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1人源化抗体制备及其应用研究进展显示文摘伴随着一系列重大生物技术(如PCR技术、抗体库技术、转基因动物技术等)的发展,抗体技术从最初的嵌合抗体、改型抗体逐渐发展为今天的人源化抗体。人源化抗体在治疗肿瘤、自身免疫性疾病和器官移植等方面已经显示出独特的优势和良好的应用前景。介绍了人源化抗体的构建及其表达系统,并对其临床应用进行了展望。王业荣 童德文 李立 刘文明 王业炳 2007生物技术通讯2007,18,4:7
2抗大豆Ⅱ号亚型钙调素单克隆抗体的制备与鉴定显示文摘目的:制备抗大豆Ⅱ号亚型钙调素(SCaM-2)单克隆抗体(mAb)并进行初步鉴定。方法:从含有pSCaM-2的大肠杆菌BL21中,提取并纯化SCaM-2。以其作为抗原免疫BALB/c小鼠后,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞经细胞融合筛选及克隆化,建立稳定分泌SCaM-2mAb的杂交瘤细胞株并对抗SCaM-2mAb进行鉴定。结果:经两次细胞融合,共获得10株可稳定分泌抗SCaM-2mAb的杂交瘤细胞株。对其中3株杂交瘤细胞制备的腹水mAb(6F11F3、7C5E9、7E10E2)用间接ELISA及免疫印迹实验表明,在高稀释度时,mA6F11F3可识别SCaM-1和SCaM-2,而mAb7C5E9和7E10E可分别识别SCaM-4和SCaM-5。Ig亚类鉴定结果表明,mA6F11F3和7C5E9均为IgG2a,mAb7E10E2为IgG1。相加实验的结果显示,mAb6F11F3和7C5E9可能识别SCaM-2相同的抗原表位;而mAb7E10E2可能识别不同的抗原表位mAb6F11F3对SCaM-2的亲和常数为(2.127±0.418)106M-1,mAb7C5E9对SCaM-4的亲和常数为(9.69±2.406×106M-1,mAb7E10E2对SCaM-5的亲和常数为(1.2030.429)×107M-1。结论:制备了可识别不同SCaM亚型的mAb6F11F3、7C5E9及7E10E2,为研究SCaM的特性及功能提供了重要的制剂。王红 吴萌 赵宝华 赵亚朴 2007细胞与分子免疫学杂志2007,23,1:2
3抗人甲状腺球蛋白人源化单克隆抗体的制备显示文摘目的获得抗人甲状腺球蛋白(hTg)人源化单克隆抗体。方法从分泌抗人甲状腺球蛋白的杂交瘤细胞株hTg-60中提取总RNA,逆转录-酶链聚合反应(RT-PCR)扩增出鼠源性单克隆抗体hTg-60的VH及VL基因,经基因测序分析,设计出人源化抗体的基因引物,获得抗Tg单克隆抗体人源化VH及VL基因并将其克隆入真核表达载体,转染中国仓鼠卵巢细胞(CHO),表达人源化抗hTg抗体。结果成功获得了6株能稳定分泌抗hTg人源化抗体的细胞株。结论为进一步获得人源化的hTg抗体及临床应用奠定了基础。康向东 马艳春 张隆 吴蓉 华蕾 2009检验医学2009,24,2:1
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