时莹 丁天兵 徐志凯 2010细胞与分子免疫学杂志2010,26,5:3
2日本脑炎病毒受体74×10^3分子的分离与初步鉴定显示文摘目的分离和初步鉴定日本脑炎病毒(JEV)易感细胞C6/36和Vero细胞上受体分子。方法应用免疫共沉淀(Co-IP)技术,从C6/36和Vero细胞分离与JEV结合的受体分子,做质谱分析鉴定和Western blot检测。用激光共聚焦技术(LSCM)观察候选受体分子在细胞膜上的定位及与JEV结合的情况。结果经过Co-IP反应,从C6/36、Vero细胞上分离出多个与JEV结合的分子条带。质谱分析首次鉴定出一个蛋白,即C6/36细胞上与JEV结合的相对分子质量(Mr)为74×10^3分子,为HSC70蛋白。进一步用抗HSC70抗体做Western blot,检测到从C6/36和Vero细胞膜上Co-IP分离出的74×10^3蛋白。LSCM观察到JEV吸附在C6/36细胞膜上时,HSC70蛋白与JEV共定位。结论C6/36细胞上肘,为74×10^3的HSC70可能是JEV的受体分子。任君萍 雷迎峰 张伟 杨敬 马文煜 2009中华微生物学和免疫学杂志2009,29,4:1
3日本脑炎病毒受体功能缺陷细胞与亲代细胞膜分子差异的鉴定显示文摘鉴定日本脑炎病毒(JEV)受体功能缺陷细胞3A10-3F与亲代细胞BHK-21膜分子表达的差异,以发现JEV受体候选分子。3A10-3F与BHK-21细胞膜蛋白用氯仿去脂法分别提取,通过二维电泳(2-DE)分离。经ImageMaster 2D软件分析比较后,选取差异点做液质联用质谱分析(LC-MS/MS)。发现有23个蛋白点在两组2-DE凝胶中有显著差异表达,LC-MS/MS鉴定了14个蛋白质,其中有4个膜蛋白,即钙结合蛋白annexin 1,annexin 2;电压依赖的离子通道(VDACs)蛋白VDAC1,VDAC2。上述结果为深入鉴定JEV受体分子特性与功能,阐明JEV致病机理提供了线索。任君萍 马文煜 丁天兵 2008科学技术与工程2008,8,18:0
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